Питательная среда для выращивания клубеньковых бактерий

Питательная среда для выращивания клубеньковых бактерий

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О Il И-C- A - Н И- Е

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советсмии

Социалмстнческих

Республик (1,687 1 1 9 (6I) Дополнительное к авт. свил-ву— (22) Заявлено 17 04.78 (21) 2606335/30-15 с присоединением заявки № (23) Приоритет (51) M. Кл

С 12 К 1/06

Госудерстеенный комитет

СССР ео делам изобретений н аткрытнй (У) УДК631.461.52 (088.8) Опубликовано 25.09.79. Бюллетень № 35

Дата опубликования описания 25.09.79 (72) Автори изобретения

3. А. Лупашку и Н. И. Чеботарь

Молдавский научно-исследовательский институт полевых культур (71) Заявитель (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ

КЛУБЕНЬКОВЫХ БАКТЕРИЙ

0,001 — 1,0

Остальное

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано нри выращивании клубеньковых бактерий Rhizobium japonicum, например, производственного штамма 646,применяемого для изготовления бактериального удобрения ризоторфина, а также для проверки его качества в производственных условиях, и перспективных штаммов 614а и 12.

Известны различные питательные среды, используемые для выращивания азотфиксирую пих микроорганизмов (11.

Известна также питательная среда — бобовый агар, содержащий отвар фасоли белой (или гороха1, сахар, агар-агар, воду, используемая для культивирования клубеньковых бактерий (2j.

Однако на таких питательных средах рост медленно-растущих клубеньковых бактерий, например Rh.japonieum штаммов 646.614а и 12, недостаточный.

11ель изобретения - повьппение выхода биомассы клубеньковых бактерий, например Rh.

japonicum штаммов 646, 614а и 12. .1т лостигается тем, что в известную питательную среду — бобовый агар — дополнительно вносят препарат N,N-дипропил-2,б-динитро-4-трифторметиланилнн (трефлан) при следующем соотношении компонентов, г/л:

Отвар фасоли белой (или гороха) 50-60

Сахар 10-11

Агар-агар 15-20

N, й- дипропил-2,6- дни итро-4- трифторметиланилин

Вода

Пример . Проводят выращивание клубеньковых бактерий Rh. japonicum, напримез. штаммов 646, 614а и 12 на предлагаемой питательной среде с добавлением трефлана и на известной питательной среде без трефлана.

В состав известной питательной среды - бобовый агар, содержащей 50 r фасоли, 10 г сахара, 15 г arapa-агара и 1000 мл воды, ввсдят дополнительно препарат трефлан в количестве

0,001 001 0>l и 1 г действующего вешества на 1 л рН питательных сред 6,8 — 7.

Питательные среды разливают в пробирки по 10 мл и стерилизуют в автоклаве прн 1 атмосфере в течение 30 мин.

Развитие Rhizobium japonicum в чистой культуре

Бобовый агар (контроль) 100

1187

2770

1817

Бобовый агар + 0001 г трефлана на 1 л среды

1968

116,7

112,7 1385

108 3 3124

Бобовый агар + 001 г трефлана на 1 л среды

111,0 1321

103,7 3076

1885

Бобовый агар + 01 г трефлана на I л среды

98,7

100,3 1171

100,4 2778

1825

+ l г л среды

Бобовый агар трефлана на 1

27,5

326

0

0.001-1,0

Oct ачь ное

ЦНИИПИ Заказ 5674/26

Подписное

Тираж 526

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 681 1 19

Проводят посев чистой культуры Rh.japonicum штаммов 646, 614а и 12, а также проверку на качество бактериального удобрения ризоторфина (нитрагин), приготовленного на основе производственного штамма 646

Посев проводят глубинным способом, для чего 1 мп суспензии бактерий чистой культуры

1О разведения или суспензии бактериального препарата вносят в чашки Петри, заливают теплой средой из пробирок, осторожно при этом

Кроме того, колонии бактерий, выросших на З5 предлагаемой питательной среде, крупнее, с более четким габитусом, что значительно обле чает их учет.

Таким образом. введение в питательную среду препарата трефлана в количестве от 0,001 до

0,1 r. действующего вещества íà l л среды создает благоприятные условия для роста маложизненных клеток, требующих для своего развития дополнительных факторов роста, а концентрация 1 г среды является токсической для иссле- 4 дуемых бактерий.

Выращивание Rh. japonicum штамма 646 на предлагаемой среде позволяет обьективно оценить титр бактериального препарата ризоторфина и судить о его качестве. 50

Формула изобретения

Питательная среда лля выращивания клубеньковых бактерий, содержащая отвар из бобовых

4 покачивач до застывания сре;ц». Лчя проращивания культуры чашки помещают в термосгат прн t = 27-30 C .

На питательной среде. содержащей компонент трефлан, значительно активизируется рост бактериальных клеток Rh. japonicum»txavMoa 646, 614а и 12. Присутствие трефлана способствует увеличению численности клубеньковых бактерий от 3 до 16,7% по сравнению с контролем (см. таблицу) растений, агар-агар, сахар и воду, о т л и ч а ющ а я с я тем, что с целью повышения выхода биомассы бактерий, она содержит N,N-дипропил-2,б-динитро-4-трифторметиланилнн при следую. щем соотношении компонентов, г/л:

Отвар фасоли белой (или гороха) 50-60

Сахар 10- 11

Агар-агар I 5-20

N,N-дипропил-2,6-ди нитро-4-трифторметиланилин

Вода

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Руководство по .практическим занятиям по микробиологии. Ч, МГУ, 1974.

2. Инструкция по определейию качества бактериальных удобрений М., 1967. с.! I (прототип)