Штамм гриба продуцент аттрактанта овсяной нематоды

Штамм гриба продуцент аттрактанта овсяной нематоды

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Соеетскнк

Социалистических респубини

ОП ИКАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

683701 (72) Авторы изобретения

Н. А. Мехтиева, А. А. Раджабова и С. Г. Гасанова

Сектор микробиологии AH Азербайджанской CCP (7!) Заявитель (54) ШТАММ ГРИБА Arthrabatrgs O5$OSPOm

УРВМ -117 — ПРОЛУЦЕНТ АТТРАКТАНТА

ОВСЯНОЙ НЕМАТОЛЫ

Изобретение относится к области мик-, робиологии, в частности к производству средств борьбы с фитонематодами.

Как известно, некоторые представители почвенных грибов способны использовать нематоды в качестве пищевого суб5 страта $1).

Известен также вид хишного гриба

Prthpobotriqs oEi оуро а Ргевэ способный образовывать ловчий аппарат

to для залавливания фитонематод f 2).

Однако не известна способность атого гриба синтезировать аттрактанты почвенных нематод.

Гриб д 1И оЬоТгцв обфо рога У е ь

-1 1 7 выделен из каштановой почвы

Шемахинского района Азербайджанской

ССР в апреле 196 3 г. и хранится в музее культур Сектора микробиологии

АН Азербайджанской CCP на косяке сус20 ло — arap под номером 117.

Морфологические признаки .

Органическая среда. Колония на сусловом агаре широко-распростертая, полностью покрываюшая поверхность агара в чашке Петри, на 7 день роста — ватообразно-войлочная с сильно развитыми мицелиальными тяжами; грязно-белая; запах сильный; спороношение обильное.

Конидиеносцы прямые, простые, с несколькими узлами, расположенными на заметном расстоянии, и ясно выраженными бородавками. Конидии обратно-яйцевидные, реже грушевидные с перегородкой, расположенной ниже середины, 17-29x1 116,5 мкм.

На мясопептонном агаре (М ПА) колония ограниченная, нежно-пушистая, сероватая, запах отсутствует; спороношение скудное, Конидиеносцы прямые, прос тые, с 1-2 узлами, снабженными до 4-5 бородавками. Конидии яйцевидные, удлиненно-яйцевидные, часто неравнобокие, 19,5-28х9,5-14 мкм.

Синтетическая среда. На агаризованной среде Чапека колония рыхло-ватообразная, более или менее ограниченная в росте, со слабо развитыми мицелиаль6837

fT р и м е р 1. Среду Мейзе, содержащую, г/л: 30 глюкозы, 4 крахмала, 55

1р мл глицерина, 2 пептона, 1 дигидро- фосфата калия КН РО4, 0,5 сульфата магния, 1,6 хлорида калия, 0,01 сульфата железа Fe504 и 10 агар-агара, засевают споровой суспензией, полученной смывом 40 культуры, росшей на косяке сусло-агар, и культивируют в колбах Эрленмейера емкостью 250 мл с 50 мл среды в термоь стате при 25-27 С в течение 14-20 дней.

Двухнедельную культуру, выросшую на агаризованной среде в колбе, заливают

20 мл гексана, тщательно взбалтывают и переносят в следующую колбу и т. д.

Экстракт, содержащий летучие продукты, упаривают до минимального объема под вакуумом. Таким же методом экстрагирурт мицелий водой.

Обратную сторону нижней крышки чашки Петри (диаметр 6 см) с 1,5%-ным

55 голодным агаром делят на 4 равных сектора для облегчения микроскопирования.

В центре одного сектора помешают диск ными тяжами; сероватая, запах слабо выражен спороношение умеренное; конидиеносцы прямые, простые, с 2-4 узлами, снабженными 6 бородавками. Конидии обратно-яйцевидные, с перегородкой, расположенной ниже середины, 2231х11-16,5 мкм.

В присутствии нематод в стерильной воде ловчий аппарат образуется на молодых гифах в виде округлых колец и их сплетений; иногда они возникают прямо

1 от конидий; конидиеносцы с последовательными узлами числом до 12, конидии обратно-яйцевидные и грушевидные 1837,5х12,5-25,5 мкм. 15

Физиолого-биохимические признаки.

Отношение к источнику углерода. Усваивает с образованием органических кислот глюкозу, фруктозу, лактозу и крахмал, Хорошо растет, но не образует органичес- 20 кие кислоты на сахарозе, галактозе, рамнозе и манните.

Не усваивает мальтозу и целлюлозу.

