Питательная среда для выделения

Питательная среда для выделения

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ (6! ) Дополнительный к патенту (22) Заявлено 030577 (2!) 2477157/28-13 (23) Приоритет — (32) 0305.76 (3!) 682659 (33) Союз Советских

Социалистических

Республик

< и 708998 (51) М. Кл.

С 12 К 1/06

Государственный комитет

СССР по делам изобретений н открытий (53) УДК 576.8. . 093.1 (088.8) Опубликовано 0501:80- Бюллетень № 1

Дата опубликования описания 0501.80 (72) Авторы Иностранцы изобретения сандра Фэйе Джибсон и Грегори Дуглас Роджерс (США) Иностранная фирма Макдоннелл Дуглас Корпорейшн (США) Pl) Заявитель (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ

K DEBS i E I IA / ENTегоBACTER

4,5-5,0

9,0-11,0

9,0-11 0

0,24-0,26

9,0"11,0

0,24-0,26

Изобретение относится к области микробиологии и может быть использовано для микробиологического анализа в медицине.

Известна питательная среда для выделения KLebsiefXa Entегоbacter, содержащая воду, источник азота, источник углерода, индикатор и ингибитор посторонней микрофлоры (1).

Однако известная среда не обеспечивает селективного выделения KIebsieIIa/Entегоbacter

Целью изобретения является селективное выделение микроорганизмов.!

Эта цель достигается тем, что среда дополнительно содержит бриллиантовый зеленый и дрожжевой экстракт, в качестве источника азота она содержит гидролиэат желатины, в качест- ве источника углерода — целлобиозу, иноэитол и Д-биотин, в качестве индикатора — дезоксихолат натрия и натриевую соль рицинолевой кислоты, в качестве ингибитора посторонней микроФлоры-3-(сХ.-ацетонилбенэил) -4-оксикумарин и 2,4-динитрофенилгидразон сК-кетоглутаровой кислоты при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды:

Г и др сли э ат ж ел а тины

Целлобиоза

Иноэитол

Дрожжевой экстракт

Деэоксихолат натрия

Д-биотин

Натриевая соль рицинолевой кислоты 9,0-11 0

3-(<-Ацетонилбенэил)-4-оксикумарин 1,96-2,04

2,4-Динитрофенилгидразон с -кетоглутаровой кислоты 0,49-0,51

Бриллиантовый зеленый 0,013-0,0135

Положительные результаты индицируются с помощью солей желчных кислот (дезоксихолата натрия) и рицинолевой кислоты, что вызывает изменение светопропускания среды, регистрируемое устройством. Полный анализ может быть saкончен в течение 12-18 ч.

Среда предпочтительно содержит ингибиторы роста Escherichia coli и ингибиторы грам-отрицательных организмов. Подавление роста Escherichia c улучшением роста К1вЬз1е11а обеспечивает применение 3-(с(,-ацетонилбенэил)—

-4-оксикумарина и 2,4-,динитрофенилгидраэона с(.-кетоглутаровой кислоты. От708998

0,05

2 О

0 05

Формула изобретения

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Справочник по микробиологичес6О ким и вирусологическим методам исследования под ред, О. Биргера, М. Медицина, 1973, с. 58, с. 248 249.

Тираж 522 Подписное носительно высокое значение рН среды также способствует подавлению роста других нежелательных микроорганизмов.

Среда может быть высушена вымораживанием и может функционировать в условиях дефицита кислорода, 5

Питательная среда предпочтительнс содержит 2,3-2,8% питательных ве1цеств, О, 196-0,204% 3- (д -ацетонилбенэил) -4-оксикумарина и 0,049-0,051Ъ

2, 4- динитрофенилгидра эона d.-кетоглута1О ровой кислоты,, которые действуют как биологический ингибитор для подавления роста Е.coIi дающий положительные результаты при проведении анализов на присутствие KEebsieEEa или Entего»

bacter, и для стимуляции роста микроорганизмов KKebsieEEa. Присутствие

2,4-динитрофенилгидразона с(.-кетоглутаровой кислоты также обеспечивает положительный рост KIebsieIIa.

Питательная часть среды предпочтительно содержит 4,5-5,5 г/л гидролиэата желатины, 9-11 r/ë целлобиозы, 9-11 г/л иноэитола, 0 24-0,26г/л дрожжевого экстракта и 0,24-0.26 г/л

Д-биотина. 15

Подходящим источником питания является любой свободный от сахаров источник азота. Можно использовать также источники азота неорганического происхождения, например хлорид аммо- 3Q ния. Можно также использовать пептоны, содержащие небольшие количества сахаров.

Индикатором является дезоксихолат натрия и рицинолевая кислота. Индика- 35 торная смесь обеспечивает подавление роста грам — отрицательных микроорганизмов.

Химическими ингибиторами предпоч тительно являются 3-(d. †ацетонилбенэил) -4-оксикумарин и 2,4-динитро.— фенилгидразон сС-кетоглутаровой кислоты. Эти ингибиторы обеспечивают подавление роста организмов, отличных от Klebsiella.

При слишком малой концентрации любого ингибитора выход нежелательных фоновых положительных показателей увеличивается, при слишком высокой концентрации выход уменьшается.

Пример.. Для получения =реды в количестве .100 мл подготавливают среду для выделения Klebsiella u.

Entегоbacter путем растворения 0,4 r

3-(сС -ацетонилбензил) -4-оксикумарина в 98 мл дистиллированной воды при 55 смешивании с 2 мл 1 N раствора гидроокиси натрия. Затем растворяют 3-(ивЂ

-ацетонилбенэил) -4-оксикумарин и к раствору добавляют в (г):

Гидролиэат желатины 1 О

Целлобиоз а 2,0

Инозитол 2,0

ЦНИИПИ Заказ 8529/56

Дрожжевой экстракт

Дезоксихолат натрия

Д-биотин

Натриевая соль рицинолевой кислоты 2 О

Р

2-4-динитрофенилгидраэон.

Х -кетоглутаровой кислоты

Раствор перемешивают. B течение

1 ч, к нему добавляют 0,027 r бриллиантового зеленого. С помощью капельного добавления гидроокиси натрия рН среды доводят до 8. Затем раствор стерилизуют с помощью фильтрации.

Предлагаемая среда обеспечивает селективное выделение Kiebsietla

Entегоbacter.

Питательная среда для выделения

K2ebsie Г Pa/Entегоbacter, содержащая воду, источник азота, источник углерода, индикатор и ингибитор посторонней микрофлоры, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что. с целью селективнorо выделения, она дополнительно содержит бриллиантовый зеленый и дрожжевой экстракт, в качестве источника азота она содержит гидролиэат желатины, в качестве источника углерода-целлобиозу, инозитол и Д-биотин, в качестве индикатора — деэоксихолат натрия и натриевую соль рицинолевой кислоты, в качестве ингибитора посторонней микрофлоры 3-(д.-ацетонилбензил) -4-оксикумарин и 2,4-динитрофенил. гидраэон ck -кетоглутаровой кислоты при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды:

Гидролиэат желатины 4,5-5,0

Целлобиоэа 9,0-11,0

Инозитол 9,0-11 0

Дрожжевой экстракт 0,24-0,26

Деэоксихолат натрия 9,0-11,0

Д-биотин 0,24-0,26

Натриевая соль рицинолевой кислоты 9,0-11 0

3- (K-Ацетонилбенэил) -4-оксикумарин 1,96-2,04

2,4-Динитрофенилгидразон с ;кетоглутаровой кислоты 0,49-0,51

Бриллиантовый зеленый 0,013-О,0135 филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная,4