Способ получения биомассы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советскик

Соцмалистмческик

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Опубликовано 230880. бюллетень М 31

Дата опубликования описания 23.0880 (Я)М. Кл.з

С 12 В 1/08

Госуяарствечный аомятет

СССР оо аелам ямбретеняй я открытнй (5З) Ю)(663.14:636.

087 (088 8) Иностранцы

Паскуале Цаффарони, Антонио Сенин, Паоло Брандуззи и Ламберто Формикоии (Италия) (72) Авторы изобретения

Иностранная фирма

"Снампрогетти С. и. A" (Италия) (71) Заявмтель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССИ

Изобретение относится к микробиологической промлаленности, а именно к способам получения биомассы, включает культивирование дрожжей на питательной среде, содержащей в качестве источника углерода метанол.

Известен способ получения биомассы, включающий культивирование дрожжей рода,Candlda на метаноле (1) .

Недостатком известного способа является невысокое содержание белка в биомассе.

Для повышения содержания белка в биомассе используют из рода Candida штамм Candida Sp. SPM 180cc, при !5 этом культивирование ведут при температуре 20-35 С и рН среды 2,5-6,5.

Способ выполняют следующим образом.

Штамм Candida Sp. 5РМ 180сс куль-20 тивируют на питательной среде, содеркащей в качестве источника углерода метанол, а также источники азота, фосфора, калия, железа и кальция, а так..е биостимуляторы — дрожжевой экстракт, биотин.

Культивирование штамма проводят при энергичном перемешивании с тем пературой среды от 20 до 354С, предпочтительно в пределах 30-33 С. рН

D среды поддерживают в пределах 2,56,5, предпочтительно в пределах 4-4,5.

Среду аэрируют газовой смесью, содержащей кислород, предпочтительно воздухом.

Полученную в процессе культивирования биомассу отфильтровывают, промывают водой и сушат при подогреве.

Биомасса может быть использована в качестве белкового компонента пищевых продуктов или кормов для животных.

Из биомассы могут быть выделены облагороженные продукты: белок, аминокислоты, а также нуклеиновые кислоты.

Штамм выделен в непрерывном про цессе культивирования на специально обогащенной питательной среде.

Штают Candlda Sp. 5РМ 180 сс культивируют периодическим и непрерывным способом.

В жидкой питательной среде штамм образует пучки удлиненной формы (псевдомицелий), которые выпадают в осадок.

В твердой среде штамн образует гладкие глянцевые колонии, либо

759055

D-глюкоза

D-галактоза

Сахароза

Мальтоэа

Трегалоза

Лактоза

+ (Слабо) 30

40 або) . ющими

+ (Сл леду примерами .

45 колбы татель50

55 имеет сле60 дующий состав:

CuSO»- 5H 0

Н,80

Мп504-Н 0

KI

СоС1 ° 6Н О

200 мг/л

500 мг/л

500 мг/л

10 мг/л

10 мг/л непрозрачные складчатые колонии. Споры не образует.

Физиологическая характеристика штамма Candida Sp. SPM 180 сс: .Использование источников гле о а зооз

О-глюкоза

0-галактоза

t-сорбоза

Сахароза

Мальтоэа

Пеллобиоза

Трегалоза

Лактоэа

Мелибиоза

Раффиноза

Мелецитоза

Инулин

Крахмал

0-ксилоза

В-арабиноэа

D-арабиноза

О-рибоза

2-рамн о з а

Этанол

Глицерин

Эритритол

Рибитол

Галактикол

О-маннитол

D-глюцитол

Молочная кислота

Янтарная кислота

Лимонная кислота

Инозит

Нитраты

Отсутствие витаминов при 37

Способ иллюстрируется с

Пример 1. В конические емкостью 500 мл вносят 50 мл пи ной среды следующего состава:

КН РО4 2,0 г/л

МН РО4 Н ф 2,0 г/л (йН4) SO4 5,0 г/л

MgSO4 7Н О 0,2 мг/л

FeS04 7Н О 2,0 мг/л

CaCi 2,0 мг/л

ZnS04 7Н 0 2,0 мг/л

Дрожжевой экстракт 2,0 мг/л

Биотин 200 мг/л

Микроэлементы 1 мл/л .

