731362 - Способ количественного определения метионина

Способ количественного определения метионина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОП ИСАЙ ИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Со!оз Советекмк

Социалистическин

Республик

„„731362

- \, (61) Дополнительное к авт. с вид-ву (22) Заявлено 05.12.77 (21) 2557305/23-04 с присоединением заявки .% (23) Приоритет (5E ) М. Кл.

G 01 й.21/24

1ооударстоонный кокнтот по делан нзооретеннй н отнрьпнй

Опубликовано 30 04 80 Бюллетень Рй 16 . Дата опубликования описания 30.04.80 (53) УДК 543432 (088.8) (72) Автор изобретения

В. В. Петренко

Запорожский медицинский институт (7!) Заявитель (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

МЕТИОНИНА

Изобретение относится к аналитической хи мни, а именно, к способам количественного определения метионнна.

Известен способ количественного определения метионина путем обработки анализируемой пробы нингидрином в иэобутиловом спирте при нагревании с последующим спектрофотометрнрованием полученного раствора f1).

Недостатком способа является низкая избирательность определения. Определению ме!

О шают другие аминокислоты.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения метионина, заключающийся в последовательной !

5 обработке анализируемой пробы двузамешенным фосфатом калия, однозамешенным фосфатом калия, иодидом калия и избытком 0,1 н раствора иода, с последующим титрованием полученного расгвора 0,1 н раствором тиосульфата натрия в присутствии крахмала (2).

Недостатком способа является низкая чувствительность определения. Навеска препарата

0,3 r длительность проведения анализа 40 мин.

Цель изобретения, вЂ” повышение чувствительности и сокращение времени определения.

Поставленная цель достигается способом количественного определения метионина,заключающимся в обработке анализируемой аллоксангидратом при нагревании на кипящей водяной бане в среде днметилформамида с последующим спектрофотометрированием полученного окрашенного раствора.

П р и м .е р 1. Определение удельного показателя поглощения продукта реакции метионии- аллоксангндрат.

Точную навеску препарата (0,0200 г) растворяют в 4 вЂ” 5 мл воды количественно диметилформамидом, переносят в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки этим же растворителем. Из разведения берут 0,5 мл,,1,0 мл...

4,0 и 4,5 мл раствора, помешают в пробирки, добавляют 2 мл 1 -ного раствора аллоксантидрата в диметилформамиде. Реакционную смесь нагревают на кипящей водяной бане 0,5 вЂ” 1 мин, охлаждают, переносят в мерную колбу на 25 мл, доводят диметилформамидом до метки и спектрофотометрируют при Хмакс =- 524 нм, Подчи731362

Таблица !

Оптическая плотность, Лмакс, нм

Объем

0,02 -ног раствора, мл

Концентрация метионина, мг/100 мл

0,4

0,5

0,184 х = 460,00

S = 4,4898

1,0

0,8

0,370

0,552

1,5

2,0

1,6

0,730

S„=0,0098

S =+)0,37

x+S =460+10,37

2,5

2,0

0,920

3,0

2,4

1,107

3,5

2,8

1,312.4,0

1,450

3,6. 4,5

1,590

„D.50 25

1- 1ф

1см

30 где 0

Е ,1 о/

1см

Таблица 2 ские х =100,56

1,135

100,13

101,90

100,75

0,0154

8=9,9842

1,155

0 0154

$„=0,0098

1,142

0,0154

99,70

8 =+2,41

1,130 х+$ =100,56+2,41 х =10056

1,) 50

101,46

100,13

1,1 35

50, ияемость продукта реакции основному закону светопоглощения наблюдается в пределах концентраций метионина 0,4 вЂ” 3,2 мг/100 мл.

П р и. м е р 2. Количественное определение метионина в препарате. Точную навеску (00154 г) препарата растворяют при нагревании на кипящей водяной бане в смеси 4 вЂ” 5 мл воды и 2 вЂ” 3 мл диметилформамнда s мерной колбе на 50 мл. После растворения метионина раствор охлаждают и доводят диметилформа мидом до метки. Из разведения берут 2 мл, прибавляют 2 мл 1%-ного раствора аллоксангидрата и затем поступают как в примере 1.

