Питательная среда для идентификации

Питательная среда для идентификации

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ еь ПАе ЕНОТУ

Союз Советских

Сотеиалистических

Республик ()241805 (61) Дополнительный к патенту (22) ЗаявлЕно 28.03.77 (21) 2464948/28-13 (23) Приоритет — (32) 03,05 76 (31) 682651 . (331 США (51) М. Кл.

С 12 К 1/06

Гюаударственный камнтет

СССР не делам нэобретеннй и еткрытнй

Опубликовано 15.06.80. Бюллетень № 22

Дата опубликования описания 15.06.80 (53) УДК 576,8. .093.1 (088.8) (72) Авторы изобретения

Иностранцы

Джеймс Вэйн Лэнхэм, Грегори Дуглас Родгерс и Майкл Чарльз Мейер (США) Иностранная фирма

"Макдоннел Дуглас Корпорейшн" (США) (71) Заявитель (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ

ESCHERiCHIA COli

1 2

0 75 — 1,25

0 05 — 1,5

Салоник п-Кумаровая кислота

Дигидробензойная кислота

Желчные соли

Анилиновый голубой

Вода

0,05 — 1,5

1,5 — 4,5

15 — 35 (мл)

Остальное °

Изобретение относится к области микробттологии и может быть использовано для идентификации микроорганизмов.

Известна питательная среда для идентификации Escherichia coil, содержащая питательную основу, лактозу, индикатор, ингибитор грамположительной микрофлоры и воду (1).

Однако известная среда не обеспечивает быстрой идентификации Escherichia col i.

Целью изобретения является ускорение

:идентификации Escher ichia col i.

Эта цель достигается тем, что среда дополнительно содержит арабинозу, п-кумаровую кислоту, дигидроксибензойную кислоту, сапонин, экстракт, в качестве питательной основы она содержит гелизат, в качестве индикатора— анилиновый голубой, а в качестве ингибитора грам-положительной микрофлоры — желчные соли при следующем соотношении компонентов, г/л: 20

Гелизат 5,0 — 6,0

Лактоза 4,0 — 6,0

Арабиноза 4,0 — 6,0

Дрожжевой экстракт 0,75 — 1,25

Предлагаемая среда содержит источники сахара, которые избирательно ферментируются бактериями с образованием кислот, и также содержит чувствительный к рН индикатор анилиновый голубой, цвет которого переходит в голубой в кислой среде. Среда также содержит ингибиторы для друтих грам-отрицательных организмов, главным образом К1еЬз 1е11а. Комбиюция ингибиторов содержит кумаринавую кислоту, 3,4-дигидроксибензойную кислоту и салоник.

Эта комбинация ингибирует Klebsiella u позволяет расти Escherichie со1i, Среда содержит также поверхностно-активные вещества и ингибиторы для грам-положительных организмов.

005 — 1,5

1,5 — 4,5

15 — 35 (мл)

Остальное .

ЦНИИПИ Заказ 3247/57 Тираж 522 Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 74

Для предлагаемой среды применяют также источники питательных веществ, способствую,ugn росту Escherichia col i, биологический индикатор рН, реагирующий на кислоту, образуемую Е.col i, и комбинацию и-кумаровой кислоты, саионина и 3,4-дигидроксибензойной кислоты для ингибировання роста К!ebsiella, а также другие ингибиторы для ингибирования роста грам-положительных микроорганизмов.

Большинство штаммов Е.col i ферментируют лактозу с образованием кислоты, а-арабинозу применяют в детектирующих средах.

Подходящим заменителем гелизата является триптикаэа, финтон и полипептон.

Смеси желчных солей применяют для ингибирования роста rpaM-положительных организмов. Эти смеси содержат экстрактивные вещества желчи и являются смесью поверхностно-активных веществ, ингибирующих грам-положительные организмы. Другим подходящим поверхностно-активным веществом является таурохолевая кислота.

Комбинация 3,4-дигидроксибензойной кислоты, сапонина и п-кумаровой кислоты применяют для ингибированйя роста K I ebs ie l la u других подобных E.coli организмов. Может применяться о- и м-кумаровая кислоты.

Предпочтительным индикатором для среды является анилиновый голубой.

В качестве источника витаминов добавляют дрожжевой или другой подходящий биологический экстракт в количестве 0,95-1 05 г/л.

Перед применением среды ее рН должно быть 7,5.

Среду приготавливают следуиицим образом.

Смешивают 0,2 r п-кумаровой кислоты, 0,2 г 3,4-дигидроксибензойной кислоты с 3 мл

1 н. NaOH/100 мл среды и 1/4 требуемого объема дистиллированной воды и получают

100 мл среды двойнойкрепости.i Эту смесь нагревают до растворения всех твердых веществ. Раствор доводят до 95 мл дистиллированной водой и к нему добавляют 1,0 г гелизата, 1,0 г лактозы, 1,0 r 1-арабинозы, 0,6 r смеси желчных солей и 0,2 r дрожжевого экстракта. рН устанавливают 6,2 и добавляют

5 мл индикатора — восстановленного анилинового голубого с 0,2 г сапонина. Проверяют рН и доводят до 7,2 добавлением основания.

Раствор стерилизуют фильтрованием, помещают в стерильную емкость и метят.

l 805 4

Питательную среду применяют следующим образом.

Среду загружают в углубления карточек для анализа мочи, сушат при температуре ниже о

0 С и карточки покрывают для защиты среды.

Углубления заполняют средой наполовину их объема. Затем, когда остающийся объем утлуб- лений заполняют образцом мочи, то среда снова гидратируется до нормальной однократной

10 концентрации крепости, при которой и работает.

Эта среда может обнаруживать концентрации E;coli в 10 клеток/мл за 12 ч, Более долгое время требуется при более низких концентра15

Предлагаемая среда ускоряет идентификацию

Escherichia coli.

Формула изобретения

Питательная среда для идентификации Esche* richia coli, содержащая питательную основу, лактозу, индикатор, ингибитор грам-положительной микрофлоры-и воду, о т л и M а ю щ а .

25 я C я тем, что, C целью ускорения идеитифи кации Escherichia col i, она дополнительно содержит арабинозу, п-кумаровую кислоту, дигидроксибензойную кислоту, сапонин, дрожжевой экстракт, в качестве питательной основы- она содержит гелизат, в качестве индикатора— анилиновый голубой, а в качестве ингибитора грам-положительной микрофлоры — желчные соли при следующем соотношении компонентов, г/л:

Гелизат 5,0 — 6,0

Лактоза 4,0 — 6,0

Арабиноза 4,0 — 6,0

Дрожжевой экстракт 0,75 — 1,25

С алонии 0 75 — 1,25 п-Кумаровая кислота 0.05 — 1,5

Дигидроксибензойная кислота

Желчные соли

Анилиновый голубой

Вода

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования.

Под ред. М. О. Биргера. М., "Медицина", 1973, 50 с. 58.