Штамм бим83 продуцент полиметилгалактуроназ

Штамм бим83 продуцент полиметилгалактуроназ

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

А. Г. Лобанок, P. В. Михайлова и А. А. Опарина (72) Авторы изобретения

Институт микробиологии АН Белорусской CCP (7l) Заявитель (54) ШТАММ AGPBRGILLUS М ИСЕ0$ БИМ-83 - ПРОДУЦЕНТ

ПОЛИМ ЕТИЛГАЛАКТУРОНАЗ

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается штамма гриба AspergÆÞus аЮасеов БИМ83 — продуцента полиметилгалактуронаэ, Пектолитические ферменты находят ши- 5 рокое применение в пищевой и легкой промышленности. Эффективность действия пектинаэ обусловлена ферментами, входящими в остав их комплекса. Необходимость целенаправленного применения фер- 1в ментов ставит задачу получения препаратов с различным сочетанием пектиназ. что

gooTHpBBTcR подбором соответствующих продуцентов и условий их культивировании.

Известны продуценты пектолитическкх

15 ферментов из рода AspergiROvs 1 .

Однако этн продуценты обладают недостаточно высокой полигалактуроназной активностью, а синтез пектолитических ферментов при вырашивании грибов на средах с субстратом сопровождается синтезом целлюлаз, гемицеллюлаз и других ферментов.

Наиболее близким по своей технической сущности решением поставленной задачи является штамм Мре .я 1РЕов awarnor<

44--2Б P2).

Общая пектолитическая активность е ъ

0,961 ед/мл, причем эндо-ПГ 3,3 ед/мл, экэо-ПГ 13,68 ед/мл, ПЭ 0,62 ед/мл.

Цель изобретения — получение более активного продуц щта полиметилгалактуроназ, лишенного цеплюлазиой н гемицеллюлазной активности.

Исходная культура Аврегд»Иое аР

accus — исходной культуры, полученной в Институте микробиологии АН Белорусской CCP путем отбора активных моноспоровых вариантов и длительного пассивирования гриба на специфических средах.

Штамм хранится в музее чистых культур.

ИНМИ АН Белорусской CCP под Na Г-83.

946 4

722 следующим образом

12,8 О 769

Аар ачч агаси 1

44-.2б (известный) 0,961

13,68 0,62

Ам. аИласенs

БИМ-83 3,5-4,0 60-90 2035 следы

3

Морфологические признаки

На среде Чапека мицелий белый, септирован, не дифференцирован, продуцирует склероции, сначала белые, затем темнеюшие. Конидиеносцы, отходящие от опорной клетки, прямые, не ветвящиеся, не септированные бесцветные. Споровые головки желтые, становящиеся от цвета охры до коричневого .с возрастом, 30— . 40 мк в диаметре. Стеригмы цилипдричес-1

1о кие, расположены в 2 слоя. Первичные стеригмы 10-14 х 3-4 мк, вторичные

8X 2-3 мк, бесцветные. Конидии желтые, гладкие, округлые, 2-3 мк в диаметре.

Культуральные признаки

Сусло-агар. Четырехсуточная колония диаметром 5 см. Колония пушистая, воздушный мицелий по краям колонии белый.

Конидиеносная эона в центре колонии желтовато-кремовой окраски. Форма колозо нии круглая. Профиль колонии слегка конусообразный. С обратной стороны слабая желтая пигментация.

Среда Чапека. Четырехсуточная колония диаметром 3 см. Колония округлой формы, морщинистая. Мицелий белый, конидиеносная эона колонии имеет желтовато-кремовую окраску. Край колонии бахромчатый, На обратной стороне колонии слабо желтой окраски. зо

Картофеле-декстрозный агар. Четырехсуточная колония диаметром 3,5-4 мк.

Колония, пушистая, желтовато-кремовой окраски, по краям колонии воздушный бе- з5 лый мицелий; Форма колонии округлая, профиль конусообразный, край колонии ровный.

Биохимические признаки Asper дiQQu s

l0 сйИасеое БИМ-83 гидролизует крахмал, разжижает жела тину, свертывает молоко на 5-е сутки. Испопьэует аммонийную, нитратную и белковую формы азота. Ассимилирует глюкозу, мальтоэу, 45 сахарозу, ксилозу, галактозу, арабиноэу, Amp. аччсптюб 16 0,522 8,1 рамнозу, лактозу, сорбит, маниит, глицерин, этиловый спирт.