Расчет процентного содержания метионнна проводят по формуле,.

Данные удельного поглощения продукта реакции метионян-аллоксангидрата приведены в табл. 1.

Удельное Метрологические поглощение характеристики

Е 1о/о лсм

460,00

462,50

460,00

456,25

460,00

460,12

468,51

453,12

441,66 оптическая плотность при Matc.=

= 524 нм; удельный показатель поглощения при Х M Ä, = 524 нм; толщина слоя, см; навеска препарата, r °

Результаты количественного определения метионина в препарате приведены в табл. 2.

731362

Продолжение табл. 2

0,0154

1,142

100,76

$=0,9,61

1,127

99,43

Sã 0,0091

1,154

10 1,81

S =+2,24

0,0154

1,149

1,125

101,37

99,26 х+$ =100,56+2,24 х=100,55

1,133

99,96

$=0,9264

1,140

$„=0,0092

1,137

s,=+г,г7

1,153 х+$ =100,55+2,27

0,0154

1,150

Пример 3. Количественное определь Расчет граммового содержания метнонина ние метионина в таблетках 0,25 г покрытых >5 в пересчете на средний вес таблетки проводят оболочкой. по формуле

Точную навеску тщательно измельченной таблеточной массы (0,0121 r) помещают в мер- Э.60 Z 5 О,ам ную колбу на 50 мл и растворяют в смеси о, 4 вЂ” 5 мл воды и 3 вЂ” 5 мл диметилформамида ° Е„,„о амоо при нагревании на кипящей водяной бане.

После растворения и охлаждения, раствор дово. дят диметилформамидом до метки. Иэ разведения берут 2 мл и поступают как в примере 1.

Таблица 3 где 0,386 вЂ” средний вес таблетки, r.

Результатьг количественного определения метионина в таблетках по 0,25 г приведены

35 в табл. 3.

Время нагревания, с н

0,589 i

x=0,2515

0,2553

0,0121

S=0,0041

0,580

$„0,0163

S =0,0101

x+S =0,2515+0,0101

0,585

0,568

0,0121

0,570

0,590 х=0,2551

0,600 50

0,2527

$=0.0042

0,583

0,0154

0,0121

100,58

100,31

101,73

101,46

0,2514

0,2536

0,2462

0,2470

0,2557

0,2600

731362

Продолжение табл, 3

$ =0,0161

St =+0,0103

x+St=0,255 !+0,0! 03

0,2505

0,578

0.2600

0,600

0,2514

0,2557

0,580

0,590

0,2557 х ),25! 2

0,0121

0,587

S =0,0!95

0,562

S =-+0,0! 20

0,575 х+5 =0,2512+0,0120

0,573

0590

Формула изобретения

Составитель JI.Ñîëîìåèrxeârr

Редактор А. Долинич Техред Н,Бабурка 1Оор рек тор Г. (K Bop(!ова

Заказ 1497/2? Тираж 1019 Подписное

ПНИИПИ Государственного комитета, СССР по делам изобретений и открытий !

13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филин ПП!1 "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная. 4

0,0121

0,0! 21

0,0121

Предлагаемый способ позволяет увеличить чувствительность определения в 2 раза и сократить время анализа до 7 вЂ” 8 мин.

Способ количественного определения метионина путем обработки анализируемой пробы химическим реагентом, о т л и ч а ю щ и Й- M с я тем, что, с целью повышения чувствительности и сокращения времени определения, в

0.2544

0,2436

0,2492

0,2484

0,2557 качестве химического nearента используют аллоксангидрат и обработку проводят в среде диметилформамида при на ревании на кипящей водяной бане с последующим спектрофотометрированием полученного окрашенного раствора и Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Коренман И. М. Фотометрнческий анаУ л лиз. Методы органической химии. М., Химия, !

970, с. 167.

2. Государственная фармакопея СССР, Х, 1968, с. 420 (прототип !

Способ количественного определения метионина

Патент 731362