Отношение к источнику азота. Использует нитраты, минеральные и органические соли аммония, аминокислоты, а также вещества, содержащие в основном азот в виде протеидов — пецтон, дрожжевой экстракт, сусло.

Оптимальный рост при 25-27 C.

Оптимальное значение рН среды 6,06,2.

01 4 из фильтровальной бумаги диаметром 1 см, пропитанный упаренным водным или гексановым экстрактом. На противоположный . от этого сектор" наносят каплю суспензии, содержащую порядка 100 особей овсяной нематоды Рагюф"ОРСА гессен @us . (Пример 2. По 0,2 мл гексановых и водных экстрактов летучих продуктов вносят в лунку диаметром 1 см, вырезанную в агаре.

При использовании гексанового экстракта добиваются полного испарения reKсана, а затем лунку покрывают покровным стеклом. Наблюдения проводят в т чение 18 ч с интервалами в 1-2 ч. Чашки выдерживают в темном месте при

25 С и определяют активность препарата как отношение количества привлеченных нематод к общему количеству нематод.

Экстракты испытывают трехкратно.

При работе с водным экстрактом летучих продуктов контролем служит фильтр, смоченный водой.

Высокую (80%) активность по отношению к овсяной нематоде проявляет водный смыв мицелия. Активность гексанового смыва летучих продуктов составляет 70-72%. Визуальные наблюдения показывают массовое скопление нематод под покровным стеклом или бумажным фильтром через 16 18 ч выдержки.

B первые часы наблюдений нематоды проявляют повышенную подвижность. По истечении 16-18 ч отмечается некоторый парализующий или токсический эффект, большинство особей наиодятся в неподвижном состоянии.

Формула изобретения

Штамм гриба МФЬгоЬ "Ц оЯоъРог©

% аешь — 117 — продуцент аттрактанта овсяной нематоды. Хранится в музее культур Сектора микробиологии AH Азербайджанской CCP под номером 117.

Морфологические признаки, Органическая среда. Колония на сусловом агаре широко-распростертая, полностью покрывающая поверхность агара в чашке Петри, на 7 день роста — ватообразно-войлочная с сильно развитыми мицелиальными тяжами, грязно-белая, запах сильный; спороношение обильное.

Конидиеносцы прямые, простые с несколькими узлами и ясно выраженными бородавками. Конидии обратно-яйцевидные, реже грушевидные с перегородкой, располо6Н3 0l

Составитель М. Мирзаев

Редактор Т. Шарганова Техред М. Келемеш Корректор B. Синицкая.

Заказ 5166/1 Тираж 755 Подписное

12НИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 женной ниже середины, 1. 7-29х1 116,5 мкм.

На мясопептонном агаре (МПА) коло— ния ограниченная, нежно-пушистая; сероватая; запах отсутствует; спороношение скудное. Конидиеносцы прямые, простые, с 1-2 узлами, снабженными до 4-5 бородавками. Конидии яйцевидные, удлиненно-яйцевидные, часто неравнобокие, 19,528х9,5-14 мкм. ! о

Синтетическая среда. На агаризованной среде Чапека колония рыхло-ватообразная, более или менее ограниченная в росте, со слабо развитыми мицепиальны15 ми тяжами; сероватая, запах слабо выражен; спороношение умеренное. Конидиеносцы прямые, простые, с 2-4 узлами, снабженными 6 бородавками. Конидии

I обратно-яйцевидные с перегородкой, расго положенной ниже середины, 22-31хl l16,5 мкм.

B присутствии нематод в стерильной воде ловчий аппарат образуется на молодых гифах в виде округлых колец и их сплетений; иногда они возникают прямо от конидий; конидиеносцы с последовательными узлами числом до 12, конидии обратно-яйцевидные и грушевидные, 1837,5х12,5-25,5 мкм.

Физиолого-биохимические признаки.

Отношение к источнику углерода. Усваивает с образованием органических кислот глюкозу, фруктозу, лактозу и крахмал.

Хорошо растет, но не образует органические кислоты на сахарозе, галактозе, рамнозе и манните. Не усваивает мальтозу и целлюлозу.

Отношение к источнику азота. Использует нитраты, минеральные и органичес( кие соли аммония, аминокислоты, а также вещества, содержащие в основном азот в виде протеидов — пелтон, дрожжевой экстракт, сусло.

Оптимальный рост при 25-27 С.

Оптимальное значений рН среды 6,06,2.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Жизнь растений. М., Изд. AH СССР, 1976, т. 2, с. 416-419.

2. Сопрунов Ф. Ф. Хищные грибы— гифомицеты и их применение в борьбе с патогенными грибами. М., 1958 (прототип).