Способ фотометрирования объектов, находящихся в оптически активной среде,содержащей контрастные включения

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советских

Соць1алистических

Республик

П 4 Н.И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ (11)7!4)7О е

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6! ) Дополнительное к авт. синд-ву (22)Заявлено !406.77 (2!) 2496619/!8-25 (5!)М. Кл. с присоединением заявки М

G О! J 3/06

G О! J 1/04

Ваударстввииьй комитет

СССР (23) Приоритет

Опубликовано 05 02 80 Бюллетень,Р!в (53 ) УД К 535.242. ,2 (088,8) вв аеааи изобретений к аткрьпий

Дата опубликования описания 05.02.80

r /

А. И. Речаник, Л. Jl . Литинская, С, A. Четщов и Ю. P. Хруст (72) Авторы изобретения

Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного, Знамени государственный университет имени М. В. Ломоносова. (7!) Заявитель (54) СПОСОБ ФОТОМЕТРИРОВАНИЯ 00bEKTO8, НАХОДЯЩИХСЯ В ОПТИЧЕСКИ АКТИВНОЙ

СРЕДЕ, СОДЕРЖАЩЕЙ КОНТРАСТНЫЕ ВКЛЮЧЕНИЯ

Способ относится к одновременному опре. делению оптических свойств обьекта и коЛи чества контрастных включений в оптическя активной среде над ним и может быть применен в биологии, медицине, ядерной физике.

Известен способ определения числа конт .растных включений, в активной среде, например, зерен в эмульсии, заключающийся в визуаль- . ном подсчете этих зерен, их растворении, окрашиванин объекта, например клетки, и определении оптической плотности объекта с помощьв фотометра (1) .

Однако этот сйособ имеет низкую точность и характеризуется трудоемкостью проводимых операций.

Наиболее близким по технической сущности к предложенному является известный спо соб фотометрнровання объектов, находящихся в оптически активной среде, содержащей «онтрастные включения, заключающийся в том, что указанную смесь освещают параллельным цуч- ком света и сканируют полученз!ое ttpacttetHoe иэображение с помощью зонда и фотоприемника, связанного с системой регистрации. В этом

2 способе последовательно определяется, оптическая плотность объекта совместно с расположенЪ ными над ним контрастными включениями путем фотометрирования в двух длинах волн, оптическая плотность контрастных включений фотометрироваиием в третьей длине волны, где сам объект прозрачен, и размер объекта, который оценивается по размеру зонда-диафрагмы, в которую объект вписывается. Затем по полученным данным вычисляется оптическая плотность самого объекта при предположении равномерности распределения вещества объекта под контрастными включениями и вне их (2).

Однако характерными для этого способа являются длительность производимых операций, tt также большая ошибка в определении размера объекта сложной формы.

Цель изобретения — упрощение процесса измерений, а также повышение точности опре. деления числа контрастных включений и оптической плотности объектов, например, клеток, находящихся в оптически активной среде.

Это достигается тем, что используется одно. волновый источ п к излучения, а сканирование

714170 ведется одиовременио двумя концентрическими ааТор, причем сканограмму от большого зон. зондами разного размера, затем сканограммы да поднимается выше сканограммы от малого совмещаются таким образом, чтобы их пересе- зонда так, что пересечение обеих скаиограмм чение происходило на пиках, соответотвующих происходило на пиках соответствующих контконтрастным включениям, находящимся в объ- растным включениям в объекте, Выделение с екте или в среде над ним. Полученный разност- помощью дискриминатора импульсы, соответстный сигнал одновременно используется для вующие контрастным включениям, подсчиты. подсчета контрастных включений и чтя исклю- вают счетчиком ЕСА — 3. Для определения опти чения сигналов ot контрастных включений при ческой плотности объекта используется интегопределеиин оптической плотности объекта. 10 рнрующий вольтметр Ф 5007, на вход котороПредложЬнный способ точнее известных, го поступает сканограмма от малого зонда, а так как at требует определения площади объ- выделенные с помощью дискриминатора нмпульекта и ускоряет время измерений, поскольку сы, соответствующие контрастйым включениям все операции производятсй за один цикл ска- закрывают вход вольтметра на время; равное пирования.. 15 длительности этих импульсов. Оптическая плот1

