Способ контроля ростовых свойств питательных сред для диагностики холеры

Способ контроля ростовых свойств питательных сред для диагностики холеры

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социапистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 270778 (21) 2649889/28-13 (53) М. Кл. с присоединением заявки М (23) Приоритет—

С 12 К 1/00

Государственный комитет.СССР яо дедам изобретений н открытий

Опубликовано 301180. Бюллетень М 44

Дата опубликования описания 301180 (53) УДК 578.8.093. .1(088.8) (72) Авторы изобретения

В.Н.Милютин, Л.Г.Воронежская, Л.С.Подосинникова, Г.В.Гальцева и Т.А.Ханумьян

Ростовский-на-Дону государственный научно-исследовательский противочумный институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОНТРОЛЯ РОСТОВЫХ СВОЙСТВ ПИТАТЕЛЬНЫХ

СРЕД ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии.

Известен способ контроля ростовых свойств питательных сред для диагностики холеры путем посева тест- 5 культуры на питательную среду с последующим инкубированием и подсчетом выросших колоний 11 .

Однако известный способ является довольно сложным.

Целью изобретения является упрощение способа.

Эта пель достигается тем, что в качестве тест-культуры используют штамм V i br i o Nag P-9741. 15

Штамм Vibriî Nag Р-9741 выделен

B 1972 г1из притока Дона. Штамм . Vibrio Nag P-9741 хранится в музее живых культур Всесоюзного ордена

Трудового Красного Знамени научно- 20

Исследовательского института "Микроб" и характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиологобиохимическими свойствами.

Культурально-морфологические приз 25 наки.

Прямые и изогнутые палочки, размером 1,5-2,0х0,3-0,4 мкм, подвижные с одним жгутиком. Спор и капсул не образует. 1,5-2%-ный щелочный агар 30

Мартена и дрожжевые среды. Колонии округлые, нежные, полупрозрачные в проходящем и слегка голубоватые в отраженном свете. 1%-ная пептонная вода и бульон. Образует гомогенное помутнение и голубоватую пленку.

Физиолого-биохимические свойства.

Оптимум роста при 37 С.Обладает индофенолоксидазной активностью. Расщепляет глюкозу, сахарозу, манноэу, маннит, фруктозу, мальтозу, крахмал.

Не ферментирует арабинозу, лактозу, инозит, сорбит. Образует индол.

Сероводород не образует. Декарбоксилирует лизин и орнитин. Не дигидролиэирует аргинин. Обладает протеолитической, диастатической, каталазной, лецитинаэной активностью.

Серологические свойства.

Не агглютинирует в растворе трипафлавина. Не агглютинируется холерными сыворотками "0", Инаба, Огава, R0. Не адсорбирует специфические антитела иэ холерных сывороток, не светится при обработке холерными люминесцирующими антителами, нечувствителен к холерным диагностическим фагам, при внутрикишечном заражении кроликов-сосунков дозами П.10 не

7 обладает патогенным действием.

689313

Формула изобретения

Составитель Е.Дубовицкая

Редактор С. Хейфиц Техред A ..Щепанская Корректор М. Демчик

Заказ 9219/72 Тираж 522 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР па делам изобретений и открытий

113035, Москва, К-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Для испытания качества питательных сред используют

5- часовые агаровые культуры тестМикробов Ч!Ьг!о Nag P-9741 и V.СЬо1егае P-1/145 18-20 часовых агаровых культур 2-5 пассажа.Готовят взвеси вибрионов в физиологическом раст воре, содержащие по 2 млрд клеток в 1 ьк. Приготовленные взвеси разводят физиологическим раствором в

Ы

2 раза, а затем делают ряд последовательных десятикратных разведений с таким расчетом, чтобы в 1.мл содержалось 1000 м.т. Из приготовленной взвеси производят высев по 0,1 мл на 3 чашки с испытуемой агаровой средой. Для контроля посевной дозы параллельно делают высев на 3 агаровые пластинки заранее проверенного качественного щелочнОго агара 20 (рН 7,6-7,8). Посевной материал равномерно распределяют по поверхности агаровой пластинки путем покачивания чашки Петри. Посевы выращивают при

37 С в течение 12 ч.

Плотные питательные среды считают годными в том случае, если на пластинках агара через 12 ч вырастает не менее 30% колоний от общего по.севного числа в типичной форме размером не менее 1 мм.

Пример 2. Для испытания качества жидких питательных сред из рабочих вэвесей тест-штаммов, приготовленных способом, описанным в примере 1, производят высевы в объеме

0,1 мл (100 м.т.) в 3 флакона со

100 мл испытуемой 1Ъ пептонной водой и 3 флакона с заранее проверенной высококачественной 1% пептонной водой.

Для контроля посевной дозы необходимо сделать высев посевной культуры на три агаровые пластинки. Посевы инкубируют при 37 С в течение 6 ч, после чего из каждого флакона с поверхности высевают петлей на чашку Петри с проверенным высококачественным агаром. Выращивают при 37 С 12-18 ч.

Пептонную воду считают пригодной в том случае, если в результате б-часового выращивания в ней и последующего высева петлей на агаровых пластинках вырастает в среднем не менее 10 колоний вибрионов.

Использование изобретения позволит сократить сроки контроля качества питательных сред для диагностики холеры.

Способ контроля ростовых свойств питательных сред для диагностики холеры путем посева тест-культуры на питательную среду с последующим инкубированием и подсчетом выросших колоний, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве тест-культуры используют штамм V i Ь r i o Nag P-9741.

Источники информации, принятые во внимание при экпертизе

1. Инструкция по контролю ростовых свойств питательных сред для диагностики холеры. Саратов, 1975 °