Штамм н5вт-121

Штамм н5вт-121

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

I с

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

С ою з С оветсинк

Социал нстнческнк

Республнн

701628

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свин-ву(22) Заявлено 05.06.78 (21) 2626 132/30-15 с присоединением заявки Ж (Ь1) М. Кл .

А 01 Й 15/00

С 12 К 3/00

Государственный комитет

СССР (2, 1) Приоритет

Опубликовано 05.12,79. овллетень,% 45

Дата опубликования описания 10, 12.79 ао делам изобретений и открытий (53) УЛК 663..1;

;576.8 (088.8) (72) Авторы изобретения

А. И. Козлов, Г. С. Смолина, В. Б. Фрейман и Л. М. Дилевская

Всесоюзный научно-исследовательский институт микробно тогических средств зашиты растений и бактериальных препаратов (71) Заявитель (54) ШТАММ Bac Hus t hUãтттд 1е1йэ чо г

ga66er ue Н5ВТ - 121

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и может быть использовано для производства энтобактерина, применяемого для борьбы с насекомыми вредителями.

Известно, что одним из средств для уничтожения насекомых-вредителей является бактериальный препарат энтобактерин, производство которого осуществляется при помощи штаммов Qacjgggc т0

1Ьиг преп дв чаг раИег1ае, В настоящее время используют дикие интродуктивные штаммы Bac@PPus И,Ш Ж тCR S 5-го серотипа, получаемые из погибших гусениц насекомых — вредителей

fi)

Однако штаммы, выделяемые непосредственно из природных источников, как правило находятся в фагпродуцируюшем состоянии, не адаптировашя к регламентным жидким и твердым питательным средам используемым B производстве в связи с чем пе выдерживают больших объемов производственньлх ферментеров v.

2 бракуются из за лизиса при первых к миссионных проверках. Известен штамм, ВастЦць tRUr111Q 1eïZis чу. gaLCe,riae,69/6,, выделенный в

1969 г. Исаковой H. П. из погибших гусениц болыцой пчелиной огневки. о 19 73 r. этот штамм был несколько улучшен и переведен из фагпродуцируюшего в латентное состояние сотрудниками ВНИИбакпрепарат (2), В настоящее время этот штамм является единственным производственным штаммом, на котором осуществляется наработка энтобактерина, Однако в последние 2 3 года штамм

69/6 дает продукцию низкого качества, часто подвержен спонтанному лизису и в скором времени подлежит снятию с производства, так как в процессе лизиса продуцирует весьма агрессивный палочковидный фаг Fg - 1 с{. содноцепочечной

LlHK.

Целью изобретения является штамм сзс1и ц Ъ г1пд е,nsis var ра ег1 зе

701628

1! 5ВТ-121,. Отвечак)ишй всем требев»--ниям, предьявляемым к производстве *=ным щтаммям-л родуцентам энтобяктерипя, т.е. B условиях глубинного культи:: вирования он HB BpopvijHp) eò Вйрупентный фаг и позволяет получать продукцию высокого качества.

Полученный io÷.BMM Зос И.ОБ Иаг1п—

g1ehs1s vov. gciKEe,r1îå Н5ВТ-121 имеет следующие морфологическую и физио- 1о логическую характеристики,.

Морфологические признаки.

Величина клеток в экспоненциальпой фазе развития ня агяре типа СПЛ равна

3,8 - 2,5 х 1,7 — 2,0 мк. Преобладающая форма палочковидная„На жидких питательных средах в условиях глубинного культивирования клетки подвижные, встре::чаются в виде коротких и длинных цепей.

Пери трихи грамположите льны. В период с та, 20 циоцарной фазы развития образую r споры вели чуней в 1,5 - 1,8 мк и округлые энтомоцидные кристаллы по Н-антигену

IlITGMtv! Н5ВТ=121 относится K 5-му се ротипу, 5о- 56.

Физиологические признаки.

Органическая среда для поддерживяю.J шей селекции и размножения клоповых попупеций - сухой питательный агар ти= па СПА. Колонии в B--форме, плоские зо с неровными краями. Диаметр копопии

5 ти суточной ку ц,туры 0,4 0,6 с:-,.

Пигмент не образует„

Питательный бульон. Всюду помутне--. г, ние значительное, осадок на 3 — 5 сутки, Молоко лакмусовое. К 2- -1 ч пептони= зация и подшедачпвание, затем подкисле-. ние и редукция молока. Коагуляция на

3-4 сутки, переваривание сильное, коягу - о лированная сыворотка розовая, Картофель ломтиками. Культура сухая бело-кремовая.

Агар с желатиной. Зона гидро шзя

68 мм.

Агар — кязеин. Просветление полное.

Агар — крахмал Зона гидропизя 2,53 мм.

Лрожжеполисахаридная регламентная питательная среда, используемая для производства энтомопатогенных бактери = альных препаратов, Интенсивный рост наблюдается к 9 — 11 ч культивирования при 28 — 30 С„Спорообразование и вы= сыпание завершается к 36 ч роста. Титр жизнеспособных спор в культуральной жидкости к концу культивирования на обед-. ненной ДПС (2!и БВК + 1 ".4 муки) т достигает 2,5 - 3,5 млрд/мл. 4

Отношение к углеводам.

