Штамм 124-р, предназначенный для производства энтомопатогенного препарата боверина

Штамм 124-р, предназначенный для производства энтомопатогенного препарата боверина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОП ИСАКИЯ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (»>729246 (6I ) Дополнительное к авт. свил-ву (51) M. Кл. (22) Заявлено 21.09.78(21) 2667870/30-1 5

С 12 К 1/06 с присоединением заявки t%—

Гоеударстввнный комитет (23) Приоритет до делам изобретений и открытий

Опубликовано 25,04.80, Бюллетень Рй 15

Дата опубликования описания 25.04.80. ((53) УДК 6З:576..8 (088.8) З.В. Конанова, О. A. Алешина, С. H. Ильичева, A. И, Малькова, А. А. Булатова, P. Н. Белова, Л. П. Синицина, А, И. 11ибульска и Н. П. Круглова (72) Авторы изобретения

Всесоюзный научно-исследовательский институт микробиологических средств защиты растений и бактериальных препаратов (71) Заявитель (5q) ШТДМ((BEANVERIA BA55IANA (SALS)VNILL.12 1-Р, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЙ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЭНТОМОПАТсХЕННОГО

ПРЕПАРАТА БОВ ЕРИНА

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и может быть использовано при наработке микробиологических средств защиты растений.

Лля получения энтомопатогенного пре5 парата боверина в настоящее время используют штамм 11 ЗН-278 Р3

Однако такой штамм обладает высокой продуктивностью и вирулентностью о только при культивировании в питательных средах, содержащих дорогостоящее дефицитное сырье-пептон и сахарозу.

При замене же пептона и сахарозы на дешевое промышл .нное сырье — молочную

15 сыворотку, кукурузный экстракт, дрожжи, казеин и другие, культура вследствие низкой физиологической активности использует все компоненты среды и вместо конидиоспор формирует гонипии и бласто- Лз споры, быстро теряющие свою активность.

Пропуктивность штамма в глубинных условиях на регламентной срепе составляет всего 300 млн спор на 1 мл. культуральной жидкости, выход сос Tавляет 4 г с 1 л культуральной жидкости и вирулентность в L К, — 0,02- 0 002",,, длительность культивирования при оптио мальной температуре 27 С составляет

72 час.

Целью изобретения является получение штамма В. Ьа;с, (с(ос и тве чаютцег о требованиям производства и обладающего более высокой физиологической активностью, продуктивностью, вирулентностью, а также более коротким циклом развития, Штамм имеет следующие характеристики.

Морфологические признаки

На агаризованной среде Сабуро образует колонии круглые, плоские, прижатые к субстрату, с валиком на краю, без втг ричного роста и коремий. Кс нипиальиыи слой меловой консистенции. Пигментация конипиального слоя кремового цвета, пигментация субстрата рыже в(зтая, Л пав метр 7-дневных кс>лсиий 10,1+ 0,08 мм.

0,53+ 0,110

0,98 t 0,045

8,1 0,00056

1 2,0 0,0001 8

1 24-P

62

0,00500

О,00? 10

3,9

4,3

0,29 0,037

0,39 А 0,120

1 1. 3Н-278 1

72

3

Дие .«тр поверхностных конидиоспор

3,2 + 0,01 мкм.

На агаризованной среде Чапека колоE нии круглые с размытыми краями. Конидиельный слой морщинистый в центре.

Нижняя часть колонии имеет радиальную складчвтость. Пигментация конидиельного слоя от меловвто-белой до пепельно — серой окраски,.

На среде сусло-агар образует плоские колонии круглой формы с валиком по краю и выпуклой средней частью. Нижняя часть колонии рыжеватая. Конидиальный слой бело-кремового цвета., В глубинных условиях в питательной среде, содержащей, "4: сахар или сухую молочную сыворотку 1,0, Мой О

0,9, МРЬОд 0,075, K11 F О4 — 0,225, СаС1 -1,25, конидиоспоры прорастают одной или двумя pocTKQBblMH трубками. Основная массе спор прорастает через 12 чес. B течение 36 — 48 час интенсивно развивается мицелий, отщепляются гонидии и вторично прорастают, Опновременно на мицелий формируются конидиеносцы бутылевидной формы с расширенным основанием. Конидиоспоры расположены на конидиеносцвх баэипетально на коротких стеригмах, Завершение спорообразования и лизис мицелия наступает через 62 час. Диаметр глубинных конидиоспор 3 — 5 мкм.

Физиологические признаки.

Отношение к углеводам. Хорошо усваиваетт сахерозу, глюкозу, лактозу, мальтозу, ерабинозу, рамнозу, фруктоэу. Слабо развивается на ксилозе. Не усваивает целлюлозу. Крахмал интенсивно гидролизуе т.

Отношение к источникам азота. Хорошо усваивает альбумин, квзеин. Интенсивно развивается на пептоне. Свободные аминокислоты стимулируют конидие образование в концентрации 15, мг " в среде. При концентрации от 20 до

9246 Л

50 мг" конидиеобреэовение нарушается, образуются гонидии и блестоспоры, Хорошо усваивает аммонийный азот. ((NH43 30, 4Ы4 ИРО и (Н РО и нитреты (>GNOg ).

