Способ получения пептидов или их уксуснокислых солей

Способ получения пептидов или их уксуснокислых солей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Сеоэ Советсмих

Социалистических

Республик

К ПАТЕНТУ (61) Дополнительный к патенту— (22) Заявлено 29;1277 (21) 2560052/.23-04

2 (5» М. л.

С 07 С 103/52//

A 61 К 37/02 (23) Приоритет — (32) 30 12. 76

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (33) 8HP (31) R 1-608

Опубликовано 051079. Бюллетень № 37 (53) У@К 547-964 ° 4 °.. 07 (088. 8) Дата опубликования .описания 10.10. 79

Иностранцы

Лайош Кишфалуди, Иштван Шен, Винце Варро, Ласло Варга и Йожеф Нафради (ВНР) (72) Авторы изобретения

Иностранное предприятие Рихтер Гедеон Ведьесети Дьяр РТ (ВНР) (71) Заявитель (54 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕПТИДОВ ИЛИ ИХ

УКСУСНОКИСЛЫХ СОЛЕЙ

Л-Т -В-A „фен -NH, ри

Н вЂ” Трп-В-Асп-Фен NHY, 1

Изобретение относится к .способу получения новых пептидов, обладающих биологической активностью, которые могут найти применение в медицине.

В синтезе пептидов при конденсации пептидных фрагментов широко используют метод активированных эфиров (1) .

Цель изобретения — получение новых пептидов, обладающих интересными фармакологическими свойствами.

Поставленная цель достигается способом получения пептйдов общей формулы где. A — Н-О-Гли, ВОС-О-Гли, BOC D-O-Ала, ВОС-L-О Ала, ВОС-1Ъ-О-Ала;

 — метионил, лейцил, норлейцил, норвалил, 2-аминодеканоил;

Y — водород или О-Гли-ОН, или их уксуснокислых солей, заключающимся в том, что тетрапептиды общей форму ты где В и Y имвыт указанные выше значе2 ния, подвергают взаимодействию с соединениями общей формулы

5 где A — - как указано выше;

x — пентафтор- или пентахлорфеноксигруппа, с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде уксуснокислой соли.

Исходные тетрапептиды получают известным образом путем конденсации фрагментов, путем постепенного удлинения цепи с помощью способов, использующих азидЫ, смешанйые ангидриды, дициклогексилкарбодиимид .(ЩГКД) и сложные активные эфиры, или с помощью прочих известных способов активации.

Не участвующие в реакции функциональные группы в случае необходимости защищают, в особенности группы, удаляемые путем гидролиза, ацидолиэа или каталитического гидрирования.

Карбоксильную группу можно, наПример, защитить путем зтерификаций с бенэиловым спиртом, трет-бутанолом или и-хлорбензиловым спиртом. Для защиты аминоокси- и аминогрупп могут применяться следующие группы формил, то80 эил, тритил (трифенилметил), трифтор691082

4 (8:2), (312) ацетил, о-,нитросульфенил, фталил, ределения температуры плавления по

O-хлоркарбобензокси,предпочтительно Tottoli (Buchi) . Ирн ТСХ используют карбобензокси и трет-.бутилоксикарбо- пластины из силикагеля и злюируют нил. Атом азота в индольном .скелете смесью растворителей . триптофана защищают при необходимос« . 51-хлороформ-метанол (95: 5), ти формильной группой. g N2-хлороформ-метанол (9: 1), Благодаря соответствующей комбина- N3-хлороформ=н-гексанции защитных групп Можно достичь ce-,—.Óêñóñíàÿ кислота (8: 1: 1), лективнаго или одновременного их уда- N4-этилацетат- (пиридинлейия с использованием известных Me- . . -уксусная кислста-вода, тодов, например гидролиэа, ацидоли за,:Щ 20: 6: 1) . (9.: 1) ° каталитйческого гидрировани я. .:: .: И5-этилацетат- (пиридинЧаще всего для введения защищенной .. -уксусная кислота-вода, (аминоокси)-ацильной группы на амино-, . 20:6:1) кбнце используют метод пентагалоидфе-, . ..N6-этилацетат"(пиридинниловых эфиров активный сложный. эфир 15 -уксусная кислота-вода, вводят во взаимодействие с- тетрапеп- - 20:6- U.. .: :. . . (7:3), тйдамидом H òðn-В-Ac@-NH-У, им«акающим N7-этилацетат-(пиридинконцевую карбоксильную группу.-:::.. . : -Уксусная. кислота-вода, Для получения исходных тетрапеп- .. . 20:6:1) тидов, "в-которых Y " - вь (ород,"исходят, : ; N8-этилацетат-.(пиридин"из соединения .общей формулы Е. -. Фен-оН -уксусная кислота-вода, (Š— защитная группа), из которого " . 20:6:1) " . . (1- 1) получают известным образом соЕдинЕние . N9-этилацетат-(йиридинобщей формулы Е -Фен-ЫН, :и после уда- :. "Уксусная кислота-вода, ления защитной группы:цосгепенно с по- 20«6:1).: : - . (2:3)или мощью защищенных И-оксисукцинимидных 25 .. М1О-этилацетат-(пиридин(О-сук) и пентагалойдфениловцх эфиров . --Уксусная кйслота-вода,. амйиокислот достраивают:до тетрапептид- 20.:6. -1) ;:::: .. " .(85:5). аМида H-Трп-В-Асп-Фен-:ЯН .- . : Зля проявления беРут раствор нин-.

Для получения исходных тетрапЕтид- гиДрнна.Пластины после нанесения на них амидов, в которых Y — О+СН -СООН, ис- 30 вещества. высушивают 5 мин при 105 «:, ходят из Н-Фен-О-Гли-ОН, получаемого ... помещают в атмосферу газообразного йутем ацилирования (амийоокси)-уксус- . хлора и после аэрирования обрабатывают ной кислоты с йомощью смешанного ан- смесью о-толуидин-KJ. гкдрида или сложного эфира оощей фор-. : . Для колоночной хроматографии примулы е — Фен-ОЯ, и из полученного про 3$ меняют силикагель с (размер частиц дукта удаляют защитную группу о«эработ- 62-20 ммк) . кой бромйстым водородом в уксусйой кислоте..: .. :: . . Пример .1. 1«- (БенэилоксикарI исходных вОО-ееп-ин и нОс- Фен- бонил) -1-.феиипаланинамид, -o-Гли--ОЙ ВОс — защитную группу уда- 40 к раствору 12,0 г (40 ммоль) е— ляют мягкой кислотной обработкой про- -Фен-ОН в 80 ил безводного тетрагиддукта.: . " . Рофурана (ТГФ) добавляют 5,60 мя

Защитную (-карбоксильную группу : (40 смоль) триэтиламюна,охлаждают аспарагиновой кислоты в дипептиде, до -10 С и при этой температуре дотрипептиде или тетрапептиде удаляют бавляют 3,80"мя (40 ммоль) этилового селективно или вместе с защищающей .эфира хлоругольной кислотй перемеаминогруппу группой путем"ацидолиза, . щйвают 10 мин при -10 C и при -10 С в случае, когда х-ОЯ, путем катали- . в теченйе 1 ч пропускают газообразтического гидрогенолиэа, ., ный аммиак. Bh «."ледукщий день смесь при использовании метода пентагало- упаривают в вакууме досуха и кристалидфейиловых эфиров обычно применяют Лический остаток растирают с 40 мл пентахлорФеноп (НО-ПХф) и пентаФтор-, водя при 40-50 С..Сырой продукт .