Раствор микроэлементов

5 (0

10 мг/л

Mo"g

Н 504 (концентрированная) 1 мг/л, Среду доводят до рН 5,0. Среду в колбе стерилизувт при температуре

116 С в течение 20 мин. В две колбы добавляют 0,75 мл (1,9Ъ по объему) метанола, и засеивают штаммом Сandida

Sp. SPM 180 сс. Колбы инкубируют в течение 72 ч на вращающемся перемешивающем устройстве при скорости вращения 220 об/мин с разбегом по диаметру 3,5 см. Температура контролируется термостатированием и составляет 32,5ос.

К содержимому других колб, в которых имеется та же среда, добавляют:

1% (об/об) метанола, 2% (об/об) этанола и 2% (вес/об) глюкозы.

Эти колбы засеивают 5 мл культуры, описанной выше. Спустя 24 ч после начала инкубирования,в каждую колбу дополнительно добавляют 1% метанола (об/об). Через 48 ч инкубации определяют содержание биомассы в колбах и содержание белка в биомессе.

Полученные результаты приведены в таблице.

О, 340

0,270

0,095

Глюкоза

Метанол

3,99. 54,5

3,68 51,0

1 18 54,1

Этанол

Содержание белка определяется биуретовым методом.

Пример 2. D ферментер с эффективным объемом 8 л вводят питательную среду, укаэанную в примере 1, и засеивают штамм Candida Sp SPM

180 сс в виде суспензия. В ферментер, температура которого поддерживается на уровне 32,5 С, добавляют метанол с таким расчетом, чтобы его остаточная концентрация в среде не превышала 1 об.Ъ. После процесса накопления культуры начинают непрерывно вводить стерильную питательную среду в фе лентер. Содержание метанола в ней составляет 29,6 г/л.

Одновременно производят отбор дрожжевой суспензии из ферментера. Скорость разбавления среды постепенно увеличивают до 0,166 час ". При работе в таком режиме отходящий поток содержит 10,28 г/л сухой биомассы и 146 ч на миллион остаточного метанола. Выход полезного продукта составляет 35%, продуктивно .ть 1,72 г/л в час. Получаемая биомасса содержит

55,6% белка (определено с помощью биуретовой реакции).

759055

Составитель Великославинская:, Tехред Н. Барадулина Корректор О. Ковинская

Редактор Т. Шагова

Заказ 5664/53 Тираж 522 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобертений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Пример 3. К ферментеру, описан ному в примере 2, подключают отстойник. Часть дрожжевой суспензии отводят в отстойник, где биомасса отстаивается, и ее регулярно возвращают в ферментер. В ферментер вводят также свежую питательную среду, содержащую 24 г метанола. Скорость разбавления была 0,267 час-<. Дрожжевая суспензия, выводимая из ферментера, содержит 7,80 г/л-биомассы н 120 ч на миллион остаточного метанола. Выход полезного продукта составляет 32,5%. Продуктивность по биомассе была 2,08 г/л в час.

Биомасса содержит 53,0% белка (определено с помощью биуретовой ре- 15 акции).

Формула изобретения

Способ получения биомассы,предусматривающий культивирование дрожжей рода Сàndidа на питательной среде, содержащей метанол в качестве источника углерода, источник азота и минеральные соли и биостимуляторы в условиях аэреации среды, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повыаения выхода белка в биомассе, из рода Candida используют штамм

Candida Sp. SPM 180 сс, при этом культивирование ведут при температуре 20-35 С и рН среды 2,5-6,5.

Источники информации, принятые во внимание при экспергизе

1. Патент Англии Р 1435865, кл. С 6 F, опублик. 1976.