Питательная среда для хранения чистых культур-продуцентов целлюлаз
Патент 732383
Авторы
Питательная среда для хранения чистых культур-продуцентов целлюлаз
Иллюстрации
Реферат
Союз Соеетскик
Социалистических
Республик
ОП ИКАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
< 732383 (61) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 11.10.77 (2l ) 2534492/28-1 (5l)M. Кл.
С 12 13/10
С 12 К 1/06 с присоединением заявки РЙ
Гоеударотовннмй комитет
СССР (23) Приоритет до делам изобретений и открытий
Опубликовано 05.05.80. Бюллетень J% 17
Дата опубликования описания 06.05.80 (53 ) УД К 577. 1 5. .07 (088.8) (72) Авторы изобретения
М. С. Ваганова и Г. В. Щусь
Всесоюзный научно-исследовательский биотехнический институт (7!) Заявитель (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ХРАНЕНИЯ
ЧИСТЫХ КУЛЬТУР-ПРСДУЦЕНТОВ .ЦЕЛЛЮЛАЗ
0,15
0„15
Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано для хранения на твердой питательной среде чистых культур — .продуцентов целлюлаэ. например Тг1сЪодегто, 5 ,уЬчде,Тисттодегтс т,(оъомнм и а,о
Наиболее близкой по технической сущ-. ности к предлагаемому является питательная среда для хранения чистых культурпродуцентов целлюлаз, предпочтительно
4икроорганизмов рода Тг с обегто, Г11
f0 одержащая, %:
10%-ный отвар отрубей
Фильтровальная бумагь
Натрий азотнокислый
A ммоний сернокислый
Калий фосфорнокислый трехзамещенный 0,10
Магний сернокислый 0,05
А rap-агар- 2
Вода Остальное
Недостатком изгестной питательной среди ямяется t;), что культуры из рода
Тт jckodeema на ней плохо спорулируют и в недостаточной степени сохраняют наследственные признаки.
Цель изобретения — увеличение срока хранения культур и стабилизация активности продуцентов.
Поставленная цель достигается тем, что в состав среды дополнительно вводят ферментированный картофель, аммоний виннокислый средний, калий сернокислый, калий фосфорнокислый однозамещенньтй при следующем соотношении ингредиентов, вес.%;
Ферментированный картофель 10-70
А ммоний виннокислый сред пий 2-1 5
Калий фосфорнокислый однозамещенный 2-4
Калий сернокислый 0,1-0,4
Магний сернокислый 0,1-0,4
Агар-агар 2-3
Вода Остальноо
Для выращивания родуцентов целлюлаз готовят питательную среду. Средние клубни картофеля тщательно от32383 4 натрий азотнокислый 0,15, аммоний сернокислый 0,15, калий фосфорнокислый трехзамещенный 0,1, магний сернокислый 0,05, агар-агар 2 и объем смеси дОВОдят ВОдОй дО 1 00 мле
Среду после расплавления агара разливают в микробиологические пробирки и стерилизуют при 1 атм 1 ч.
Пример 2. 100 г неочищенно-! о го картофеля тщательно отмывают от почвы и измельчают до величины частиц 0,5-1,0 мм. К пульпе добавляют
0,2 r кальция углекислого и ферментного препарата амилосубтилин с актив1 ностью 150 ед/г АС. Ферментолиз проо водят при 70 С до неокрашиваемых иодом декстринов.
К 50 мл ферментированного картофеля добавляют, г:аммоний виннокислый
Ю средний 6,4, калий фосфорнокислый однозамещенный 2, калий сернокислый 0,2, магний сернокислый 0,3 агар-агар 2, воду до 100 мл. Среду прогревают в водяной бане до расплавления агара, разливают в микробиологические пробирки по 10 мл и стерилизуют в вертикальном положении при 1 атм 1 ч. После этого охаждают в наклонном положении о ! угол наклона 15 .
30 После охлаждения среду выдерживают в термостате при 30 С 3 сут для проо верки на стерильность, а затем засевают культурой продуцента. п Ь апМй
Роулен-Тома
Известная
7,20
Нет роста
8,10
8,35
8,05
6,80
10,52
Ч апека-Докса
2,28
3,56
7,34
6,93
Сусло-агар овая
9,67
Предлагае мая
3 7 мывают От почвы и измельчают до Величины частиц 0,5-.1,,0 мм. К картофельной пульпе добавляют углекислый кальций и ферментный препарат амилазы с активностью 150 ед/г AC. Ферментоо лиз проводят при 7,0 С до неокрашиваемых иодом декстрйнов.
Далее готовят питательную среду, предназначенную для хранения продуценТОВ, состава%:
Ферментированный картофель 10-70
А ммоний виннокислый средний 2-1 5 . Калий фосфорнокислый однозамещенный 2-4
А ммоний виннокислый средний 2-15
Калий сернокислый. 0,1-0,4
Магний сернокислый О, 1-0,4
А гар-агар 2-3
Вода Остальное
Горячую среду разливают в микробиологические пробирки — по 10-15 мл и стерилизируют в вертикальном положении при 1 атм 1 ч, .после этого охлаждают в наклонном положении, угол наклона
После охлаждения среду выдерживают в термостате при 30-35 С 3 cyr для проверки на стерильность, а затем засевают культурой продуцента.
Пример 1- (контроль). 10 r пшеничных отрубей заливают 100 мл водопроводной воды и отваривают в автоклаве при 1 атм 1 ч, Охлаждают и фильтруют. Полученный фильтрат. используют для приготовления питательной среды.
Фильтровальную бумагу измельчают на кофейной мельнице 2 ин.
К 50 мл фильтрата добавляют, г: измельченную фильтровальную бумагу 1, В течение 24 мес хранения на предла- гаемой среде все испытанные культуры у Таким Образом, при выращивании культур — продуцентов целлюлаз на предлагаемой питательной среде в 2-3 раза возрастает урожай спор и увеличивается их целлюлазная активность по С
4о ферменту. Ыеллюлазная активность культур, хранящихся на разных питательных средах представлена в таблице. сохраняли свою прод,ктивн.к.ть по (, к, менту, тогда как мутант.ц lp Ull альп.l
732383
Т> с одег па чм Ые при хранении их на других средах теряли способность синтезировать целлюлазу в 1,5-2 раза.
Формула изобретения
Питательная .среда дляхранения чистых кульгур-продуцентов целлюлаз, предпочтительно микроорганизмов рода о
Tvicboder mq,содержащая агар-агар и магнитный сернокислый, о т л и ч а ю— щ а я с я тем, что, с целью увеличения срока хранения культур и стабилизации активности продуцентов; в состав среды дополнительно вводят ферментированный картофель, аммоний виннокислый средний, калий сернокислый, калий фосфорнокислый однозамешепный при следующем с6отношении ингредиентов, вес.%:
Ферментированный картофель 10-70
А ммоний виннокислый средний 2-15
Калий фосфорнокислый однозамещенный 2-4
Калий сернокислый О, 1-0,4
Магний сернокислый 0,1-0,4
Агар-агар 2-3
Вода Остальное
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
l. Авторское свидетельство СССР
А 368303> кл. С 12 )3 13/10, 1969.
Составитель Н. Паников
Редактор М. Недолуженко Техред С. Мигай Корректор M. Демчик
Заказ 1543/7 Тираж 522 Подписное
11НИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал Ш1П Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4