:«ренол (но-НФФ) . -: - (8,84 г) пере«крйсталлизовывают из целевые продукты очищают nyTeM „, 7-KpaTHoro количества этанола. полукристаллизации осаждения, колоночной: чают 6, 55 r 55%) Е-Ф н-NH>, т. пл.. хроматрграйии на силикагеле или ионооб- -1. 165-.166 С, В 0,75; менной хроматогра«рии с помощью карбь- L -Фенилаланин-амид-гидробромид ксиметилцеллюлозы.. К раСтвору 6,55 r (22 ммоль) ЕПатентуемые соединенйя получают в -Фен-NH< в 13 мл уксусной кислоты довиде свободных кислот или солей. бавляют 30 мл 5 н.раствора бромистого

Соли с органическими или неоргани. 9) водорода в уксусной кислоте, переме ческимй кислотамй известными метода- шивают 5 мин, оставляют на 1 ч, разми или при очистке могут быть превра- бавляют безводным эфиром н фильтруют. щены во внутренние соли. . Сырой нродукт растворяют в 240 мл температуру плавления :соединений этанола, осветляют и осаждают 740 мл бпределяют с помощью Прибора для оп- Я эфира. ПолуЧают 4,90 r (91В) белого, 691082 кристаллического, хроматографически однородного Н-Фен-NH HBr, т. пл. 249250 С, Н 0,50, В гйдробромида 0,35.

N-(Бейзилоксикарбонил)-L-аспарагил— p (трет-бутиловый эфир)-Б-фенилаланин- амид 5

К суспензии 9,45 г (38,5 ммоль)

H-Фен-NH HBr в 100 мл безводного

ТГФ добавляют 5,40 мл (38,5 ммоль) триэтиламина, прибавляют l б, 2 г (38, 5 ммоль) Z-Асп- (O-трет-бутил) -О-Сук. Через сутки смесь упаривают..

Остаток. растворяют в 500 ил этилацетата и трижды встряхивают с 10%-ным раствором лимонной кислоты и трижды с 5Ъ-ным раствором бикарбоната натрия. Затем раствор осветляют при нагревании с активированным углем и су- шат над сульфатом натрия.

Фильтруют, концентрируют в вакууме, остаток растворяют в 200 мп этилацетата и после кристаллизации полу- чают 15,17 г (84%) хроматографйчески однородного 2-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-NH» т. пл. 160161 С, R 070 °

L-Аспарагил-В-(трет-бутиловый сложный .эфир)-Х- фенилаланин-амид 25

15,17 г (32,3 ммоль) Е-Асп-(О-трет-бутил).-Фен-НН растворяют.в 1,0 л метанола и в присутствии 2,0 г палладия на активированном угле восстанавливают при перемешивании, пРопуская 30 водород. Спустя 2 ч фильтруют, фильтрат упаривают в вакууме. Твердый .остаток растирают с диизопропиловым эфиром, оставляют на ночь .на холоду и фильтруют. Получают 10, 40 г 35 (95,8%) Н-Асп-(О-трет-бутил).-Фен-ИНд, т. пл. при 121,0-.121,5; Rf 0,35

N-(трет-бутилоксикарбонил)-Ь-метионил-L-аспарагил- р †(трет-бутиловый сложный эфир)-1 -фенилаланин-амид-. . 40

10,4 г (31 ммоль). H-Асп-(O-трет-бутил)-Фен-NH и 11,1 r (32 ммоль)

BOC-Мет-О-Сук растворяют в 100 мп хлороформа, на следующий день трижды промывают водой при встряхивании. Органическую фазу отделяют, высушивают и упаривают в вакууме. Гелеобразный остаток растирают с эфиром, оставляют на холоду и фильтруют..

Получают 14, 5 г (82, 7%) сырого про; дукта, т. пл. 148-149 С, который раст воряют в 40 мп метанола, осветляют активиров@нным углем, осаждают 40 мл эфира и получают 12,80 г (73%) ВОС-Мет-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-ИН т. пл. l51-152 С; й+ 0,65. 55

L-Метионил-L-àñïàpàãèë-Х-фенилаланин-амид-гидрохлорид.

Раствор 12,50 r (22,1 ммоль) ВОС-Мет-Асц-(О-трет-бутил)-Фен-NH в

25 мл уксусной кислоты охлаждают и Q) смешивают с 30 мп, 7,4 н.солянокисло- . го этилацетата. Через 5 мин смесь мутнеет и выделяется масло.

Через 10 мин после выделения мас.ла разбавляют эфиром и фильтруют.

Осадок (10,24 г) раствоРяют в 40 мп метанола, добавляют 200 мп этилацетата, гелеобразный продукт оставляют на холоду на ночь, отфильтровывают„ и. получают 9,0 г (91%) Н-Иет-.Acg-фен-NH g HCI, т. пл. 187-189 С; Н О,:27 °

N-(трет-Бутилоксикарбонил)-L-триатофил-L-метионил-L- àñïарагил=L-фенИЛ-. алании-амид.

К суспензии 9,0 r(20,, 1 ммоль)

H-Жет-Асп †Ф-ИН HCI и 8,42 г (21 ммоль) ВиС-Трп-О-Сук в 150 мл диметилформамида (ДМФА) добавляют

2,.83 мл (20,1 ммоль) триэтиламина, перемешивают в. течение ночи и выпи- . вают в смесь из 1,0 л ледяной воды и 3,75 мл уксусной кислоты. Суспензию оставляют стоять до полного таяния льда и фильтруют. Гелеобразный осадок тщательно промывают водой, затем эфиром.и получают 13, 3 r (95%) сырого продукта, т. пл.- 203-204 С, который дважды перекристаллизовывают из 30-кратного количества 80%-ного водного этанола при осветлении. Получают 9,67 г (69%) BUC-Трп-Иет-Асп-Фен — ИН, т. пл. 212-214 С (разл.)

В 0,45.

L-Триптофил-L-метионил-L-аспарагил-L-Фенилаланинамид-моногидрат

9,23 г (13,2 ыиоль) ВОС-Трп-Мет—

-Асп-Фен-НН при 0 С и перемешивании вносят в,смесь 32 мл трифторуксусной кислоты, 8 мл воды и 4 мп аййэола, в течение 2 ч пропускают азот, разбавляют 270 мл эфира, фильтруют, осадок промывают эфиром и высушивают s эксикатбре, растворяют в

60 мл метанола и осаждают трифторацетат 240 мл эфира. Трифторацетат растворяют в смеси 340 мл воды и

29 мп 1 н.едкого .натра, добавляют

13,2 мл уксусной кислоты. Осадок отфильтровывают и промывают.

