Штамм л-111рг блокирующий развитие насекомых

Штамм л-111рг блокирующий развитие насекомых

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

еоьанап жтвитко-технически бейли тена 1ЬА о И Е

ИЗОБРЕТЕН ИЯ (ii) $4$944

Союз Советск их

Социалистически к

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свнд-ву— (22) Заявлено 04.01.79 (21) 2733258/30-15 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (51) М. Кл.

С 12 К 1/02

Геоударстееиимй комитет

СССР

Опубликовано 07.07.80. Бюллетень №25, Дата опубликования описания 07;07.80 (53) УДК 63.576..8 (088.8) ю делам изобретений и открытий

А. Б. Левченко, И. И. Белоусова, И. М. Терешин, Е. М. Лучникова, А. И. Ибрагимов, С. Ю. Инге-Вечтомов и Б. В. Симаров (72) Авторы изобретения

Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт антибиотиков и ферментов медицинского назначения и Ленинградский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени Государственный университет им. А. А. Жданова (71) Заявитель (54) ШТАММ SACCHAROMYCES CEREVISIAE Л-Ш-РГ, БЛОКИРУЮЩИЙ РАЗВИТИЕ НАСЕКОМЫХ

15

1

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к разработке способов регулирования численности популляций насекомых-вредителей сельского хозяйства, использующих дрожжи в качестве основного источника питания.

Заявленный штамм хранится в коллекции культур Всесоюзного научно-исследовательского технологического института антибиотиков.и ферментов медицинского назначения под номером Л-Ш-РГ, он селекционирован на основе исходного штамма Saccharomyces cerevisiae 2-П712 из Петергофской коллекции генетических линий дрожжей профессора С. Ю. Инге-Вечтомова. Он имеет блок в цепи биосинтеза эргостерола, что приводит к накоплению анормальных стеролов в клетке.

Использование дрозофилой данного штамма в качестве источника питания насекомых вызывает блокирование метаморфоза личинок и стерилизацию самок дрозофилы.

Морфолого-культуральные признаки.

Штамм Л-Ш-РГ имеет все свойства, характеризующие гетероталличные штаммы вида Saccharomyces cerevisiae.

Клетки штамма имеют размер от 3 до

30 мкм в длину и от 3 до 10 мкм в поперечнике. На полных дрожжевых средах образуются белые гладкие колонии. Шламм

Л-Ш-РГ хорошо скрещивается с исходными штаммами.

Среда с пептоном и дрожжевыми автолизатом (ДАП) .

На агаризованном варианте среды штамм образует белые гладкие круглые колонии. В жидкой среде рост обильный, цвет биомассы белый.

Минимальная дрожжевая среда (М).

Требует для роста добавок гистидина, аденина, лизина. В остальном ростовые свойства аналогичны среде ДАП.

Среда для споруляции.

Со штаммом противоположного типа спаривания (а) образует стабильную диплоидную форму, которая при переносе на среду для споруляции образует четырехспоровые аски (гаплоидные потомки). Средняя фертильность гибридов 90%.

Физиологические признаки.

Генотип штамма Л-Ш-РГ а His 7 ade

2-163 lyg 2-А12, nysr 1-1. Устойчив к поли745944 еновым антибиотикам: нистатину, леворину, амфотерицину В. Пигментов не образует.

Отношение к углеводам.

Усваивает глюкозу, галактозу, фруктозы, сахарозу, глицерин, спирт. Не усвайвает сор -- бозу, рибозу, арабинозу, ксилозу. Антагонистические свойств .no отйОшению к другим миКроорганизмам не проявляет.

Свойство накапливать анормальные стеролы.

В гейтаеноъом" экстракте из клеток штамма Л-Ш-РГ обнаруживаются стеролы, отличные по свойствам от эргостерола — ос10 новного стерола дрожжей.

Культура йакапливает" сТероль1, коТорь1е после экстракции и выпаривания представляют собой белый кристаллический порошок, нерастворимый в воде, растворимый в неполярных растворителях (гептан, гексан).

По данным абсорбционной спектрофотометрии данный кристаллический порошок йредстваляет собой смесь стеролов, основным компонентом которой является вещество со следующими характерными максимумами по- 26 глощения в ультрафиолетовой области: (200350 нм), при 215 нм, 220-240 нм (плечо), 265, 275, 295 нм.Сравнительный анализ УФ-спектров абсорбции стерольных гептаеновых экстрактов из клеток штамма Л-Ш-РГ, исходного щтамма 2П712, истых препаратов стеролов (эргостерол; холестерин; 5, 6 дигидростерол, брассикостерол, стигмастерол, 7 дегидрохолеостерин, антостерин, эргоста — 7,22 - диен-3- ол) показал, что эргостерол у штамма 3о

Л-Ш-РГ замещен на стерол, близкий к нему по спектральным свойствам, как предполага ется, на холеста производную.

Содержание общей фракции стеролов в штамме Л- Ш-РГ при пересчете на биомассу "-влажных клеток составляет в среднем 2 /0. о 3S

Биологическая активность штамма Л—

Ш вЂ” РГ.

1. Личинки Drosophila melanogaster npu "= содерЖайКи на штамме прекращают развитие на первой личиночной стадии.

2. Кормление этиМ штаммом взрослых мух приводит к необратимой стерилизации

"самок и к снижению фертильности самцов.

В некоторых линиях мух падение выводимостй яиц "сопровождается массовыми изменениями морфологии яиц.

