Способ получения препарата гликокаликса
Патент 707577
Авторы
Способ получения препарата гликокаликса
Иллюстрации
Реферат
О П С.:А,;.Ц-..И Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик
«п707577
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 0405.78 (21) 2611783/28-13 (51)М. Кл.2
А 61 В 10/00
G 01 N 33/16 с присоединением заявки М (23) Приоритет—
Государственный комитет
СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 612. 33 (088. 8) Опубликовано 05018 0 Б оллетень ¹ I
Дата опубликования описания 08.01ВО (72) Авторы изобретения A.м. уголев, JI.ô. смирнова и в.A. цветкова (71) Заявитель институт физиологии им. H.II. павлова AH cccP (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПPEIIAPATA ГЛИКОКАJIHKCA
Изобретение относится к биологии, в частности, гастроэнтерологии.
Известны гистологические способы получения препарата гликокаликса (1), (2) . Однако они не позволяют проводить 6иохимич еск ое исследование гликокаликса и ферментов, адсорбированных на нем, поскольку в процессе обработки не предусмотрено отделение гликокаликса от ткани органа, а также искажается локализация на нем ферментов .
Целью изобретения является отделение апикального гликокаликса от щеточной каймы слизистой тонкого кишеч- ника при сохранении локализации на нем ферментов.
Поставленная цель достигается тем,, что отрезок тонкой кишки заполняют
2-4Ъ-ным раствором агар-агара при температуре 40-42 С, охлаждают и после его застывания извлекают из просвета органа гель, вклюиакщий гликокаликс.
Способ осуществляется следующим образом.
Отрезки тонкой кишки длиной 68 см прсмывают 8-10 мл раствора Рингера, рН 7,4 +0,2, комнатной температуры с помощью шприца, завязывают с одной стороны и заполняют 2-4%-ным растворсм агара-агара в направлении, противоположном направлению расположенияя ворсинок .
Раствор агар-arapa для заполнения кишки приготавливают в течение 30 мйн в кипящей водяной бане, затем охлаждают до 40-42 С. Зап6лнение каждого отрезка кишки осуществляют с помощью пипетки с щироким отверстием. Затем отрезки кишки завязывают с другой стороны и опускают в охлажденный до
0-4 С солевой раствор, например Рингера (1,79 мМ NaHCO>, 2,16 мМ СаСР<,.
5,63 мМ КС6; 146,29 мМ ЙаСЕ) . В результате охлаждения через 10-15 мин агаровый воль переходит в гель.
Отрезок кишки, заполненный агаровьм гелем, осторожно разрезают вдоль его длины и агаровый гель извлекают, избегая повреждений слизистой. После отделения от слизистой поверхность геля представляет собой негативный отпечаток внутренней поверхности кишки.
Как показал электронно-микроскопи..ческий контроль, способ позволяет полностью препаративно отделять апикальный гликокаликс от других структур
Шеточной каймы за счет перехода его
Составитель E. Коренева
Редактор И. Марковская Техред O.андрейко Корректор М, Вигула
Тираж 6ÐÜ Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Заказ 8383/3
4 филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
3 707577: .- 4
У на поверхность агарового геля беэ иэ- ного гликокаликса от щеточной каймы вменения структуры гликокаликса. Био- слизистой тонкого кишечника при сокимический анализ показал, что в пре- хранении локализации на нем фермен парате сохраняется локализация фер.- тов, отрезок кишки заполняют 2-4%-ным. ментов на структуре гликокаликса. растворсм агар-агара при температуре
Способ может быть использован при ис- 5 40-42 С, охлаждают и после. его заследовании как мембранного. гидралиэа стывания извлекают из. просвета оргав тонкой кишке, так и других функций:: на гель, вклйчакиций гликокаликс. клеточной поверхности.. ..: ". -, . Источники информации, йрииятые во внимание при экспертизе
1 . Пирс 3. Гистохимия, 1962, Форкула изобретения с. 687. . 2. D,H. Barry anoI W.E. Robenson
Способ получения препарата глйко- ": Ensyme 6istochemicaI studies en каликса, отличающийся rat Iurigr . . Histochem,Уогп,, 1969, тем, что, с целью отделения апикаль-: ..: V 1, 9 6,. р. 497-504.
Р Д Р У °