Способ получения амидов нуклеозид 5-моно-или полифосфатов по концевой фосфатной группе

Патент 721453

Авторы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОП ИСАНИЙ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

N АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

tt ti 721453 (61) Дополнительное н авт. свид-ву (22) Заявлено 03.06,77 (21) 2491733/23-04 с присоединением заявки М (23) П риоритет

Опубликовано 15,03,80, Бюллетень М 1

Дата опубликования описания 17,03,80 (51) М. К и.

С 07 Н 19/04//

С 07 Cr 7/03

Гкударстеаыыае ыйиытат сир

tttt делам ызабратаыый

ы sxttptttrtttt (53) УДК 547.963:

;547.857 (088.8) (72) Авторн изобретения

В, В. Самуков, Г Ф, Сиволобова и Т. H. Шубина

Новосибирский институт органической химии СО СССР и Специальное конструкторско-технологическое бюро биологически активных веществ (7l) Заявители (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИДОВ НУКЛЕОЗИД-5вЂ” вЂ” МОНО- ИЛИ ПОЛИФОСФАтов ПО КОНЦЕВОЙ

ФОСФАТНОИ ГРУППЕ

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения амидов нуклеозид-5-h4oíî- или полифосфатов по концевой фосфатной группе, которые широко применяются в качестве реагентов в аффинной хроматографии.

Известен способ получения амидов нуклеозид-5 -моно- и полифосфатов по концевой фосфатной группе, основанный на активации концевой фосфатной группы превращением ее в смешанный ангидрид при действии избытка хлорангидрида

2,4,6-триметилбензойной кислоты в сухом пиридине в течение 10-20 мин,F

Выход смешанного ангидрида для 5-моно-, ди- и трифосфат нуклеозидов достит5 гает 60-90%. Последующая обработка смешанного ангидрида аминами в водном растворе или сухом диметилформамиде приводит к получению соответствующих амидов с выходом 60-90%. Синтезированные соединения выделяют хроматографией на бумаге. Недостатками существующего способа являются: e) двух2 стадийность процесса, б) проведение каждой стадии процесса в определенном растворителе, в) значительная продолжительность реакции смешанного ангидрида с аминами: 2-3 суток в воде или 18-20 ч в сухом диметилформамиде, г) очистка синтезированных соединений хроматографией на бумаге, что усложняет выделение целевого продукта.

Целью изобретения является упрощение процесса.

Поставленная цель достигается использованием конденсирующего агента: трифенилфосфина-2,2 -дипиридилдисульфида, 5-10-кратного избытка амина (рКа>5), что позволяет провести процесс в одну стадию и уменьшить время процесса до 1-2 ч, и веделением целевого продукта осаждением.

Предлагаемый способ получения амидов нуклеозид-5 -моно- или полифосфатов по концевой фосфатной группе заключается в том, что реакцию проводят в

3 смеси 5 -моно- или полифосфатов нуклео721453

55 зидов в сухом полярном впротонном растворителе (диметилформамид, диметилсульфоксид, aueTosHTplsl, пиридин), 3-5-кратного избытка конденсируюшего агента-трифенилфосфина-2,2 -дипиридил- дисульфида и 5-10-кратного избытка амина (pKa75) при комнатной темпера( туре в течение 1 ч для 5 --моно и дифосфатов нуклеозидов и в течение 2 ч для трифосфатов нуклеозидов. Соответствуюшие А, (, ) -амиды образуются с выходом 80-90%. Выделяют целевой продукт осаждением эфиром из реакционной смеси.

Пример 1 . Синтез тимидин(-5-фосфопиперидина.

К раствору 26 мг (0,08 ммоль) тимидин-5-фосфорной кислоты в 1 мл диметилформамида добавляют 0,03 мл пипериаинв (O,З ммоль(, 50 мг (0,23 ммоль) 2,2 -дипиридилдисульфида и

60 мг (0,23 ммоль) трифенилфосфина.

Через l ч отбирают аликвоту и хроматографируют на пластинке " РРО ОР сначала в системе CHC8 вЂ” С Н((ОН (9:1), затем до 1/2 длйны в системе

СН СК-H О (4:1), Результаты анализа показывают количественное образование тимидин-5-фосфопиперидидв. Реакционную ( смесь разбавляют 2 мл пиридина и выливают по каплям в 20 мл эфира. Осадок растворяют в 1 мл пиридина и снова осаждают в 20 мл эфира. Осадок центрифугируют, промывают дважды эфиром, .высушивают в вакуум-эксикаторе. Анализируют продукт ТСХ нв пластинке

" т цто в системе СН СК-Н2О (4:1), Продукт хроматографически однородный (R4 0,45), выход 92% (810 ОЕ (о ).