Получают б, 70 г (82,4%) Н-Трп--Иет-

-Асп-Фен-ИН Н О,т. пл; 235-238 Cj.

R 0,35.

Вычислено, В: С 56,6; Н 6,2;

N 13,7

Cz>.H> N+G

N 13,6

Пентахлорфениловый эфир трет-бутйлоксикарбониламиноокснуксусной кислоты

Раствор 8,0 г (41,8 ммоль) ВОС-О-Гли-vH и 11,1 г (42,0 ммоль)

НО-ЛХФ в 160 мл безводного диоксана охлаждают до 5 С и смешивают с

8,6 r (42.,0 ммоль) ДЦГКД, оставляют при комнатной. температуре- на ночь, дйциклогексилмочевину отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме и остаток перекристаллизовывают иэ смеси диоксанэтанол. Получают 19,7 г (74,3%) ВОС-О-Гли-ОЛАФ, т. пл. 167

168 Су Нз 0,7.

691082

8 Вычислено, %: С 35,52; Н 2,75 Вычислено, Ъ: С 37,07; Н 3,11; N 3,18у СХ 40,33, С.Е 39,08, С1з > СХ ИО (439,510) . C«e«CI ИОу

Наидено, %: С 36,37; Н 2,90; . найдено, Ъ: С 37,22; Н 3,07;

N 3,31 CI 40,12,. : . . CI 39,27. .(трет-Бутилоксикарбониламиноокси) 2-(трет-Бутилоксикарбониламиноок5

-ацетил" Ь-триптофил-Ь"мети онил-L-@g» си ) -L-пропи онил- L- три пт офил- L-мети:парагил-L-фенилаланйн«аьщд.:..: " онил-L-аспарагил-?-фенилаланин-амид.

1, 79 г (3, 0 ммоль) Н-Трп-.Мет-Асп- Смесь, содержащую О, 70 г

"Фен-ин H+o и 1,18 г (3,3 ммоля) (1,22 ммоль) rf-Tpn-Яет-Асп-Фен-ин х

ВОС-О-Гли-О-ПХФ в. 30 мл ДМФА выдер- щ х Н О и 0,59 r (1 30 ммоль) BOC-.L. живают 4 ч, упаривают в вакууме, ге- . сО-Ала-ОПХФ в 50 мл ДМФА и 0,35 мл леобразный остаток растирают- с этил- .(2„5 ммоль) триэтиламина оставляют цетатом. 2,11 r (91%) продукта, 1 . на ночь и затем упаривают в вакууме. т-,пл. 178-184 С, растворяют в 20 мл, Гелеобразный остаток смешивают с этил.метанола, осветлйвт, осаждают водой 1 ацетатом, отфильтровывают осадок и .получают 1,50 г (64,8%) кристалли- (0,69 г), смешивают с 15 мл этилацеЧЕСКОГО белого ВОС-0-Гли-Трп-Мет-. Асп- тата, нагревают до кипения и фильтру".Фен-NHg т. пл. 193-194 C; B". 0,40) ют. осадок {0,5 r) растворяют в не(с4р -16,2 (с 1,О, дмФА).. :. . . :значительном колйчестве смеси раствоВычислено, Ъ- С"56 ;1у "М 6 1; рителей Р 6, пропускают через колон8 4,16. -; . ну, заполненную 40 г силикагеля и

С ьН4,, N O« S (769,85).:. элюйруют смесью Растворителей М 5. найдено, Ъ: С 56,4; Н 6,3; Из чистйх фракций получают 0,30 г

S 4, 07." : — - " " хроматографически однородного BOC-L-"

П р и и е р 2, : †: " ", =.О-Ала-Трп-Мет -Асп-Фен-NH>, т ° пл. (Аминоокси)«ацетил-Ь-.триптофил-L- 25 199 С ; В 0,15; В 0,3.

-метионил-L-аспарагил-Ь-фенилаланин- Вычислено, %: С 56,69; Н 6,30;, -.амид.;:: .:::-:-:::... -;: .: N 12,21.

1,0 г (1,3 ммоль) ВОС-О-- Гли=Трп- СЭ7 84> N>O

-Мет-Асп--Фен NHq при перемешивании Найдено, %: С 56,50; H 6,29; вносят" в смесь 4. мл трифторуксусйой 30 . . N 12,34. ки сл оты, 1 мл воды и 0,5 мл анизола, Пример 4. пропускают азот в течение 2 ч, .Раз- N- (Бензилоксикарбонил)-1-лейцилбавляют 40 мл" эфира, осадок (1,02 г -I-аспарагил-ф-{трет-бутиловый сложтрифторацетата) растворяют в смеси ный эфир)-? -фенилаланинамид.

34 мл воды и 2,9 мл 1 н.едкого натра, 35 5,0 г (14,9 ммоль) Н-Асп-(О-третсвободный амид осажцают, добавляя -бутил)-Фен-NH» смешивают с 5,5 r

1,.32 мй" уксусной, кислоты. Осадок от- (15,2 ммоль) Е-Лей-О"с ук в 50 мл хлофильтровывают, тщательно промывают . Роформа. Раствор постепенно превраша- " водой и высушивают в эксикаторе. По- . ется в гель. Гель разбавляют хлорофорлучают 0,6 г (69В) Н-О-Гли-Тьйп-Мет- g0 мом и перемешивают в течение ночи.

-Асп-Фен- ИН, т. пл. 183-184 С УпариваЮт в вакууме, остаток растиран 0.5й (с )> -31,6 (с = 1, О," ДИФА). ют с водой и отфильтровывают. сырой

Вычислено, Ъз C 55,59; Í 5,87; продукт (8,6 г, т. пл. 170 C) ïåðåЯ 14,60> S 4,79 кристаллйзовыйают из .45 мл этанола, Ñ -„Í oN O S (669,763). ПолУчают 7,26 г (83,5%) Z-Лей-Аспнайдено, Ъ: C 55,41; Н 5,93; 45 ;(-о- -трет-бутил)-Фен-йй, т.пл. 180N 14,41 Б 4,71. 181 С, Ну 0,61 (gjy = -36,8 (с = 1,0, пентахлорфениловый эфир. 2-(трет этанол).

