Патент 738398

Питательная среда для выращиваниячумного микроба

 

Союз Соеетскнк

Соцналистическии

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДВТИЛЬСТВУ

<« 738398 (61) Дополнительное к-ает. свид-ву (22) Заявлено 150278 (2t) 2579512/28-13 с присоединением заявки Nо (23) Приоритет

Опубликовано 0706.81. Бюллетень Й9 21

Дата опубликования описания 07.06.81 (51)W Кпз

С 12 К 1/06

Государственный комитет

СССР оо дедам изобретений и открытий (53) YgP(576. 8.093. .1(088.8) (72) Авторы изобретения

В.Л.Пустовалов, B.H.Òàðàíoâà, Л.В.Попкова, Г.И.Васильева и В.К.Трухачева (7 т ) Заявитель

Ростовский-на-Дону государственный научно-исследовательский противочумный институт (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ЧУМНОГО

МИКРОБА

0,5-0,7

4,0-6,0

0,5-0,7

0,001-0,003

0,005-0,02

Маннит

ИаС1

MgSO4 7Н20

Mn5O4 5Н О

Ге504 7Н20

17, 0-18, 0

700,0-800,0

Агар-агар

Гидролизат казеина

Бульон Хоттингера

Дрожжевой экстракт

200,0-300,0

2,0-4,0

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии.

Известна питательная среда для выращивания чумного микроба, содержа щая агар-агар, гидролиэат каэеина, стимулятор роста углевод, минеральные соли и воду 1 11.

Однако известная среда не обеспечивает высокого выхода биомассы, содержащей F1-, V- u M-антигены.

Целью изобретения является повышение выхода биомассы, содержащей

Fl-, V- и 14-антигены.

Это достигается тем, что среда дополнительно содержит бульон Хоттингера, в качестве стимулятора роста она содержит дрожжевой экстракт, в качестве углевода — маннит, в качестве минеральных солей — ИаС1, 9504.- 7Н20 MnSO< 5H20 FeSO< 7НР при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды:

Пример. Для приготовления среды казеин желтый или белый в количестве 400 г замачивают в 2200 мл дистиллированной воды в течение 2 суток на холоду, гидролизуют 19%-ной серной кислотой в течение 22 ч при медленном кипячении. Затем гидролизат нейтрализуют сухим ВаСО-3 до рН 4, 7 и осветляют 1% активированного угля. Полученный гидролизат с аминным азотом 600-800 ге разводят до величины аминного азота 150 мгЪ.

Основной раствор Хоттингера, приготовленный по общеизвестной методике, разводят так, чтобы содержание аминного азота также составляло 150 мгЪ.

Смешивают 700-800 r гидролиэата казенка и 200-300 г бульона Хоттинге- . ра, добавляют 2-4 г дрожжевого экстракта, 0,5-0,7 г маннита, 4-6 г хлористого натрия, 0,5-0, 7 r семиводного сернокислого магния, 0,005-0,02 г семиводного сернокислого железа и

0,001-0,003 г пятиводного сарнокис738398

17,0-18,0

700, 0-800,, 0

200,0-300„0

Агар-агар

Гидролизат ка" зеина

Бульон Хоттингера

Дрожжевой экстрак т

Мании т йаС i

И 504, 7Н.О

Ип Sos ° 5ну 0

FeSQg ° 7H 0

2,0-4,0

0,5-0,7

4,0-6,0

0,5-0,7

0,001-0,003

0,005-0,02

Составитель E.Äóáoâèöêàÿ

Техреду. Вабинец Корректор Н.Швыдкая

Редактор Л.Павлова

Заказ 3395/53 Тираж 528 Подписное

ВКИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Б-35„ Раушская иаб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", г. ужгород, ул. Проектная, 4 лого марганца. Доводят рН раствора до 7,6-7,8 с помощью 10%-ного ИаОН, вносят агар-агар и расплавляют .в антоклаве при 110 С. После расплавления рН среды составляет 7,1-7,2.

Горячую агаровую среду разливают в чашки Петри или матрицы и стерилизуют в автоклане в течение часа при

110 С.

Выход бактериальной массы эталон ного штамма J.pestis ЕЧ НИИЭГ составляет 5,6-6,5 млрд. микробных клеток с 1 мл среды при посевной дозе

20 млн. микробных клеток на 1 мл средыe

Полученная бактериальная масса

h обладает полноценным антигенным составом, показывая при реакции преципитации .21-22 зоны преципитации.

При культивиронании на среде при

37"С хорошо синтезируются Fl-, Ч- и

Ы-антигены, а также "и гшинный" токсин, обладающий высокой степенью токсичности.

Использование изобретения позволит получить биомассу чумного микроба, содержащую определенный набор антигенов, необходимых для создания вакцин.

Формула изобретения

Питательная среда для выращивания чумного микроба, содержащая агарагар„ гидролизат казеина, стимулятор роста, углевод, минеральные соли и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения выхода биомассы, содержащей FI-, Ч- и Ч-антигены„ среда дополнительно содержит бульон Хоттингера, в качестве стимулятора роста она содержит дрожжевой экстракт, в качестве угленода— манннт, н качестве минеральных солей - Ма01, Н9504 ° 7Н20, НпЬО 5Ну0, FeS04 7Н О нри следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды

Источники информации, принятые но внимание при экспертизе

1. Профилактика особо опасных инфекций. Вып. 1, Саратов, 1976, с, 113 115,