При добавлении к дрожжевой массе штамма Л-Ш-РГ экзогенных стеролов или суспензии дрожжей дикого типа ингибирующая активность резко снижается. Однако свойсгвб-штамма подавлять численность дро зофилы сохраняется при добавлении фруктов (на которых в естественных уСловиях разводится этот вид), а также в условиях, прйближайй1ихся и "йрйфоднь1м"йо ФГличйю градиента темnepa+pbi освещенности.

Биологический способ регуляции числен- и

3focTA популяции насекомых особо выгоден по следующим причинам: а) йсКлючает загрязнение о..ружающей среды; б) исключает полное уничтожение вида; в) дрожжи Saccharomjces re evisiae штамм Л-Ш-РГ не представляют onасности, так как штамм непатогенен и не вь .держивает Конкуренции с дикими штаммами дрожжей в естественных условиях.

Формула изобретения

Штамм Saccharomyces сегеч1з1ае Л-Ш-РГ, блокирующий развитие насекомых, хранится в коллекции Всесбюзного научно-исследовательского техйолбгического института антибиотиков и ферментов медицинского назначения под номером Л-Ш-РГ.

Морфолого-культуральные признаки.

Штамм Saccharomyces cerevisiae Л-Ш-P Г; на твердых средах образует белые, круглые, гладкие, кблонии и имеет все характерные свойства гетероталличных групп дрожжей

Saccharomyces cerevisiae.

Среда с пептоном и дрожжевым автолизатом (ДАП).

На агаризованном варианте среды штамм образует белые; гладкие, круглые колонии.

В жидкой среде рост обильный, цвет биомассы белый.

Минимальная дрожжевая среда (М).

Требует для роста добавок гистидина, аденина, лизина, В остальном ростовые свойства аналогичны среде ДАП.

Среда для споруляции.

Со штаммами противоположного (а(типа спаривания образует стабильную диплоидную форму, которая при переносе на среду для споруляции образует четырехспоровые аски (гаплоидные потомки). Средняя фертильность гибридов 90 /р.

Физиологические признаки.

Генотип штамма Л-Ш-РГ- а his 7 ade

2-163 1уд 2-А12; nysr 1 — 1. Устойчив к полиеНовым антибиотикам: нистатину, леворину, амфотерицину В. Пигментов не образует.

Отношение к углеводаж.

Усваивает глюкозу, галактозу, фруктозу, сахарозу, декстрозу, глицерин, спирт. Не усваивает сорбозу, рибозу, арабинозу, ксилозу. Антигонистические свойства по отношению к другим миКроорганизмам не проявляСвойство йакапливать анормальные стеролы.

В гептанбвом экстракте из клеток штамма Л-Ш-РГ обнаруживаются стеролы, отличные по свойствам от эргостерола - основного стерола дрожжей.

Культура накапливает стеролы, которые после экстракции и выпаривания 3KcTpareHты представляют собой белый кристаллический порошок, нерастворимый в воде, растворимый в неполярных растворителях (гептане, гексане и т.д). По данным абсорбционной спектрофотометрии данный кристаллический порошок представляет собой смесь

745944

Составитель А: Левченко

Редактор О. Иванова Техред К. Шуфрич Корректор Ю.Макаренко

Заказ 3895/! 8 Тираж 522 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, .Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

5 стеролов, основным компонентом которой является вещество со следующими характерными максимумами поглощения в ультрафиолетовой области (200-350 нм, при

215 нм, 220-240 нм (плечо), 265, 275, 295 нм, Сравнительный анализ УФ-спектров абсорбции стерольных гептановых экстрактов из клеток штамма Л-Ш-РГ, исходного штамма 2-П712, чистых препаратов стеролов (эргостерол; холестерин; 5,6 дигидроэргостерол, брассикостерол, стигмастерол, 7 дегидрохолестерин, ситостерин, эргоста-7,22—

-диен-3-ОЛ) показали, что эргостерол у штамма Л-Ш-РГ замещен на стерол, близкий к нему по спектральным свойствам, как предполагается, на холеста производную.

Содержание общей фракции стеролов в 4 штамме Л-IL -РГ при пересчете на биомассу влажных клеток составляет в среднем 2 /р.

Биологическая активность штамма

Л вЂ” Ш вЂ” РГ.

1. Личинки Drosophila melanogaster npu содержании на штамме прекращают развитие на первой личиночной стадии.

2. Кормление этим штаммом взрослых мух приводит к необратимой стерилизации ь самок и к снижению фертильности самцов.

В некоторых линиях падение выводимости яиц сопровождается массовыми изменениями морфологии яиц.

При добавлении к дрожжевой массе штамма Л-Ш-РГ экзогенных стеролов или суспензии дрожжей дикого типа ингибирующая активность резко снижается. Однако свойство штамма подавлять численность дрозофилы сохраняется при добавлении фруктов (на которых в естественных условиях разводится этот вид), а также в условиях, приближающихся к природным по наличию градиента температуры и освещенности, по гетерогенности дрожжевой флоры и популяций дрозофилы.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Тарлаковский С. А. Стерины, их метаболизм, функции и роль во взаимоотношениях с растениями и вредными насекомыми.

Труды ВИЗР, в 52, с. 53-65, 1977.

2. Штамм Saccharomyces cerevisiae 2-П712. Петергофская коллекция генетических линий дрожжей проф. Инге-Вечтомова С. Ю. Описание штамма. Л., 1976— прототип.,