-бутилоксикарбоииламиноокси)-(-про- . ВыЧйслено, Ъ: С 63,90; Н 7,27; йионовой кислоты..-: .;: .: . И 9, 62

С 04 N407 (582, 68)

РаствЬр 4,10 r (20 ммоль) BOC- 0-О- .. Найдено, % . С 63,70; Н 7,41;

-Ала-ОН и 5,32 г (20 ммоль) НО-Пхф в : N 9,73. .20 мл ЦМФА охлаждают до 0 С, смешива- ХЛейцил-Ь-аспарагил-р-(трет-бутиют с 4,12 r (20 ммоль) ДЦГКД, переме- . I)os слофный эФир) "L-фенилаланиншивают "30 мин при 0 С и вмцерживают 55 в течейке ночи. при комнатной теьжера« . 6,76 г (11,6. ммоль) z-лей Acn-(отуре. дицйклогексилмочевину отфи тьт» -трет-бутил)-Фен-ИНд растворяют в ровывают, фильтрат упаривают в ваку- ЗОО мл Метанола И восстанавливают воуме, остаток обрабатывают безводным докладом при"перемешивании в присутст;эфиром, отфильтровывают осадок @) вии 1,0 г палладия на активированном (6,25 г), перекристаллизовывают ь угле. СпустИ 90 мин катализатор отэтанола и получают 5,80 г (63%) Филвтровывают, фильтрат упаривают, Вср-?Мз-Ала-бПХФ,, . пл. 122-124 С геНеобразнйй остаток выделяют с помой 0,85; fo{)< " «68,87 (с 1,0, ди- Жью н-гексана и получают 5,2 г (99,5Ъ) оксан). Н-Лей-Асп- (О-трет-бутил) -Фен-.щ»

69 1082 его з смеси растворителей М 5, вносят в колонну, заполненную 80 г силикагеля, и элюируют смесью растворителей 9 10. Из чистых фракций получают О, 58 г ВОС-О-Гли-Трп-Лей-Асп-Фен"NH «т. пл. 187 С (разл. ); Rg 0,7 )

R < 0,15; (с()1, = -24,9 (с = 0 5, ДМФА) .

Вычислено, %: С 59,11; Н 6,57;

N 13,04.

C3q Н49 Ф3 О,о (75 1, 85)

Найдено, Ъ: С 59,28; H 6,40;

N 12, 75.

Пример 5.

Ь-Лейцил-L-аспарагил-L-фенилаланин-амид-гидрохлорид.

6,91 г (15,4 ммоль) Н-Лей-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-МН вносят в 50 мл солянокислой уксусной кислоты. Спустя

45 мин разбавляют безводным эфиром, оставляют стоять на холоду непродолжительное время И фильтруют. Осадок тщательно промывают безводным эфиром.

Получают 6,20 г (94%) Н-Лей-Асп-Фен-NHg . HCI В1 О, 2, который используют без дальнейшей очистки.

N-(трет-Бутилоксикарбонил)-Ь-триптофил — L-лейцил-Ь-аспарагил-L-фенилалан и н- амид.

6,2 г (14,5 ммоль) Я-Лей-Асп-Фен-NH HCI и 6,42 г (16,0 ммоль) ВОС-Трп-О-Сук в 70 мл ДИФА в присутствии

2,24 мл (16,0 ммоль) триэтиламина выдерживают 4 ч, выпаривают в вакууме, остаток растирают с водой и отфильтровывают. 10,6 г сырого продукта дважды кипятят со смесью метанол-этилацета т и отфильтровывают . Получают

7, 1 г (72, 1% ) ВОС-Трп-Лей — Асп-Фен-ИН,т. пл. 218-221 С (разл. ); Ry 0,4, и используют без дальнейшей очистки.

Ь-Триптофил-Ь-лейцил-Ь-аспарагил-L-фенилаланин-амид.

7,1 г (10,5 ммоль) BOC-Трп-Лей-Асп @ed-NH вносят в 60 мл солянокислого диоксана. Спустя 3 мин смесь становится прозрачной. Спустя еще

10 мин раствор разбавляют безводным эфиром, выделяющийся маслянистый продукт отверждают и отфильтровывают.

Полученный. гидрохлорид (6,96 г) растворяют при нагревании в 150 мл воды.

При охлаждении добавляют твердый би-карбонат натрия до рН 7, фильтруют и осадок промывают тщательно водой. Получают 5,05 г (83,1%) хроматографически однородного Н-Трп-Лей-Асп-Фен-NH« T. . 228-230 C (pa3a).

Пентахлорфениловый эфир 2-(трет-бутилоксикарбониламиноокси)-D-пропиЬновой кислоты.

К охлажденному до 0 С раствору

4,10 г (20 ммоль) BOC-D-О-Ала-ОН и

5, 32 г (20 ммоль) Но-Пхф в 20 мл ДМФА добавляют 4, 12 г (20 ммоль) ДЦГКД, перемешивают 30 мин при 0 С и оставляют на ночь при комнатной температуре. ДицикЛогексилмочевину отфильтроРаствор 1,0 r (1,82 ммоль) Н-Трп-Лей-Асп-Фен-NH и 0,88 г (2,0 ммоль)

ВоС-О-Гли-ОПХФ в 10 мл дМФА смешивают с 0,27 мл (1,82 ммоль) триэтиламина, оставляют на ночь, упаривают в вакууме, остаток растирают с эфиром, суспензию оставляют на холоду и фильт-Я) руют. Получают 1,42 r сырого продукта, т. пл. 102-120 С (разл.), к которому добавляют 10-кратное количество этилацетата, кипятят и фильтруют горячим.

Получают 1,06 г вещества, растворяют 65

R< 0,1, который используют без дальнейшей очистки.

N-(трет-бутилоксикарбонил)-Ь-триптофил-L-лейцил-L-аспарагил-Р-(трет-бутиловый сложный эфир)-L-фенилаланин-амид. 5

Раствор 5,2 r (11,5 ммоль) И-Лей-Асгг-(O-трет-бутил)-Фен-NH< и 4,82 г (12,0 ммоль) ВОС-Трп-О ук в 100 мл

ДИФА оставляют на ночь, упаривают в вакууме, остаток растирают с водой, фильтруют, осадок (8,95 г) перекристаллизовывают из 70 мл 70%-ного этанола при осветлении и получают 7,19 r (84,5%) ВОС-Трп-Лей-Асп-(О-трет-бу-. тил)-Фен †N. т. пл. 176-177 С; R

0,65. После перекристаллизации из

10-кратного объема 80%-ного этанола т. пл. 180-182 С; (с(.)р = -35,3 (с=

=1,0, ДИФА).

Вычислено, Ъ: С 63,74: Н 7,41 20

И 11,44, Найдено, Ъ: С 63,62; Н 7,62;

N 11,17.

L-.T èïTîôèë-L-лейцил-L-аспарагил— L-фенилаланинамид. б, 59 г (9,0 ммоль) BOC — Трп — Лей25

-Асп- (О-трет-бутил) -Фен-NH вносят в смесь 60 мл трифторуксусной кислоты и б мл анизола, перемешивают 2 ч при комнатной температуре и разбавляют безводным эфиром. Полученный после фильтрования мазеподобный остаток вы- сушивают в эксикаторе над едким натром и пятиокисью фосфора, растирают с водой и выделяют 5,61 г трифторацетата, т. пл. 178-186 С (разл. ), который растворяют при нагревании в воде, содержащей немного этанола. При охлаждении поддерживают рН 7 с помощью

1 н.едкого натра. Осадок отфильтровывают, промывают водой и этанолом, 40

4, 0 г сырого продукта растворяют в

30 мл ДЫФА и осаждают 60 мл метанола.

Получают 2,28 г хроматографически однородного н-Трп-Лей-Асп-Фен-МНд, т. пл. 227-.230 С (разл.); В 0,55.