Выращивание предлагаемого штамма Aspe .giNus aNiaceus БИМ-83 производят

Пример 1. Готовят питательную среду, содержащую, %: свекловщтный жом

4, солодовые ростки О, 5, К Н Р О, -О, 1, (ЙН4) SO4 — 0,7. 50 мл питательной среды в колбах Эрленмейера на 250 мл стерилизуют при 0,75 атм в течение 30 мин.

После стерилизации питательную среду охлаждают до 30 С н. засевают 3-4 мл

0 водной споровой суспензии гриба. Гриб AsрещЮов аЫ асеов БИМ-83 культивируют на качалке прн 180 об/мнн в течение 96 ч при 30 С., Пектолитическая активность культу- .. ральной жидкости, определенная интерферометрическим методом, 4,0 ед/мл, активность эндополиметилгалактуронаэы, определенная вискоэиметрическнм.методом, 90 ед/мл, активность экэополиметилгалактуронаэы, определенная йодометрическим методом; 35 ед/мл.

Пример 2. Гриб AspergiIMus

aHiaceua BHM-83 культивируют поверхнос дым способом в течение 10 сут при

30 С в матрицах с 300 мл среды анао логичного состава.

Пектолитическая активность культураль ной жидкости 9 ед/мл; эндо-ПМГ 150 ед/мл; экэо-ПМГ 80 ед/мл.

Гриб не синтезирует пектннтрансэлиминазу (ПТЭ), пектинэстеразу (ПЭ) и ферменты пеллюлолитического комплекса. Синтеэируемый ферментный комплекс, состоящий иэ полигалажуронаэ, может найти применение в пишевой промышленности, а также дает воэможность применения его при мацерации растительных тканей. Cpasнительная характеристика пектолитических ферментов различных продуцентов,полученных при глубинном культивировании, дана в таблице.

iPn46

Составитель Н. Абрамова

Редактор А. Павлюк Техред Н. Бабурка Корректор М. Шароши .

Заказ 945/19 Тираж 522 Подписное

ЦНИИПИ Государствааюго комитета СССР по делам изобретений и открытий,113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Формула изо бр етения

Ш берегя 1Иоь aQtiaceus БИМ-83 продуцент полим етьшгалактуроназ, хранится в музее чистых культур культур ИНМИ 5

АН Белорусской CCP под ¹ Г-83.

Морфологические прижаки

На среде Чапека мицелий белый, септирован, не ды ференцирован, продуцирует 10 склероции, сначала белые, затем темнек щие. Конидиеносцы, отходящие от опорной клетки, прямые, не ветвящиеся, не септированные, бесцветные. Споровые головки желтые, становящиеся от цвета охры до 15 коричневого с возрастом, 30 -40 мк в диаметре. Стеригмы цилиндрические, расположенные в 2 слоя. Первичные стеригмы 1,0-14 к3-4 мк, вторичные 8Х2-3мк, бесцветные. Конидии желтые, гладкие, ок- 20. руглые, 2-3 мк в диаметре.

Культуральные прижаки

Сусло-агар. Четырехсуточная колонии диаметром 5 см. Колония пушистая, воздушный мицелий по краям колонии белый..

Конидиеносная эона в центре колонии желтовато-кремовой окраски. Форма колонии круглая. Профиль колонии слегка конусообразный. С обратной стороны слабая жел-30 тая пигментация.

- Среда Чапека. Четырехсуточная колония диаметром 3 см. Колония округлой формы, морщинистая. Мицелий белый конидиеносная эона колонии имеет жаптовато-кремовую окраску. Край колонии бахромчатый. На обратной стороне колония слабо желтой окраски.

Картофеле-декстрозный агар. Четырехсуточная колония диаметром 3,5-4 см.

Колония пушистая, желтовато-кремовой окраски, по краям колонии воздушный б лый мицелнй. Форма колонии округлая, профиль конусообразный, край колонии ровный.

Биохимические признаки;

Гидролиэузт крахмал, разжижает желатину, свер мвает молоко íà 5-е сутки.

Использует аммонийную, нитратную и байковую формы азота. Ассимилирует глкжозу, мальтозу, .сахарозу, ксилозу, галактсм зу, арабивэзу, рамноэу, лактоэу, сорбит, глицерин, этиловый спирт.

Обладает выл кой активвостъю пош метилгалактуроназ, не синтезирует пектинэстеразу .пектинтрансэлиминазу и ферменты целлюлолитического комплекса.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР

¹ю 293846, кл. С 12 9 13/10, 1969 (аналог) .

2. Авторское свидетельство СССР № 396362, кл. С 12 К 3/00, 1971 (прототип) .