На чертеже представлено совмещение ска- ность определяется как отношение полученного нограмм для получения требуемых параметров., значения на интегрирующем вольтметре к колиСкаиограмм» 1 от зонда малого размера честву отсчетов амплитуды, полученное с по опйсйвает объект и включения в нем, а скаио мощью второгб счетчика ECA-3. грамма 2 от зонда большего размера описывает ро только сам объект. Кривая 3 представляет собой сигнал для подсчета.контрастных включе- . Ф о р м у л а и з о б р е т е н н я ний.и исключения участков объекта, занятых контрастными включениями, при определении Способ фотометрироваиия,объектов, находяоптичеясой плотности. 25 шихся в оптически активной среде, содержа-Обработка результатов ведется следующим щей контрастные включения, заключающийся. образом. в том, Что указанную смесь освещают паралСканограмма 2поднимаетсявышесканограм- дельным пучком света и сканируют полученное мы 1 так, что пересечение обеих сканограмм просветлое изображение с помощью зонда и происходит на никах, соответствуваЖх конт- ЗО фотоприемника, связанного с системой регистрастным включениям в объекте. Количество рации, отличающийся тем, что, контрастных включений подсчитывается счетчи- с целью повышения точности определения чиском по числу пересечений, а фотометрнрование, ла контрастных включений н оптической плотсамого объекта производится в тех местах ска- ности объекта, а также упрощения процесса нограммы l, где иет пиков от контрастных э5 изммеречий, используют одноволновый источник . включений. На фиг. 1 эти места отмечены точ- излучения, а сканирование ведут одновременно ками. При фотометрировании вычисляется ло- двумя концентрическими зондами разного разгарифм отношений амплитуды падающего Ф, мера, затем сканограммы совмещают таким и прошедшего Ф световых потоков. образом, чтобы их пересечение происходило на

Пример реализацйи изобретения. <о пиках, соответствующих контрастным включеПрепарат с объектом и контрастными вклю- ниям, находящимся в объекте нли в среде над ченнями в нем, например, радиоавтограф pere- ннм, полученный раэностный сигнал одновренерирующей печени мьппи, окрашенной по Фель- менно используют для подсчета контрастных гену, устанавливается на предметном столике включений и исключения сигналов от контрастоптического микроскопа, скаиирсеание объекта .45 ных включений при определении оптической осуществляется перемещением предметного сто- плотности объекта. лика микроскопа. Ифоиэводнтс» двухзондовое сканирование объекта. Изображение объекта с Источники инфоРмации контрастными включениями в нем проектирует- .принятые во внимание при экспертизе ся в. плоскость кольцевогр зеркала. Последнее 1. Авторское . аидетельство СССР

СССР М 257067 разделяет световой поток йа два: один проходит кл. G 02 В 21/00, 1968, через небольшое отверстие в центре, другой от- 2. Папаян Г. В. н др. Одновременное опражается от зеркальной поверхности. Фотоэлект- ределение вещества и интенсивности метки на . роиные умножители, регистрируют оба светова окрашенных автографах .-Цитология, 15, 9, потока. Две скаиограммй постуцают На днскри- q с, 1184 — 1190, 1973 (прототип).

714170

Составитель Л. Титова, Техред М.Петко, Редактор А. Виноградов

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Il 1

1 It

Заказ 9269/34 Тираж 713

HHHHHH Государственного комитета СССР по делам изобретений ia открытий

113035, Москва, Ж-ÇS, Раушская наб., g. 4/5

Корректор Г Назарова

Подписное