Вычислено, Ъ: С 62,26; Н 6,62;

N 14,52, Сэо Нзв1 ьОь (578, 67) .

Найдено, Ъ: С 62,02; Н 6,80;

N 14,38. 50

2-(трет-Бутилоксикарбониламиноокси)-ацетил-L-триптофил-L-лейцил-L-аспарагил-Ь-фенилаланин-амид.

691082

12 вывают, Фильтрат упаривают в вакууме, кристаллический остаток обрабатывают безводным эфиром, фильтруют, осадок (6,25 г) перекристаллизовывают из этанола. Получают 5,80 r (64%) BOCD-O-Ала..-0ПХФ, т. пл. 123-124 С; (И-)е = — +68,95О (с = 1,0, диоксан). R q 0,85 (А) р = +68,95 (с = 1,0, диоксан).

Вычислено, %: С 37,10; Н 3,10;

СХ 39,10.

С1 Н14 С15 НО5 (45 3 r 5 37),:

Найдено, %: С 37, 16; Н 3, 29;

CI 39,01.

2-D-(трет-Бутилоксикарбониламиноокси)-пропионил-Ь-лейцил-L-аспарагил"У -Фенилалани н-амид.

1, 74 г (3, О ммоль ) Н-Трп-Лей-Асн-Фен-NH вводят во взаимодействие с

1,50 г (3,3 ммоль) ВОС-0-О-Ала-ОПХФ в 20 мл ДМФА в присутствии 0,42 мл (3,0 ммоль) триэтиламина - :На-следующий день смесь упаривают в вакууме, остаток растирают с эфиром. Продукт растворяют в незначительном количестве смеси растворителей 9 5 и вносят колонйу, заполненную 100 г силикаеля. Элюируют смесью растворителей

М 5, выделенный из чистых фракций кристаллйческий остаток перекристаллизовывают из 50 мл 80%--ного зтанола.

Получают 1,07 r (46,7%) ВОС-D-O Ала-Трп-.Лей-Асп-Фен-ИНq, т, разл. 210 С; 0,15.„ ) 0,40; (,), = -6,0 {с

=1,0, ДМФА).

Вычислено, %: С 59,59; Н 6,71;

N 12,80, С е Нл NqOao (765 Найдено, %г С 59,37; Н б, 90у.

И 13,10.

Пример б.

2-N- (трет-Бутилоксикарбонил) - (L-Фенйлаланиламиноокси)-уксусная кислота.

6,97 r .(40,5 ммоль) гидробромида аминоуксусной:кислоты вводят во вза-. имодействие с 14,68 .г (40,5 ммоль)

ВОС-Фен-О-,Сук в 100 мл ДМФА в прйсутствии 6,3 мл (45 ммоль) триэтиламина.

На следующий день смесь выпаривают в вакууме, остающееся масло растворяют в 100 мл хлороформа и трижды встряхивают е 1 н.соляной кислотой. Oprаническую фазу высушивают и выпаривают в вакууме. Маслянистый остаток отверждают диизолропиловым эфиром,растворяют в этилацетате и осаждают дииэопропиловым эфиром. Получают 9,60 г (74%) ВОС-Фен-О-Гли-ОН, т. пл. 136137 С; В 0,4; (д.) = 17,8 (с " 1 0 этанол).

Вычислено, %: С 56,80) Н 6,55;

N 8,28.

С 1 Н N О6 (338, 36) °

Найдено, %: С 56,59; Н 6,41

N 8,42.

Смешанный N-(трет-бутиловый)-с{; †(N-оксисукцинимидный) эфир N-(трет

-бутилоксикарбонил) -L-аспарагиновой кислоты.

11,45 г (39,7 ммоль) маслянистого

ВОС-Асп-(О-трет-бутил)-OH и 4,6 г (40 ммоль) N-оксисукцинимида растворяют в 100 мл безводного диоксана, охлаждают и смешивают с 8,25 г

{40 ммоль) ДЦГКД, перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, дициклогексилмочевину отфильтровывают и фильтрат упаривают. К остатку добавляют смесь гексан-диизопропиловый эфир, осадок (13,8 г,т. пл. 98- °

102 С) отфильтровывают, перекристаллиэовывают из 3-кратного количества избпропанола и получают 12,1 r (78,3%) белых крйсталлов Вос Aсп-{О-трет-бутил) -u-Сук, т. пл. 103-105 С; . (с ) =

= -25, 6 (c = 1, О, диоксан) .

Вычислено, %: С 52,84; Н 6,78;>

С 7 Н ьИ Ов (386,39) . г айдено, %: С 52,97; Н 6,00;

N 7,21.

2-(L-Фенилаланиламиноокси)-уксус- .ная кислота-гидрохлорид.

25 к раствору 5,8 г (17,1 ммоль) ВОС.Фен-О-Гли-ОН в 10 мл этилацетата дЬбавляют 60 мп 4 н.солянокислого зтилацетата,. перемешивают 4 ч и растворитель сливают с маслообразного вещест30 ва, которое отверждают свежеперегнанным этилацетатом. Получают 4, 53 r (96,6%) Н--Фен-О-Гли-ОН HCI. Продукт гигроскопичен и хроматографически однороден. т пл 75-80 С ВЕ 0,2.

35 2- (N-трЕт-бутилоксикарбоНил) -L-аспарагил-ф- (трет-бутиловый сложный эфир)-(L-фенилаланиламиноокси)-уксусная кйслота. ".

К раствору 7,0 г (25,5 ммоль) Н40 Фен-O-Гли-Он HCI в 150.Мл ДМФА до. бавляют 7,15 мл (51. ммоль) триэтилаМича, вносят. 9, 30 r (2.4 мйоль) ВОС-Асп- (о-трет-бутил) -О-Сук. После полного растворения смесь оставляют на

45 ночь, затем упаривают в вакууме маслянистый остаток растворяют в хло. роформе," раствор встряхивают трижды с 1 н. соляной кислотой и водой, затем высувжвают и выпаривают в вакууме. Остаток отверждают диизопропило. вам" эфиром. 10,35 г сырого продукта дважды переоааждают из смеси эфир н-гексан. Получают 8,63 г (70,7%)

BUC-Асп-(О-трет-бутил)-Фен-0-Гли-ОН, т ° пл .. 83-85ОС (разл.); R 0,45;

53 (сЦ 0 = "30,6 . (с = 1,36, этанол). хроматограмаа показывает налич} е незначительного количества примесей..

2-(L-Аспарагил L-фенилаланиламиноокси)-уксусная кислота — гидрохлорид. щ 8, 50 г (1 6, 7 ммоль) BOC-Асп- (О-трет-бутил) -Фен-О;-Гли-OH при перемешивании растворяют в 70 мл (350 ммоль) 5 н.солянокислого этил. ацетата. Спустя 5 мин из раствора на65 чинает выделяться кристаллический

13

69108?

