Способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Союз Советских
Соцреалистических
Республик >69ОО7О (61) Дополнительное к авт. санд-ву (22) Завалено 01.1277 (21) 2552895/28-13 с присоединением заявки Нов (23) Г1риоритет—
С 12 К 1/00
Государственный комитет
СССР по делам изобретений н открытий
Опубликовано 05.1 0.79. бюллетень ЙЯ 37
Дата опубликования описания 08.10,79 (53) УДК 57o...8. 093 ° .1 (088.8) (72) Авторы
ИЭОбрФТЮНИЯ О.В. Бухарин, Е.И, Бритвина, Е.П. Володина и Я.И. Коц (73) ЗаяВИтЕЛЬ Оренбургский государственный медицинский институт (54 ) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
ГОРМОНОВ ЗАДНЕИ ДОЛИ ГИПОФИЗА
Изобретение относится к области медицины, а именно к лекарственным препаратам.
Известен способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза с использованием экспериментальных животных (11 . Однако известный способ является сложным (большое количество операций) и не обеспечивает высокой точности результатов, так как они зависят в значительной мере от индивидуальной чувствительности организма подопытных животных.
Цель изобретения — упрощение спо- 15 соба. . Эта цель достигается тем, что исследуемый гормон смешивают с тесткультурой BaciIIus suhtiIis, смесь выдерживают при температуре 35-40 С 20 в течение 5-15 мин, затем высевают на питательную среду и по величине антимикробной активности определяют биологическую активность гормона.
Пример . Проводят лабораторные испытания предлагаемого способа стандартизации гормонов задней доли гипофиэа. Ставят четыре опыта, в каждом из которых к 1 мл окситоцина (5 ед. стандартного образца) добавляют по 1 мп суспензии бактериальной тест-культуры сенной палочки (BaciIIus subtiIis), выращенной на питательной-среде — мясо-пептонном агаре (рН вЂ” 7,2) и оттитрованной по оптическому стандарту мутности. Смеси помещают в термостат и выдерживают при температуре 37 С в течение 1, 5, 10 и 15 мин. После этого осуществляют мерный высев смесей на чашки с питательной средой — мясо-пептонным агаром. Оценку биологической активности гормонов производят по их антимикробному эффекту следующим образом: через
24 ч экспозиции чашек в термостате при 37 С визуально определяют наличие проросших колоний тест-культурысенной палочки.
Результаты опытов приведены в таблице.
690070
Сплошной рост
2000-1900 0 колоний
Сплошной рост
10-5 колоний
700-6 00 колоний
То же
10
3-0 колоний
Разреженный рост
Формула изобретения
Составитель С. Малютина
Редактор Л. Ушакова Техред Н.Бабурка Корректор М. Селехман
Тираж 526 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Заказ 5912/24
Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул.,Проектная, 4
Как видно из таблицы, для окситоцина микробная нагрузка составляет
10 микробных единиц., При этом при контакте бактериальной тест-культуры с окситоцином в течение 1 мин наблюдается сплошной рост колоний, 5 мин— насчитывают 600-700 колоний, 10 мин—
0-3 колоний, 15 мин — отсутствие колоний. Таким образом, оптимальное время контакта для этой микробной нагрузки (10 клеток) 10-15 мин. Для микробной нагрузки 10 клеток анти8 микробный эффект окситоцина выявляет- ЗО ся через 5-10 мин контакта культуры с гормоном.
Аналогичным способом определяют ак живность других. гормонов задней доли гипофиэа — вазопрессина и пи- . 35 туитрина. Микробная нагрузка для них составляет 10 -10 микробных единиц.
Использование предлагаемого способа опрЕделения биологической ак- . тивности гормонов задней доли гипо- 40 физа позволяет повысить точность стандартизации за счет использования тест-культуры, выращенной из одной бактериальной клотки, что дает возможность исключить. разброс данных 45 иэ-за различной чувствительности организма подопытных животных к гормонам. Определение биологической активности гормонов задней доли гипофиэа по предлагаемому способу по сравнению с известным проще, так как способ имеет меньшее количество операций и позволяет исключить использование подопытных лабораторных животных.
Способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза, отличающийся тем, что, с целью упрсщения способа, исследуемый гормон смешивают с тесткультурой BaciIIus subtiIis смесь выдерживают при температуре 35-40 С в течение 5-15 мин, затем высевают на питательную среду и по величине антимикробной активности определяют биологическую активность гормона.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Авторское свидетельство СССР
Р 331795, кл. A 61 К 17/06, 1974.