Штамм с-5продуцент дендробоциллина

Штамм с-5продуцент дендробоциллина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Не Ес оюаиая па ем.нэ-те:.иачэсн в бч llQT: А,11) 6990 6

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОПЙ (61) Дополнительное к авт. свил-ву (22) Заявлено 07.07.78 (21) 2644298/30 — 15 с присоединением заявки И (23) Приоритет (51}M. Кл.

С 12 К 3/00

Гоаудаоствеииый комитет по делам изобретеиий и открытий

Опубликовано 25.1.1.79. Бюллетень и 43

El,àòà опубликования описания 25.11.79 (53} УДЬ, 632.937 (088.8) (72) Авторы изобретения

Б. Г1. Карабеков, М. Г. Оганесян и М. М. Скворцова

Армянский филиал Всесоюзного научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов (7l) Заявитель (54) 11!ТАММ BACillUS THURiNGiENSiS VAR. DENDRORMUS

С- 5 — ПРОДУЦЕНТ ДЕНДРОБАЦИЛЛИНА

Изобретение относится к микробиологическому производству, в частности, к производству бактериальных энтомоцндных препаратов, и представляет собой новый устойчивый к бактериофагам штамм.

В производстве энтомицидных бактериальных препаратов используют различные штаммы

Вас. thuringiensis (11. В числе их штаммы И 497, У 58. Однако эти производственные штаммы, как и другие штаммы этого вида микроорганизмов, чувствительны к бактериофагам и в производственных условиях часто подвергаются фаголизису.

Целью изобретения является получение штамма, устойчивого к встречающимся в производстве бактериофагам и не уступающего по продуктивности и вирулентности применяемому

II настоящее время лроизводстветшому штамму Bac. thuringiensis чаг. dendrolimus lIi 58 (21, из которого предлагаемый штамм получен.

Предлагаемый штамм имеет следующие характеристики.

Морфологические признаки. Клетки прямые, палочковидные, размером 3,0 — 6,0 х 0,8 — 1,3 мк.

Подвижные. Встречаются в виде коротки и длинных цепочек. Грамлоложителы1ы. Образют овальные споры и ромбовидные параспорнальные включения — кристаллический эндотоксин.

Мясопептонный агар. Беловато-кремовые плоские зернистые колонии с ризонднымн краями. Колонии легко снимаются петлей. Питменты не образуются.

Физиологические признаки.

Отношение к кислороду: факультативный аэроб. Максимум роста при температуре 28—

30 С. Оптимальные значения РН в пределах

7,0-7,4.

Сбраживает глюкозу, крахмал, эскулин, целлабиозу с образованием кислоты без выделения газа. Не сбраживает сахарозу, маннозу. Уреазу не образует. Обладает протеолитической активностью.

Сероаглютинация. Специфически аглютинируется с сывороткой Н 4а4б.

Вирулентен для гусениц непарного шелкопряда. Обладает устойчивостью к стрептомииину в концентрации до 5000 мкг/мл.

Устойчив к бактериофагам, выделенным на производстве бактериальных средстВ защиты растений (этобактерина и дендробациллина) и не подвергается фаголизису при заражении этими фагами в культуре на жидких и плотных питательных средах.

Для получения предлагаемого штамма вначале из исходного штамма N 58 был отобран спонтанный мутант, устойчивый к стрептомицину. Благодаря этому свойству возникла возмож- Iо ность вести направленную селекцию на получение устойчивых к бактериофагам мутантов.

Резистентный к стрептомицину мутант обраба. тывают нитрозогуанидином в концентрации

100 мкг/мл в течение 30 мин при температуре 30 С в цитратном буфере рН 6,0. Выжившие клетки высеяли на пластинки 2,5%-ного мясо69901 ственным штаммам (титр газЬн штамма) ае

Продуктив- Вируленгость, ность (1i s млрд млн спор/м пор/мл

Штамм, номер

Время спо руляции, час

12,7

С вЂ” 5

1,56

1,82

145

Физиологические признаки. Факультативный аэроб. Максимум роста наблюдается при 28—

30 С. Оптимальные значения рН в пределах

70 74

Сбраживает глюкозу, крахмал, эксулин и целлабиозу с образованием кислоты без выделения газа. Не сбраживает сахарозу, манноэу.

Обладает протеолитической активностью. Уреаэу не образует.

Сероаглютинация. Специфически аглютиниру4Д ется с сывороткой Н 4а4б.

Вирулентен для гусениц пепарног0 шелкопряда, Устойчив к бактериофагам.

Источники информашки, 45 принятые во внимание при экспертизе

1. Алешина О. А. Биологический метод борьбы с вредителями и болезнями сельскохозяйственных растений. M.: — Знание, 1975, с. 33—

37.

2. Такалаев Е, B. Микробиология. 1956, 25, с. 99-102 (прототип).

1И-1И1411И Заказ 7448/26

Тираж 526

Подписное

Филиал 1Н РП "Пу тент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Проверка штамма в производственных условиях показала хорошие качества предлагаемого штамма.

Ф ормула изобретенйя

Штамм Bacillus thuringiensis var. dendrolimus

С-5 — продуцент дендробациллина. Хранится в Центральном музее промышленных микроорганизмовв В сесою эного научно- иссл едов ател ьского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов.

Морфологические признаки. Клетки прямые, палочковидные, размером 3,0 — 6,0 х 0,8 — 1,3 мк.

Подвижные, грамположительные. Образуют овальные споры и ромбовидные параспориальные включения — кристаллический эндотоксин.

На мясопептонном агаре образует беловатокремовые плоские зернистые колонии с ризоидными краями. Колонии легко снимаются петлей. Пигменты не продуцирует.

6 4 пептонного агара, содержащего 100 мкг/мл стрептомицина. Предварительно поверхность arapa.пропитывают фаголизатом (1,0 х )О фаговых частиц на 1 мл). Фаголизатья готовят на исходном чувствительном к стрептомицину штамме Р 58. Выросшие колонии отбирают и изучают на устойчивость к различным п1юизводственным бактериофагам.

В результате получают предлагаемый штамм

С вЂ” 5.

Изучение свойств полученного штамма в отношении устойчивости к девяти бактериофагам

Bac. thuringiensis показало, что штамм С-5 устойчив к ним.

Результаты лабораторных исследований предлагаемого и исходного штамма приведены в таблице.

10в 106 10t 10 10 10