Способ устранения антикомплементарных свойств агарового геля

Способ устранения антикомплементарных свойств агарового геля

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союэ Советски н

Социалистических

Республик „737449 (6I ) Дополнительное к авт. свил-ву (22} Заявлено 18.07.78 (21) 2684685/28-13 (5! }М. Кл.

С 12 К 1/00 с присоединением заявки ¹

Гюсударстввнный комнтет (2 ) ) Приоритет

Опубликовано 30.05.80. Бюллетень №20

Дата опубликования описания 03,06.80

00 делам навбретеннй н втйрытнй (53) УДК 668,393, .5 1(088,8) А. Н.. Шарецкий, Б. В. Дубовик, В . С. Этлис и Ф. Н. Шомина (72) Авторы изобретения (73 ) Заявитель (54) СПОСОБ УСТРАНЕНИЯ АНТИКОМПЛЕМЕНТАРНЫХ

СВОЙСТВ АГАРОВ ОГО ГЕЛЯ-.Изобретение относится к методам медико-биологических исследований, а именно к использованию химического реагента для инактивации препаратов агара, предназначенных для гелеобра5 зующих сред, и может применяться в практике экспериментальной и клинической иммунологии при проведении реакций иммунного гемолиза в агаровом геле, лежащих в основе различных имму- 1О нологических методов исследований.

Известен способ устранения антикомплементарных свойств агарового геля путем добавления к раствору геля химического реагента (1) .

Однако известный способ является сложным по технологии и предусматривает использование дорогостоящих импортных реактивов.

Цель изобретения — упрощение способа.20

Эта цель достигается тем, что в качестве химического реагента исполь1 зуют поли-(N, N -диэтилпиперидиний хлорид-3,5-диметиленсульфонил) и добаврвот его в концентрации 0,1-3 мг на

1 мл 1%-ного геля.

Пример 1. Для выявления анти-, тел к эритроцитам барана проводят реакшпо радиального иммунного гемоли за в геле, приготовленном из коммерческих препаратов erapa: бактагаров

Ж1=o " и "FGTс 1с" и отечественного неочишенйого агар-агара. К горячим

2%-ным водным растворам агара добавляют равные объемы раствора Хенкса

2-кратной концентрации, содержащего полиаминсульфон в количестве О, 1- 3 мг на 1 мл конечного 1%-ного геля. После внесения эригроцитов раствор агара заливают на предметные стекла и в круглые лчнки диаметром 3 мм, проделанные в застывшем геле, вносят стандартную гемолитическую сыворотку. Пластинки о с гелем выдерживают при 4 С в течение суток (для диффузии антител), затем их заливают комплементом и на 1 ч помещают в термостат при 37 С. Прозрачные о зоны гемолиза наибольшего диаметра

3 737449 до 1,5 см) в пластинках геля, приго- )вь тавпенных на основе агара "Васо" или .«Ге огас», образуются при использовании к полиаминсульфона в концентрациях О, 1- р

1 мг/мл среды. В агар-агаре аналогичные к зоны гемолиза появляются щт содержа- г нии цолиаминсульфона в среде в концентра- и ции около- 1 мг/мл. ва

В контрольных пластинках агара, не содержащих поликатион, зоны иммунного гемолиза не выявляк гся.

Пример 2. В селезенках мышей

СВА, иммунизированных эритроцитами барана, определяют количество" антителообразующих клеток по Ерне.

K 2% ному водному раствору агара добавляют равный объем раствора Хеикса

2- кратной концентрации, содержащий полиаминсульфон из расчета 0,1-1 мг на 1 мл конечного, 1%-ного геля. В агар вносят (при 45 С) суспензию спленоцитов„эритроцитов барана, и смесь разливают в чашки Петри. Чашки помещают в термостат при 37 С на 60 мин, затем заливают.раствором комплемента и

Мжубируют в течение 1 ч. В пластинках геля, содержащего антителообразующие клетки, в присутствии поликатиона в концентрациях от 0,1 до 1 мг на 1 мл ф ивляются отчетливо видимые эоны точечного гемолиза (бляшки), число оторых хорошо воспроизводится в пааллельных опытах. В контрольных чашах, не содержащих полиаминсульфон, емолитические бляшки трудноразличимы, х число значительно меньше и сильно рьирует даже при большом избытке комплемента.

Изобретение позволяет упростить способ эа счет замены дорогостоящего импортного реактива отечественными

1s Формула изобретения

Способ устранения антикомплементарных свойств агарового геля путем добавления к раствору геля химического

2о реагента, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве хймического реагента используют поли-(N, N -диэтилпиперидиний хлоридI

-3,5-диметиленсульфонил) и добавляют

25 его в концентрации 0,1-3 мг на 1 мл

1%-ного геля.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. . "ТгапьрГсв МИои яем юя ", зо 1974,, 18, р. 130-191.

Составитель С. Малютина

Редактор Н. Хубларова Техред М. Петко Корректор Г. Назарова

Заказ 2603/8 Тираж 522 Подписное

БНИИНИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент«, г. Ужгород, уп. Проектная, 4