Способ получения ассоциированнойпаротитно-коревой вакцины
Иллюстрации
Показать всеРеферат
О П И,O À Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик (»>701147
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6! ) Дополнительное к авт. свид-ву (22)Заявлено 13.06.77 (2l) 2496195/28-13 (51)Щ Кл с присоединение>и заявки ¹
С 12 К 5/00
Государственный комитет (2;3 l Приоритет по делам изобретеиий и открытий
Опубликовано 15.07.81. Бюллетень ¹ 26 (53) УЛК 615,371, /372(088.8) Дата опубликования описания 20.07.81
Л. N. Бойчук, Г.A.Âàcèëüåâà, А. А. Смороцинцев и Н. С. Русецкая (72) Авторы изобретения
Ленинграцский ордена Трудового Красного Знамени научноисслецовательский институт эпидемиологии и микробиологии им, Пастера (7!) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АССОЦИИРОВАННОЙ
ПАРОТИТНО-КОРЕВОЙ ВАКЦИHbl
Изобретение относится к области медицины, а именно, к вирусологии.
Известен способ получения ассоциированной паротитно-коревой вакцины путем заражения вирусами Kopje. и паротита ку
5 льтуры ткани с последующим съемом вирусной массы.
Однако цля приготовления ассоциированного препарата отбирают только высококонцентрированные паротитные вирус(0 ные смеси с титром не ниже 6,0-6,5 р
ГАДЕ, получение которых в больших произвонственных количествах затруднено.
Средний титр паротнтных сборов при обычном способе культивирования со ставляет S,О- 5,5
6,0-6,Sag ГАДЕ„. В связи с этим пля производства парогитнс» о вируса необхоци 0 мой концентрации нрихоцится заражать большое количество партий клеточных культур с учетом от .»ца вируса со слабой биологической v,ãèpíîeòh>o.
Целью изобретения является повышение выхода и активности целевого пропуки.
LIerrr. постигается тем, что культуру ткани заражают вирусами . кори и паротита оцновреме но прн соотношении инфекционных цоз i:20-120.
Пример. Сьежеприготовленную суспензито кле —îê эм,брионов японских перепелок (ФЭП} ь среде 1 99 с 1 0% гелячьей сыворотки разливают в однолитровые матрицы по 40 млн. клеток в каждый н тут же клеточную суспензню заражают смесью вирусов кори и паротита из расчета
0,06-0, 07 Т! Д и 0,0006-0, 0007 КДЕ на одну клетку соответственно.
После 2-3 суточной инкубации в стационарном положениии при 36--37оС из матрацев упелятзт ростовую среду, клеточный пласт 4-5 раз отмывают раствором Хенкса, наливают поддерживающую среду, содержащую 5% аминопептипа, и матрицы вновь номе;цают в гермостаг.
После 2-3 дней инкубации провоцят пер701 з вые сьемы вирусов, повторяя их с ин-,» тервалом 2-З дня в зависимости от интенсивности поражения клеточного пласта. Всего проводят два полезных сбора вируссодержащей жидкости с инфекционной активностью 5,5-7,0 6g ГЛДЕ о для вируса паротита и 4,5-5,0 6Я TUQ O для вируса кори, что превышает в 5-10 раз урожаи при обычном методе культивирования вирусов. 10
B табл. 1 приведены данные накопления вирусов кори и паротита в производственной тканевой культуре на эмбрионах японских перепелок при одномоментной репродукции, а в табл. 2 — при раздельном
15 их культивировании.
Предла га е мы и с по с об культ ив ир ования вирусов кори и паротита значительно упрощает технологию производства ассоциированной паротитно-коревой вакцины за счет исключения ряда лишних операций, что обеспечивает .экономию времени и материалов. Устраняется дополнительное приготовление производственных тканевых культур ФЭП для культи- 25 вирования второго вирусного компонента.
147
Эт о экономит расход перепелиных эмбрионов, а также уменьшает затраты времени на приготовление тканевых культур и проведение раздельного контроля паротитных и коревых вирусных сборов на бактериальную и вирусную контаминацию.
Последнее способствует двукратной экономии лабораторных животных куpHHblk эмбрионов, контрольных тканевых культур, питательных сред и других материалов. Помимо того, уменьшается опасность загрязнения вирусной смеси посторонними бактериальными агентами.
Совместное выращивание вирусов кори и паротита в тканевой культуре ФЭП по предложенному способу и отличие or раздельного культивирования вирусных компонентов значительно облегчает и ускоряет технологический процесс, уменьшает возможность контаминации и позволяет получить более активный ассоциированный паротитно-коревой препарат непосредственно с задаженной ткани. Концентрация коревого и паротитного вирусов по сравнению с методом по прототипу увеличивается в 5-10 раз.
Составитель С. Саричева
Рецактор О. Кузнецова Техред С. Мигунова Корректор Г. Решвтник
Заказ 5737/37 Тираж 528, Поцписное
ВНИИПИ Госуцарственного комитета СССР по целам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб ., ц. 4/5 филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная 4 с 701
Формунa изобретения
Способ получения ассоциированной паротитно-коревой вакцины путем заражения вирусами кори и паротита культуры ткани с последуюшим съемом вирусной
l47 10 массы, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода ft активности целевого продукта, культуру ткани заражают вирусами кори и паротита одновременно при соотношении инфекционных доз 1:20-120. о. о о
fQ
Ж
o„ о
О 1 о
Щ
СО
fQ о о о о о о
Я
Ю (Q
3в 6
10 м о ж в 2 о в х д
0t,О и аоа
Ь
Фф, Ф
tf а о (Ц
С0 Г о
Я
Ю о о
И о с 4 (0
М о а о ct
> 10
Е Dо о ж т о
lQ о
Г о
Я о
Ю о
I
Ю о о в
Q.
fQ C
1 в е х
f о о о о
С0 о о о о
Г
С3 о
D о
С0 о о о о
Го о о о
Ю о о о о
5
Я л
t о о
I (0 о о
Г о о
I (О о о
Г о о
I (О о о
1 (0
I ю и »
О а 3ф
Г „03
1 ь
М в 1
ы и и & в в А ъ аца о >,ы ж х t0
CC а
Ф в ) о м
Я
I о аа
Е." ж о
Ф (0 о. < о 1
М
eg о
IA (0 а о 1
Е
Я
<0 о а
fQ о а о о о о к ж о д ъ в а а к
Л
-"1 в с5 а. о в
Ж и И о
1 в о
H. g (Д х о
1 и м М д р <а
y,a) и
1 ъ
Ж Q о и
М д
3 о
70ll.47 в ов
gl Ь и ово д х о