14 гидрохлорид. Через 75 мин суспен зию ют ?, 17 г (58, 8%) BOC-Трп-Мет Аспч о фильтруют, осадок промывают этилаце- -Фен-v-Гли-UH, R+ О, 3 () = — 19, 9 татом и получают 6, 22 г (95, 8%) крис- (с = О, 75, ДМФА), Продукт содержит таллического Н-Асп-Фен-О-Гли-ОН - HCI, небольшое количество примесей. т. пл. 160-163 С; Rf9 0,25. о

2- (Ь-Триптофил-L-метионил-L-acna2- (N- (трет-ьутилоксикарбонил) -Ь- 5 рагил-Ь-фенилаланиламиноокси) -уксус-метионил-L-аспарагил-L-фенилаланил- ная кислота. аминоокси)-уксусная кислота. 2,17 г (2,81 ммоль) ВОС-Трп-МетК раствору 6,1 r (15,6 ммоль) .H- -Acn-Фен-О-Гли-ОН при перемешивании

-Асп-Фен-О-Гли-оН . HCI в 50 мл ДМФА вносят в смесь 8 мл трифторуксусной добавляют 6,55 мл (46,8 ммоль) три- to кислоты, 2 мл воды и 1 мл анизола, этиламина, затем 6,38 г (15,6 ммоль) в течение 2 ч пропускают азот, разВоС-Мет-О-Сук. После полного раство- бавляют 60 мл эфира, продукт отфильрения смесь выдерживают в течение но- тровывают и "высушивают в эксикаторе. чи при комнатной температуре, упари- Получают 2,0 г трифторацетата, раст.вают в вакууме и маслянистый остаток 15 воряют их в 8 мл 2 н.едкого натра и отверждают диизрпропиловым эфиром. подкисляют 10%-ной соляной кислотой

Осадок (6,3 r, 69%) растворяют в не- до РН 4. Осадок отфильтровывают и значительном количестве смеси раство- промывают водой. Получают 1,34 г .Рителей Р 7 и вносят в колонну, запол- (71%) Н Трп-Мет-Асп-фен-О-Гли-ОН, ненную 110 г силикагеля. Элюируют-cMe- Rf 0,1. Продукт аморфный. Хроматограмсью растворителей Р 7 со скоростью 0 ма показывает,.что продукт слегка за8-10 мл/ч. Чистые фракции собирают и грязнен. упаривают в вакууме. Полученное мас-. 3 — Бромпропйоновая кислота. лянистое вещество отверждают диизо- К раствору 44,0 г (0,49 ммоль) pJпропиловым эфиром, продукт (4,4 r) . -аланина и 200 r (1,68 моль) бромирастворяют в 15 мл метанола и осажда- 25 да калия в 1,0 л 2,5 н.серной кислоют 10-кратным количеством .безводного ты при комнатной температуре, порцияэфира. получают 3, 26 г (35, 7%) аморф- ми добавляют 42, 4 r (О, 76 моль) ннного, хроматографйчески однородного трита натрия, перемешивают при комBUC-йет-Асп-Фен-О-Гли-ОН, Rg 0,30; .натной температуре в течение 2 ч и (сЧр = -37,2 (с = 1,0, этанол). 30 дважды встряхивают с 200 мл эфира.

Вычислейо, %.,г :С 51,36; Н 6,21 Эфирйый раствор промывают трижды воN 9,58; S 5,48. дой и после высушивания выпаривают в

C>+H>

2- (Ь-Метионил-L-аспарагил-L-фе- (24%) 3-бромпропионовой кислоты, нилаланиламиноокси) -уксусная кислота- т. пл. 59-60 с. гидрохлорид.. -: Дициклогексиламинная соль 3- {третО, 50 r (0,85 ммоль) ВОС-Мет-Асп- - -бутилоксикарбониламиноокси) -пропио-Фен-и-Гли-Оа обрабатывают в течение 40 новой кислоты.

1 ч 5 мл солянокислого .этилацетата, 7, 7 г (О, 30 r-атом) натрия раствоФильтруют, осадок тщательно промыва- Ряют в 450 мл эфира, добавляют 26,6 г, ют этилацетатом и высушивают в эксика- ° (pi 20.ìîëü) N- (трет-бутилоксикарботоре. Получают 0,41 г (91%) H-Мет-Acr йил) -гидроксиламина в 165 w этанола щренОГлиОН . HCI R 0 .(j5 R f p 2 . 4 - и 28 ° 7 г (О, 188 мОль) 3-бромпропионоПродукт аморфный, хроматограмма пока- вой кислоты в 165 мл этанола, перемезывает наличие незначйтельного коли- шиваЮт .при 50-55 С в течение двух чества. примесей. дней., упаривают в вакууме.и остаток

2«N- (трет-Вутилоксикарбонил) - 1 - РаствоРяют в 350 mi воды. Водный ðà-трипфтофил-L-метйонил-z-аспарагил- створ экстрагируют зтилацетатом (3 х (1,фенилалаииламиноокси)«уксусная . . х 100 ил)>подкисляют po pH 3 лимонной

50 л,а . кислотой, BacMeafbT хлоРиДом натриЯ и . экстрагируют этилацетатом (5 х 100 мл) .

K суспензии 3,0 r (4,79 мюль) Обырдиненные этилацетатйые фазы триH-Иет — АсП-Фен-О-Гли-ОН - HCI в 50 мл жды проьйвают водой, высушивают и выДМФА при перемешивании добавляют 55 паривают в вакууме. K маслянистому

14 мл (10 ммоль) триэтиламина и 2,35г остатку (27,25 r) в 100 мл н-гексана (5,0 ммоль) Вос-трп-ОпФФ, выдерживают порциями добавляют 23,3 мл (118 ммоль)

90 мин и упаривают в вакууме. - дициклогексиламина при постоянном охОстаток растворяют в этилацетате, лаждении, оставляют на холоду, осавстряхивают трижды с 1 н.соляной кис- 60 док отфильтровывают, промывают эфилотой, затем с водой. Органическую - ром. 44,93 г подучейного сырого профазу высушивают, осветляют и концент- дукта, т. пл. 128-135 С, Растворяют рируют в вакууме до объема 10 мл. До- в 50 мп метанола, осветляют и осаждабавляют безводный эфир, оставляют ют 200 мл эфира. Получают 25,0 г стоять на холоду и фильтруют. Получа- 65 (34%) соли ВОС-Р-О-Ала-OH - дициклогек15

)6

691082 силамин, т. пл. 148-149 C; R < О, 5 Пример 7.

R - О, 25. Из маточного раствора выде- 2- (2- (трет-Бутилоксикарбониламиноляют еще 9,3 r (12,8%) продукта, окси ) — ацетил- L-три птофил- L-метиони лт. пл. 144-145 С. -L-аспарагил-L-фенилаланиламиноокси)Вычислено, Ъг С 62,14; Н 9,9; -уксусная кислота.

N 7,25.

С о Hy8N (386,52) . К раст вору О, 34 r Н-Трп-Мет-Ас пНайдено, Ъ: С 61,99; Н 10,02; -Фен-0-Гли-ОН в 10 мл ДМФА добавляют

N 7,09. О, 1 4 мл (1 ммоль) триэтиламина и

Пентафторфениловый эфир 3- (трет- О, 28 г (0,.6 ммоль) BÎC-О-Гли-ОПХФ.

