Способ диагностирования зимостойкости генотипов яблони

Способ диагностирования зимостойкости генотипов яблони

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

(ii> 741828

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Рес убп (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 21.08.78(21) 2659735/30-15 с присоединением заявки М (23) Приоритет—

Опублнкованв25.06.80. Бюллетень М23

Дата опубликования описания 28.06.80 (51) М. Кл.

А 01 Н 1/00

Гееударстеанв|М каиитет

СССР йе демам изабретеиий и открытий (53) УДК 631 52 (088. 8) Г. M. Иванченко (72) Автор изобретения (7l) Заявитель

Приморская краевая плодово-ягодная опытная станция (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИРОВАНИЯ ЗИМОСТОЙКОСТИ

ПЕНОТИПОВ ЯБЛОНИ

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к селекции плодовых культур на зимостойкость.

Известен способ диагностирования генотинов яблони, при котором уровень зимостойкости сортообразца определяется реакцией фенотипа на резкие суточные колебания температуры по характеру изменения суммарного содержания крахмала во всех тканях однолетнего прироста (11.

По такому способу .оценка зимостойкости сортообразца проводится в течение одного зимнего периода, но требуется обязательное искусственное воздействие переменными температурами и, следовательно, наличие термокамеры, а определение крахмала производится визуально, что не исключает субъективных ошибок, снижающих достоверность результата.

Известен также способ определения зимостойкости сортов яблони по состоянию рибонуклеиновой кислоты (PHK). У зимостойких сортов отмечается более

2 высокое содержание связанной с белком

PHK в зимний период (2).

Однако этот способ требует повторения анализов в течение двух-трех лет и не всегда является четким тестом зимостойкости генотипа.

1(ель изобретения — ускорение окончательной опенки зимостойкости сортообразцов и повышение достоверности результатов

Это достигается тем, что на протяжении годичного цикла роста и развития определяют реакцию фенотипа на естесг.венные суточные колебания температуры среды по связи между соотношением сво35 бодной и связанной форм рибонуклеиновой кислоты в коре однолетнего прироста и средней величиной суточной амплитуды температуры воздуха, накануне и в день анализа, а зимостойкость генотипов оцеЮ кивают по величине коэффициента корреляции.

Способ осуществляют следующим образом.

74182

Содержание и формы (свободная и свя. занная) PHK определяют ежемесячно в коре однолетних приростов гистофотометрическим методом на постоянных препаратах. Отрезки средней части однолетних приростов фиксируют смесью Карнуа.

Препараты окрашивают пиронином )1(, Ин тенсивность окраски оценивают на микрофотометре, например, типа МФ-4, Содержание PHK выражают в единицах опти10 ческой плотности. Свободную форму РНК определяют без предварительной обработки препаратов. Связанную форму PHK определяют путем обработки препаратов

15 перед покраской безводным уксусным ангидридом. Контрольные препараты обрабатывают рибонуклеазой. По результатам анализов высчитывают соотношение между формами PHK (свободная PHK: связанная PHK).

Затем рассчитывают среднюю амплитуду суточного колебания температуры эа два дня (эа день, предшествующий отбору, и день отбора проб). При переходе к отрицательным температурам ипи при колебаниях от положительных к отрицательным температурам и обратно знак при суточной амплитуде устанавливают по знаку среднесуточной температуры.

Далее вычисляют коэффициент корреляции между соотношением форм PHK u величиной амплитуды колебания температуры воздуха за год.

Величина корреляции является тестом

35 зимостойкости генотипов. У зимостойких сортов коэффициент корреляции лежит в пределах 0,00-0,50, у среднестойких в пределах 0,50-0,70, у незимостойких в пределах 0,70-1,00.

Пример . Из трех сортов яблони с заведомо известной, например для Приморского края, зимостойкостью (Амурское урожайное — зимостойкий, Джон доуни - среднезимостойкий, Боровинка—

45 незимостойкий) берут на анализ однолетние приросты.