Пример 2, Синтез уридин-5-бензиламидофосфата.

К раствору 0,1 ммоль уридин-5-, Монофосфорной кислоты в 1 мл сухого пиридина добавляют 0,5 ммоль бензил амина, 0,3 ммоль трифенилфосфина и 0,3 ( ммоль 2,2-, дипиридилдисульфидв и выдерживают в течение 1 ч при комнатной температуре. Превращение количественное (по данным ТСХ). Реакционную смесь по каплям выливают в 20 мл эфира, осадок отделяют центрифугированием, промывают эфиром, (Зх10 мл), шивают в вакууме. Продукт анализируют тонкослойной хроматографией на пластинках в системе изопропанол: аммиак: вода-7:1:2. По результатам анализа продукт гомогенный (Ру 0,73), выход

80% (760 ОЕ бУ ), 4

Пример 3 . Синтез ) -морфолида ур иди н-5 -дифосфата.

K раствору 40 мг триэтиламмонийной

I соли уридин-5-дифосфатв (0,056 ммоль) в 1 мл диметилформамида добавляют

0,030 мл (0,45 ммоль) морфолина, 50 мг 2,2-дипиридилсульфидв (0,23 ммоль) и 60 мг трифенилфосфина (0,23 ммоль). Смесь встряхивают до образования прозрачного раствора. Через 1 ч аликвоту реакционной смеси анализируют бумажной хроматографией в системе этвнол вЂ” 1 М СН СООЙН(, рН 7,5 (7:3).

Анализ показывает количественное образование f -морфолида уридин-5 -дифосфвта.

Реакционную смесь IIo каплям выливают в 20 мл эфира, осадок центрифугируют, промывают дважды эфиром, сушат в вакуумэксикаторе. Анализируют продукт Р-ЯМРспектроскопией (два дублета с центрами при+ 3,7 м.д. и+ 10,6 м.д., соотношение интенсивностей 1:1) и бумажной хроматографией в системе этанолвЂ”

1N СН СООЙН((, рН 7,5 (,7:3). Продукт однородный (1ф 0,65). Выход 450 ОЕ><

90%., Пример 4 . Синтез вденозин5- трифосфо- ) -бензилвмида.

3р К рвст вору 300 ОЕ бо (0,02 ммоль)

I триэтилвммонийной соли аденозин-5- рп фосфатв в 1 мл диметилформамида добавляют 0,1 ммоль бензиламина, 0,075 ммоль трифенилфосфинв и 0,075 ммоль

2,2 -дипиридилдисульфида, встряхивают до образования прозрачного раствора и выдерживают в течение 2 ч при комнатной температуре.

Анализ аликвоты .на пластинке "МоИ в системе изомасляная кислота МН .

Н 0-66;1:33, показывает количественное образование продукта.

Реакционную смесь по каплям выливают в 20 мл эфира, осадок отделяют

4> центрифугированием, промывают эфиром (Sxl0 мл) высушивают в вакууме. Выход

260 ОЕ б 85%. Продукт гомогенный (R< 0,65 в системе изомасляная кислотаЯН . Ну О -66: 1:33.

Формула изобретения

1 Способ получения амидов нуклеозид-5-моно- или полифосфатов по конце вой фосфатной группе в сухом полярном апротонном растворителе в присутствии амина (рКа>5), отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса, 721453

Составитель Л. Никулина

Редактор Л. 1Ьвожилова Техред H. Ковалева Корректор Г. Назарова

Тираж 495 Подписное

Ш1ИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж 35, Раушская "наб., д. 4/5

Заказ 7 9/22

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 реакцию проводят в смеси нуклеозид5-моно- или полифосфата, 3-5-кратного ! избытка трифенилфосфина-2,2 -дипиридилГ дисульфида и 5-10-кратного избытка амина с последующим выделением целевых продуктов. осаждением.

Источники информации принятые во внимание при экспертизе

Х. Hue9eic Ас1о Reset " 1о 76, 3, N.4,,р. 903 вЂ” 9 16 (прототип).