-бутилоксикарбониламиноокси) -пропио- )ð Спустя 3 ч упаривают в вакууме и основой кислоты, таток отверждают эфиром. 0,43 r сыро1, 10 г (2,85 ммоль) соли BOC-p-О- го продукта растворяют в небольшом ко-Ала-0н. дициклогексамин обрабатыва- личестве смеси растворителей Р 6 и ют 40 мл эфира и 3 мл 2 н.серной кис- вносят в колонну с 20 r силикагеля, лоты. Эфирную фазу отделяют, встря- <5 ?????????????? ???????????? ?????????????????????????? 9 6 ???? ???????????? ?????? ?????? ?? ???????????? ????????????????, ?????????????????? 10 ????>

ПФФ растворяют в 10 мл безводного ди- C @H<>N О„S (845,98) . оксана. При 5 С к ьаствору добавляют Найдейо, Ъ: C 53,95; Н 5,97;

О, 37 г (1,8 ммэль) ДЦГКД, перемйаива- . N 11,70. ют 90 мин при комнатной температуре, 25 Пример 8. дициклогексилмочевину бтфильтровывают, 2-(2-Р-(трет-Бутилоксикарбониламифильтрат упаривают в вакууме. Остаток ноокси) †:пропиьнил-L-.триптофил-L-метирастворяют в н-гексане, трижды встря-. онил-Ь-аспарагил-L-фенилаланиламинохивают раствор с 5Ъ-ным раствором би- окси)-уксусная кислота.

-карбоната натрия, высушивают и упа- 30 К раствору 0,23 г (0,60 ммоль) ривают в вакууме. Маслянистый оста- BOC- D.-O-Ала-ОПХФ и 0,34 r (0,50 ммоль! ток отверждают н-пентаном. Получают Н-Трп-Мет-Acr(Ôåí-0 — Гли-ОН в 10 мл

0,33 r (55%) BOC-О-Ала-ОПФФ, т. пл. ДМФА добавляют 0,14 мл (1,0 ммоль)

58-59 С; R> 0,65, триэтиламина. Спустя 3 ч упаривают

Вычислено, %: С 45,29; H 3,80; 35 в вакууме, остаток растирают с эфиN 3,77 ром и отфильтровывают. 0,41 г сырого

С Н Р5 НОб (371, 27) . продукта растворяют в небольшом колиНайдено, Ъ: С 45,43; Н 3,65; честве смеси растворителей Ф7,вносят

N 3,90. в колонну, заполненную 40 r силикаге2-(3-(трет-Бутилоксикарбониламино- 4р ля и элюируют смесью растворителей окси)-пропионил-L-триптофил-L-метио- 9 7 со скоростью 10 мл/ч. Чистые нил-L-аспарагил-.L-фенилаланиламино- фракции упаривают,в вакууме, остаток окси)-уксусная кислота. выделяют с помощью безводного эфира.

К раствору 0,32 г (0,.48 ммоль) Получают 0, ll r (25,6%) BOC-D-О-АлаН-Трп-Мет-Асп-Фен-О-Гли-ОН и О, 2 3 r -Tpn-Мет -Асп-фен-Î-Гли-ОН, R f 0 у 25 ° (0,.60 ммоль) ВОС-(3-О-Ала-ОПФФ в 10 мп Продукт аморфный, ДМФА добавляют О 14 мл (lфО ммоль) Вычислено, % С 54,60; Н 5 99; триэтиламина. Спустя 3,5 ч упаривают N 11,43. в вакууме, остаток отверждают эфиром. С,Ни Н,О„S (857,94) .

0,31 г сырого продукта растворяют в Найдено, %г С 54,41; Н 5 87; незначительном количестве смеси раст- N 11,32. ворителей 9 6 и вносят в колонну, за Пример 9. полненную 20 г силикагеля. Элюируют 2- (2-Ь- (трет-Бутилоксикарбониламисмесью растворителей Р 6 со скоростью ноойси)-пропионил-L-триптофил-Ь-мети5 мл/ч. Чистые фракции упаривают в онил-L-аспарагил-L-Фенилаланиламиновакууме. и остаток выделяют с помощью 55 окси)-уксусная кислота. безводного эфира, Получают 0,14 r Из BÎC-L-O-Ала-ОПХФ, как в приме(344) BOC-) -О--Ала-Трп-Мет-Асп-Фен-0- ре 8, получают 0 38 г сырого продукта, -ГЛИ-ОН, Вбу 0,1; R f О, 3. Продукт После хрматографирования вццеляют хроматографически однородный и аморф- 0,13 г однородного ВОС-L-0 Ала-Трпный. о -Мет-Асп-фен-0-Гли-OH, R y 0,25, Вычислено, В: С 54,0 Н 5,99; Вычислено, Ъг С 54 60; Н 5 99;

N ll,45 и 11,43.

C39Н54 N О,э S . (857,94) . С эН61 йт О э 8 (857, 94) .

Найдено, %: С 54, 40; Н 6, 10; Найдено, %: С 54,47; Н 6,04;

N 11 27 ° N 11у41.

17

691082

Пример 10 ° ВОС- Урп-О»Сук в присутствии 0,88 мп

Пентафторфениловый эфир N-трет-.бу- (6,3 ммоль) триэтиламина растворяют тилоксикарбонил-L-норлейцнна. s 40 мл ДМФА, перемешивают в течение

10,0 г (24,3 ммоль) соли ВОС-Нор- ночи и упаривают в вакууме, Маслянислей-ОН дициклогексиламин в смеси- тыЯ остаток отверждают водой, содер"

75 мл эфиРа И 25 мл 2 н.серной кисло 5 жаЦей небольшое количество уксусной ты встряхивают до полного растворения кислоты,:фильтруют при охлаждении и эфирную фазу встряхивают сначала с проммвают осадок водой, затем эФиром.

25 мл 2 .н. серной кислоты, затем с Получают 1,92 г (89,7%) ВОС- Г ПЯор водой,. упаривают в вакууме, маслооб- лей-.Асп-Фен-КН, т. разл. 196 С; разный остаток (5,44 r) и 4,42 r () R j 0,50; (() = -28,8 (c = 1,0, (24 ммоль) НО-ПФФ растворяют в 30 мл ДМФА), Продукт перерабатывают без этнлацетата, охлаждают до 0 С и сме - : дальнейшей очистки. шивают с 4,63 г (22,5 ммоль) ДЦГКД. L- Триптофил-1-норлейщил-L-аспараСуспензию оставляют на l ч на холоду гил-L-фенилаланин-амид-гидрохлорид. н ф ьтруйт Ф ьтрат упаривают в ва- 15 Раствор 1 85 г (2.73 ь) Воскууме, остаток растворяют в 50 мя <рп-Норлей-Асп-Фен NH< в 50 мл 8 н.. н-гексана и экстрагируют 5%-нищ раст- . солянокислого диоксана выдерживают вором бикарбоната натрия (5 х 20 мл), 1 ч и упаривай)т в вакууме,.гелеобраззатем водой (2 х 20 мп). органическую ный остаток после разбавления ацетофазу высушивают и упаривают в Вакууме. нси отфильтровывают и получают

Иаслообразный остаток при охлаждении 2О 1,17 г (69,7%) й-Трп-Корлей Асп-Фен-. застывает. Получают 8, 12 г {91%) ВОС- -КН - НСХ, т. Разя. 235 С; Щ ) ——

НоРлей-ОПФФ, т. пл. 55-57 С; Н 0.,80; = "28,4 (с = 1,0, ДИФА) .