Отрезки средней части однолетних приростов фиксируют смесью Карнуа и готовят постоянные препараты. Препараты окрашивают .пиронином Ж. -Для определения свободной формы РНК препараты окрашивают без предварительной обработ.ки. Связанную форму PHK определяют путем обработки препаратов перед покрас8 ф кой безводным уксусным ангидридом, контрольные препараты обрабатывают рибокуклеаэой, Интенсивность окраски препаратов оценивают на микрофотометре

МФ-4. Содержание РНК выражают в единицах оптическрй плотности. Для вычисления соотношения форм PHK оптическую плотность свободной формы PHK делят на оптическую плотность связанной формы

PHK. Результаты анализа форм PHK представлены в табл. 1, Таблица 1

Амурское урожайное 9,6

3,9 2,46

3,2 3,06

4,1 2,20

Джон-Доуни 9, 8

Боровинка 9,0

Среднюю амплитуду суточных колебаний температуры вычисляют следующим образом: 15.Х,1973 суточная амплитуда колебания температуры была равна 17,1 (от - 3,1 С до + 14,0 С), 16.Х.1973 суточная амплитуда колебания температуо ры была равна 7,9 (от + 2,8 С до

+ 10,7 С). Находят среднее арифметическое значение 1 7 1 + 7 9 = 1 5, 2

Знак при амплитуде устанавливается (+ 12,5).

Такие же. процедуры проделывают и в другие сроки. По полученным данным рассчитывают коэффициент корреляции между соотношением форм РНК и величиной амплитуды колебания температуры в соответствующие сроки -эа год.

В табл. 2 приведены данные корреляции между соотношением форм PHK и величиной суточной амплитуды температу» ры воздуха.

741828

Таблица 2

5. %II.-73

16.Х-,73

7,47 7,19

9,50

+7,8

+12,5

2,46 3,10 2,20

3,13 0,62

1,47 2,40

2,54 2,17

2,74 1,02

1,14 1,78

0,82 1,05

5,00 4,60

5,43 5,44

22.XI-.73 -1 7,5

1,17

5,86

7.XI1-73

28.ХП 73

28. I-.74

20. П-74

4. 1У-.74

1 2.У-,74

-14,9

-10,6

-11,3

-6,7

-10,0

+19,7

3,59

1,88

1,96

1,46

3,41

17.УХ-,74 +8, 1

16.УП-74 +8,9

2,08

11НИИПИ Заказ 3337/1 . Тираж 723 Подписное

Филиал IIIIll Патент», r. Ужгород, ул, Проектная, 4

Коэффициент корреляции для Амурско

ro урожайного, нежон-доуни и Боровинки составляет соответственно + 0,24, + 0,53, + 0,76.

Для диагностирования зимостойкости генотипов яблони по предлагаемому способу достаточно проанализировать кору однолетних приростов в течение одного годичного цикла. Данный способ исключает лабораторное промораживание, что снижает расходы по диагностике зимостойкости сорта, улавливает реакцию сорта на сравнительно небольшие колебания . температуры, что повышает точность диаг-О ностирования. Благодаря приготовлению постоянных препаратов обеспечивается равномерное- распределение объема рабо ты в течение года. Способ обладает высокой производительностью. Силами одно- го специалиста можно проанализировать до 20 сортообразцов.

Лля доведения предлагаемого способа до массового использования достаточно обеспечить соответствующие селекцион50 ные и лаборатории микрофотометрами и под готовить с пецивл иста.

Формула изобретения

Способ диагностирования эимостой55 кости генотипов яблони по состоянию ри

1,42 5,43 бонуклеиновой кислоты, включающий ежемесячное гистофотометрическое опреде ление содержания и форм рибонуклеиновой кислоты в коре однолетних приростов в годичном цикле роста и развития, о тличающийся тем,что,сцелью ускорения окончательной оценки зимостойкости сортообраэцов и повышения ее достоверности, определяют реакцию фенотипа на естественные суточные колебания температуры среды по связи между соотношением свободной и связанной форм рибонуклеиновой кислоты в коре однолетнего прироста и средней величиной суточной амплитуды температуры воздуха накануне и в день анализа, а зимостойкость генотипов оценивают по величине коэффициента корреляции.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР по заявке Ж 2536781/30-15, кл. А 01 Н 1/04, 18.10.77.

2. Леонченко B. Г. Изучение содержания и соотношения нуклеиновых кислот в связи с зимостойкостью. (Сборник

"Методика определения эимостойкости и морозостойкости плодовых и ягодных культур." Мичуринск, 1972 (прототип).