Усваивает без выделеHH5E гяз!1 глюкозу, цеппобиозу, мальтозу, трегялозу, глицерин и оксяляты. 1{е усваивает манпозу, сахярозу, ляктозу, ярябинозу, инупин, сорбит, дупьцит, ацетат.

Ф

Отношение к фагам. Собственные фяги не продуцирует. Устойчив к фягам типа

Р Т3- 2; P I) — Ъ; Р1 - 1 Ъ, F O — ) 2 °

Антагонизм проявляет к с1 в

1,Ьц 1ПфС,Пу 1, 3, 4-серотипов.

Для получения штамма Н5ВТ-121 использовали принцип рекомбинации генов, т.е„перераспределение детерминант r e пома клеток к ряду клеточных поколений родительской популяции. В качестве фактора, индуцируюшего это перераспределение, использовали разницу температур равную -10 и +90ОС, В качестве исходной культуры, из которой был получен штамм Н5ВТ-1-21, служил штамм 4-го серотипа Н4ВТ-80, находящийся на хранении во ВНИИ-бякпрепарат, Штамм Н5ВТ«121 отличается от родителя принадлежностью к серотипу и в связи с этим является про дуцентом другого энтомопатогенного препарата. Кроме того, шта мм Н5 ВТ-3 2 1 в сравнении со штаммом-прототипом продуцирует на обедненной ДПС вдвое боль- ше спорокристаллического комплекса, что позволяет значптепьь; с лзить расход сырья на производство энтобактерина, а в связи с этим и его себестоимость.

Штамм Н5ВТ-121 является фагнепроду« пирующей культурой и превосходит штаммпрототип по своей вирупентности более чем в пять раз.

Формула изобретения

Штамм БОиИ06 тЬО1 юЯ юпв1ч vol

Qс1И, 1 1с1е Н5ВТ-121, используемый дпя изготовления энтомопатогенного бактерияльного препарата энтобактерина, применяемого против насекомых-вредителей сельскохозяйственных культур и леса, хранится в коллекции ВНИИбакпрепарат.

Морфологические признаки.

Величина клеток.в экспоненциальной фазе развития на обычном агаре типа

СПА равна 3,8 - 4,8 х 1, 7 — 2 мк.

Преобладающая форма папочковидная. Ня жидких питательных средах в условиях глубинного культивирования клетки подвижные, встречаются в виде коротких и длинных цепей. Перитрихи грямположительны. В пери0д стационарной фазы

701628

to!

Составитель N, Шишкина

Техре д Э. Ч ужик Корректор В, Синицкая

Редактор M. Вирко

Заказ 7469/5 . Тираж 755

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„д. 4/5

Подписное

Филиал ППП Патент, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 развития образуют споры величиной в

1,5 — 1,8 мк и округлые энтомоцидные кристаллы. По Н-антигену штамм Н5ВТ121 относится к 5-му серотипу, 5а5б..

Физиологические признаки.

Органическая среда для поддерживак>щей селекции и размножения клоновых популяций - сухой питательный агар типа СПА Колонии в Р-форме, плоские с неровными краями. Диаметр колоний

5 ти суточной культуры 0,4- — 0,6 см..

Пигмент не образует.

Питательный бульон. Всюду помутнение значительное, осадок на 3-5 сутки.

Молоко лакмусовое. К 24 ч пептонизация и подшелачивание, затем подкисление и редукция молока, Коагугцщия на

3-4 сутки, переваривание сильное, коагулированная сыворотка розовая.

Картофель ломтиками. Культура сухая„ бело кремовая.

Агар с желатиной. Зона гидролиза

6-8 мм.

Агар казеин. Просветление полное.

Агар - крахмал, Зона гидролиза 2,53 мм. зо

Дрожжеполисахарпдпая регла монтпа» питательная среда,используома» ппя производства энтомопатогешп K бакторп-альных препаратов. Интенсивный рсст наблюдается к 9 — 11 ч культивирования на обедненной ДПС (2,: БВК + 1 ".;, муки) достигает 2,5 - 3,5 млрд/мл.

Отношение к углеводам, Усваивает без выделения газа глюкозу, целлобиозу, мальтозу, трегалозу, глицерин и оксалаты, Не усваивает маннозу, сахарозу, лактозу, арабинозу„пнулип, сорбит, дульцит, ацетаты.

Отношение к фагам. Собствепцые фаги не предуцирует.

Устойчив к фагам типа Гс1- ;l:d- 5;

F — 6; Fu-i2.

Антагонизм проявляет к Bucltul 1Н ЙЮtts1S 1,3 и 4 - серотппсв.

Источш1ю1 информ 311itit, принятые во внимаш е прп экспортное

1. 1еверда М„Г„Симонова Л, A.

Использование микроорганизмов в животноводстве дпя зиш ты растений, Jl., 1968, с. 123-126, 2. Фрейман Б. Б. Результаты селекции производственных штаммов Вас. thu— г1й 1ЕПМ Тр„В1{ИИбакпрепарат, в. 2, 1973, с. 74-84. (прототип).