Способ размножения клевера красного

Способ размножения клевера красного

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советсник

Социалистичесник

Республик (»I 721035!

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 28. 11.79 (23) 27 12084/30-15 с присоединениеМ заявки М (23) Приоритет

Опубликовано 15.03.80. Бюллетень М 10 (51)M. Кл.

А 01 Н 3/00

Ввудервтеена4 квинтет

СССР и аевеи нзвбретеннй в втнрытн0 (53) УДК631 533 (088.8) Дата опубликования описания 18.03.80

- (72) Автор изобретения

А. В. Мезенцев

Всесоюзный ордена Трудового Красного Знамени научноисследовательский институт кормов им. В. P. Вильямса (7I) Заявитель (54) СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ КЛЕВЕРА

КРАСНОГО in ц itro..= ф@У -:=; ббб Ж @ Ь.".бббй ЪЫ@ .

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции и семеноводстве, в исследова-,. ниях по фитопатологии, физиологии и генетике растений.

Известны способы ускоренного размножения и оздоровления отдельных видов растений с использованием культуры тканей f13.

Однако для многих ценных сельскохозяйственных культур, в том числе и для клевера красного, эти способы не приемлемы, что связано со специфическими для каждого вида растений условиями, способствующими получению регенерантов

15 из тканей и клеток, культивируемых

)и @ 1г0. известен также способ регенерации растений люцерны (наиболее близкого к клеверу рода семейства бобовых) из. каллусов листового происхождения на агаризованных питательных средах(2 .

Однако этот способ оказался неприме-" ,ним к клеверу красному, так как у атой

2 культуры, в отличие от люцерны, невозможно получить из каллусов почки и в дальнейшем растения=регенеранты.

Целью изобретения является ускоренное размножение и оздоровление клевера красного от бактериальной, грибной и

» вирусной инфекции.

Поставленная цель достигается тем,. что листочки, каллусы и почки культиви= руют при освещенности 8-10 тыс.лк, а после образования каллусов их переносят на питательную среду Гамборга В с кинетином из расчета 0,2-0,8 мг/л среды.

Способ осуществляют следующим образом.

Листочки, т.е. пластинки тройчатого листа, культивируемых сортов и гибридов клевера красного стерилизуют в

0,1%-ном водном растворе диоцида и после трехкратной промывки в стерильной дистиллированной воде делают на каждом из них ряд надрезов по всей площади пластинки и помешают на осб йК ЛЮБ бббб ббббб:бб» а.;ФбЛЖ, "бб ббб бб %Щб б4бЮб. ббУМб б бббббййаю Я М ФИНЙВЮМЬЪМ М

Содержание, мг/л

2500

150

134

250

150

37

Изменения каллусов клевера красного

Кинетин 0,2-0,8 мг/л при освещенности, лк урин 0,2-0,8 мг/л ности, лк

500- 150

О00- 1

0500-15000

Побурение

1обурение зо эраст оче

3 72 новную питательную среду Хамборга В в которую дополнительно вводят 6000—

8000 мг/л бактоагара и 200-300 мг/л нитрата аммония, содержание сахарозы увеличивают до 25000-35000 мг/л и вносят следующие фитогормоны: 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту (2,4-8)

8-16 мг/л, кинетин 6-10 мг/л и

А -нафтилуксусную кислоту (НУК) О, 10,5 мг/л, рН среды доводят до 5,8-6,0.

Состав среды Гамборга В5 прецставлен ниже.

Макроэлементы

KN0

И.Н рИ,,О (НН ) SO, >Q SO, 7H 0

CoC9. 2H O

Ре. SO 7Нд О

Трилон Б

Микроэлементы

MASOд Ня0 10

3 3 3

Хм - (-}4 7 -! О - 2

Мо Мо Од 2. Н 0 0,25

Си30л 5НтО 0,025

СоСФ бН О 0,025

К3 0,75.

Витамины

Никотиновая кислота 1

Тиамин-НС0. 10

Пирицоксин-НСР 1

Миоинозит 100

Сахароза 20000 рН среды 5,5.

Материал инкубируют 3 недели при непрерывном освещении люминесцентными лампами (освещенность 8,0-10,0 тыс.лк), температуре 26+1оС и относительной влажности возцуха 95-100О/о в закрытых прозрачных сосудах. Ф

Регенеранты пересаживали в почву и выращивали в обычных условиях, где они цвели и образовывали семена. Полученные

1035 4

В случае появления на листочках бактериальной или грибной инфекции их удаляют с частью прилегающей к ним питаТельной среды; вирусная инфекция устраняется под воздействием фитогормонов.

Через три недели развившиеся каллусы делят на 3-5 частей и переносят на ту же питательную среду, но без нитрата аммония,в которой оставляют только один фитогормон — кинетин из расчета

0,2-0,8 мг — л и культивируют при тех же условиях в течение трех-четырех недель.

Появившиеся на каллусах зеленые поче ки переносят на агаризованную среду

Гамборга В, разбавленную вдвое, без гормонов.

По мере развития из почек растений на этой среде и появления у них двух20 трех тройчатых листьев и корней, их пе—

). ресаживают в почву и выращивают в обычных условиях.

Пример. Проводилось размножение и оздоровление растений клевера

25 красного сорта ВИК-7 при освещенности 8-10 тыс.лк.

После деления листочков на 3-5 частей и переноса на вторую среду с

0,2 мг/л кинетина на каждом кусочке

ЗО пересаженного каллуса образовалось в среднем пять почек, которые при пересадке на третью среду без гормонов развивались в растения с двумя-тремя тройчатыми листьями и корнями.

35 При культивировании каллусов в условиях более низкой или более высокой освещенности, а также при использовании в качестве фитогормона бензиламинопурина в той же концентрации, что и кинетин, 4п почки не образовывались.

В таблице приведены морфогенетические изменения каллусов, полученные в различных условиях культивирования. растения-регейеранты были свободны от фитопатогенной инфекции и морфологически не отличались от исходных растенкй.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

Ъ

1.7oshio- Hul"oshiq е.Ahnua0. ее Lu

of рРс М рбчйо9оцч,1974, 25 125-166 20

2. Авторское свидетельство СССР по заявке № 2465483/30-15, кл. А 01 Н 3/ОО, 1977 (прототип).

Формула изобретения

1. Способ размножения клевера красного in oitrO включающий получение каллусов из листочков на агаризованной питательной среде с последующей

Составитель Г. Бростюк

Редактор Е. Хорина Техред О, Андрейко Корректор И. Муска

Заказ 2/1 Тираж 723 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

4НЮФЮММВВЬФВ Ъ " нФ

5 721035 6

Использование изобретения позволяет, пересадкой их на питательные среды, ускоренно размножать растения клевера культивирование почек с получением из красного и освобождать исходный мате- них растений, о т л и ч а ю ш и и с я риал от бактериальной, грибной и вирус- тем, что, с целью ускорения размноженой инфекции. ния и оздоровления растений, листочки, В селекционно- семеноводческой рабо- каллусы и почки культивируют при осте с клевером красным предлагаемый вешенности 8-10 тыс. лк, а после обспособ позволяет значительно сократить разования каллусов их переносят на пи сроки выведения и испытания новых cop-" " -"тательную среду Гамборга В с кине5 тов и гибридов этой ценной кормовой. 10 тином. культуры. Использование свободного от 2.Способпоп. 1,отличаю.фитопатогенной инфекции материала зна- ш и и с я тем, что в питательную сречительно повышает эффективность иссле- ду Гамборга В вводят кинетин из рас5 дований по фитопатологии., физиологии и чета 0,2-0,8 мг/л среды. генетике клевера красного. 15