Отношение к органическим кислотам.

Усваивает пировиноградную, уксусную, щавелевую кислоты. Не усваивает янтарную кислоту, Отношение к спиртам. Усваивает меннит, дульцит, сорбит, глицерин. Слабо резвиюется нв ксилите. Не усваивает этанол, изопропанол, н-бутвнол. 5 Оптимальная температура культивирования 25-27 С. 1.нтенсивность аэрво ции 0,5-1,0 г 0 /л/час, Предлагаемый штамм получен методом селекции на основе моноспорового го рассева культуры i B.ЬаЭуопа после пассажа через колорадского жука. Исходный штамм был получен иэ Института биологии АН Латвийской CCP. Поскольку исходный штамм в глубинных условиях формировал только гоМидии и бластоспоры,, изучение основных свойств нового штамма проводят в сравнении со штаммом-прототипом 113Н-278, который используется в настоящее время в микробиологичес30 кой промышленности для получения глубинных конидиоспор.

В таблице приведены данные продуктивности и вирулентности предлагаемого и известного штвммов в жидких пита35 тельных средах — в регламентной (среде № 1, с сахаром). и в среде, содержашей вместо сахара молочную сыворотку (среда N 2).

Как видно из денных таблицы, пред40 лвгаемый штамм превышает известный по выходу биомассы и титру конидиоспор в 1,5-2,0 разе, а по вирулентности в

10 раз. При этом формирование спор у предлагаемого штамма проходит в более

4 короткий срок (на 10 часов быстрее).

Формула

5 7202 изобретеииг

Штамм Beonver ||| ||эоэЫО| о (6014 %IIÈ.

124-Р, предназначенный для производства энтомопатогенного препарата боверина.

Хранится в коллекции Всесоюзного на1 учно-исследовательского института микробиологических средств зашиты растений и бактериальных препаратов.

| 1о рфол ог и ческ ие признаки

На агаризованной среде С.";буро образует колонии круглые, плоские, прижатые к субстрату, с валиком на краю, без вторичного роста и коремий. Конициальный слой меловой консистенции. Пигмеи- 15 тация конициального слоя кремового цвета, пигментация субстрата рыжеватая. диаметр 7-дневных колоний 10,1+0,08 мм диаметр поверхностных конидиоспор 3,22

0,0 1 мкм. 20

На агаризованной среде Чапека колонии круглые с размытыми краями. Конидиальный слой морщинистый, в центре.

Нижняя часть колонии имеет радиальную складчатость. Пигментация конидиального слоя от меловато-белой до пепельно-серой окраски. ,На среде сусло-агар образует плоские колонии круглой формы с валиком по краю и выпуклой средней частью. Нижняя часть колонии рыжеватая. Конидиал| ный слой бело-кремового цвета.

В глубинных условиях в питательной среде, содержащей сахар или молочную cbIворотку 1,0%, NQNOg 0,9%; МР50< 0,075 4|>

КН РОд 0,225 .4, СаС 1,25", конидиоспоры прорастают одн или двумя ростковыми трубками. Основная масса спор прорастает через 12 час. В течение 36-48 час интенсивно развивается мицелий, отщепляются гонидии, и вторич46 б но прорастают. Одновременно на мицелии формируются конидиеносцы бутылевидной формы с расширенным основанием.

Конидиоспоры расположе|п-| на конидиеHocIMx базипетально на коротких стеригмах. Завершение спорообразования и лизис мицелия наступает через 62 час. диаметр глубинных конидиоспор 3-5 мкм.

Физиологические признаки

Отношение к углеводам. Хорошо усваивает сахарозу, глюкозу, лактоэу, мальтозу, арабинозу, рамноэу, фоуктоэу. Крахмал интенсивно гидролиэует. Слабо раз— вивается на ксилозе. Не усваивает целлюлозу.

Отношение к источникам азота. Хорошо усваив|ет альбумин, казеич. Интенсивно развивается на пептоне. Свободные аминокислоты стимулируют конидиеобразование в концентрации 15 мг в среде. При концентрации от 20 до

50 мг 4 конидиеобраэование нарушается, образуются гонидии и бластоспоры. Хорошо усваивает аммонийный азот и нитраты.

Отношение к органическим кислотам.

Усваивает пировиноградную, уксусную, щавелеву î Kl с лоты. Не усваивает янтарную кислоту.

Отношение к спиртам. Усваивает маннит, дульцит, сорбит, глицерин. Слабо развивается на ксилите. Не усваивает этанол, изопропанол, н-бутанол.

Оптимальная температура культивио рования 25-27 C. Интенсивность аэрации 0,5-1,0 r 0й/л/час.

Источники информациии принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР

N 507645, кл. С 12 К 1/06, 1975 (прототип).

Соста витель М. дранишников

Редактор N. Poroaa Техред M. Кузьма Корректор Т, Скворцова

:Заказ 1 913/25 Тираж 522 Подпчсное

П1-И1ИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Моски, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4