0,85; (d) = -26,8 (с = 1,0, дй- 2-D- (трет-Бутнлоксикарбониламинооксан) . - окси) -пропионил-L- триптофил-L-норлейВычислено, %: С 51, 39; Н 5,07; . 25 цил-Ь-acпаpагил-L-фенилаланин-амид.

F 23,91. 1,0 г (1,62 ввйэль) Н-Трп-НорлейС17 НдоРзй04 (397,35) . : -Асп-Фен-ИН ° HCI в 10 мл ДИФА в при-

Найдено, %: С 51,51; Н 4,68; . сутствии 0,68 мя (4,86 ммоль) триf 24;06.. этиламина и 0,74 г (1,62 ммоль) BOCN-,трет-Бутилоксикарбонил-L-Норлей- 30 -0-О-Ала-ОПХФ оставляют на ночь, упацил-1-аспарагил- - (трет-бутылочный Ривают в вакууме,. гелеобразиый остасложный эфир)-Кфенилаланин-амид.. ток после разбавления эфиром отфильт. К раствору 1,68 г (5,0 ммоль):: Ровывают и промывают эфиром, затем

Н- Асп-(О-трет--бутил)-Фен-ИН и 2,2 г.. водой. 1,36 г сырого продукта хрома(5,5 ыаоль) ВОС-Норлей-ОПФФ в 10 мл 35 тографируют на силикагеле, элюируя

ДЬЙА добавляют 0,70 мл (5,0 ммоль). смесью растворителей Р 10. Чистые тРиэтиламина, спустя 3 ч упаривают в фракции упаривают в вакууме. твердый вакууме и твердый остаток отфильтро- ::остаток после разбавления 50%-ным водвывают при охлаждении после разбавле-. : ным зтаиолом отфильтровывают. Полуния эфиром. Получают 2,23 r (81,8%), чают 0,25 г ВОС-Э-О-Ала-Трп-НорлейВОС-Норлей-Асп-(О-трет-бутил)-Фей-.:. - асП-Феи-%4, т. пл. 217-218 С (разл) 1

ЙН т. л. 164-165 С. После пере- R j 0 30; R " 0,1.5; ()ъ = +4,3 кристаллизацией из этилацетата т. пл.; (C "- 1°, 0 ° ДмФА) °

165-167 C; Rg О, 70; (Ц = -,2, 2 Вычислено, %: С 59, 59; Н 6, 71; (с 1,0, ДЙФА) . - ...: . И 12,80.

Вычислено, %- с 61,29; и 8,08; сззн н О„о (765

N 10,24,, Найдейо, %: С 59,40; Н 6,55;

С а 6<4N+O (548,66) . . - N 12,83.

Найдено„%: С 6134; Н 770;, . П р и и е р 11.

Й 10,40., : - Пентафторфениловый эфйр Ы-трет.ЕЯОРЛЕйциЛ-L-аСПараГИП-Ь-фЕНИЛ-. О -БутИЛОКСИКа бОНИЛ-Б-НОРВаЛИИа алании-амид-гипрохлория, . .. 8,0 г (20 ммаль соли ВОС-Норвал1, 90 г (3,47 ммоль) ВоС-Норлей-Асп- оН дициклогексиламин при встряхива-(О-трет-бутил)- Фен-нн растворяют в ййи растворяют в смеси 60 мя эфира и

15 мл 4 н.солянокислой уксусной кис- 20 мл 2 н.серной кислоты. Эфирную фалоты, через 1 ч упаривают в вакууме Я зу отделяют, промывают.20 мл ?, й.серн твердый остаток после разбавления . ной кислоты и водой, высушивают и упаэфиром отфильтровывают. Получаю.р . . Ривают в вакууме. Остаюшееся масло

1.48 r. (98%) Н-Норлей-Асп-Фен-НН HCI вместе с 3,70 г (20 ммоль) НО-ПФФ рат рйзл- 195 С; НК О. 357 (1)з - -15,4 створ т в 35 этилацетатау при о . й. <. 1 (с i* 1,0, дМФА). . ф) 0 С добавляют 3,92 г (19 ммоль) дЦГКД, N-трет-Бутилоксикарбонил-L-трипто- . " выдеРживают 1 ч, фильтруют, фильтрат фил-Хнорлейцил-L-аспарагил-L-фенил- упаривают в вакууме и маслянистый осаланин-амид. таток растворяют в 50 ил н-гексана.

1,35 г (3,15 ммоль) H-Норлей-Асп» Раствор промывают 5%-ным раствором би-.

-Фен NHg HCI и 1,26 r (3,15 ммоль) у ..карбоната натрия (5 х 20 мя) и Водой

19

Ф

691082 (2 х 20 мл), упаринают н вакууме, умЕ, твердый остаток после разбавлемасдообраэный остаток кристаллизуют .. ния эфиром отфильтровывают и получапри охлаждении и получают 6,21 г (81Ъ) an 1,67 г (98Ъ) H-Трп-Нарвал-Асп-C>evo о. T

BOC-НоРвал-0ПФФ, .т, пл. 60-62 C;, -ИН - HCI, т. пл. 202 C; R Х 0,25;

Rg 0,70; (с(l Х = -32, 3 (c = 1,0, ди-" (с() р = -30,0 (с = 1,0, ДМФА) . оксан).: . : . . 5 2-D-(трет-Бутилоксикарбониламино ВычиСлено, Ъ: С 50,14; Н 4,73; окси)-пропионил-L-триптофил-L-норваР 24,78. — . лил-Ь-аспарагил-L-фенилаланин-амид

С„6H„8F+NO4 (383,32) .. ".1,55 г (2,52 ммоль) Н-Трп-НорналНайдено, Ъ: С 50, 06," Н 4, б 4; -Асп-Фен-ИН < .HC I н 20 мл ДМФА в

F 24, 63.,- o присутствии 1, 06 мл (7, 56 ммоль} триЯ-трет-Бутилоксикарбонил-L-нарва- . этиламина и 1,14 г (2,52 ммоль) ВОСлил-L-аспарагил- -(трет-бутилоный . -D-0-Àëà-ОПХФ выдерживают в течение сложный эфир)-L-фенилаланин-амид. ночи, упаривают в вакууме, разбавляРаствор 1,68 г (5,0 ммоль) Н-Асп- ют водой, отфильтровывают, осадок (5

-(Î-трет-бутил)-Фен-NHz в 10 мл ДМФА .. (2, 36 г}, хроматогра