Способ получения биомассы
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Союз Советскик
Соцмалистмческик
Республик
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
Опубликовано 230880. бюллетень М 31
Дата опубликования описания 23.0880 (Я)М. Кл.з
С 12 В 1/08
Госуяарствечный аомятет
СССР оо аелам ямбретеняй я открытнй (5З) Ю)(663.14:636.
087 (088 8) Иностранцы
Паскуале Цаффарони, Антонио Сенин, Паоло Брандуззи и Ламберто Формикоии (Италия) (72) Авторы изобретения
Иностранная фирма
"Снампрогетти С. и. A" (Италия) (71) Заявмтель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССИ
Изобретение относится к микробиологической промлаленности, а именно к способам получения биомассы, включает культивирование дрожжей на питательной среде, содержащей в качестве источника углерода метанол.
Известен способ получения биомассы, включающий культивирование дрожжей рода,Candlda на метаноле (1) .
Недостатком известного способа является невысокое содержание белка в биомассе.
Для повышения содержания белка в биомассе используют из рода Candida штамм Candida Sp. SPM 180cc, при !5 этом культивирование ведут при температуре 20-35 С и рН среды 2,5-6,5.
Способ выполняют следующим образом.
Штамм Candida Sp. 5РМ 180сс куль-20 тивируют на питательной среде, содеркащей в качестве источника углерода метанол, а также источники азота, фосфора, калия, железа и кальция, а так..е биостимуляторы — дрожжевой экстракт, биотин.
Культивирование штамма проводят при энергичном перемешивании с тем пературой среды от 20 до 354С, предпочтительно в пределах 30-33 С. рН
D среды поддерживают в пределах 2,56,5, предпочтительно в пределах 4-4,5.
Среду аэрируют газовой смесью, содержащей кислород, предпочтительно воздухом.
Полученную в процессе культивирования биомассу отфильтровывают, промывают водой и сушат при подогреве.
Биомасса может быть использована в качестве белкового компонента пищевых продуктов или кормов для животных.
Из биомассы могут быть выделены облагороженные продукты: белок, аминокислоты, а также нуклеиновые кислоты.
Штамм выделен в непрерывном про цессе культивирования на специально обогащенной питательной среде.
Штают Candlda Sp. 5РМ 180 сс культивируют периодическим и непрерывным способом.
В жидкой питательной среде штамм образует пучки удлиненной формы (псевдомицелий), которые выпадают в осадок.
В твердой среде штамн образует гладкие глянцевые колонии, либо
759055
D-глюкоза
D-галактоза
Сахароза
Мальтоэа
Трегалоза
Лактоза
+ (Слабо) 30
40 або) . ющими
+ (Сл леду примерами .
45 колбы татель50
55 имеет сле60 дующий состав:
CuSO»- 5H 0
Н,80
Мп504-Н 0
KI
СоС1 ° 6Н О
200 мг/л
500 мг/л
500 мг/л
10 мг/л
10 мг/л непрозрачные складчатые колонии. Споры не образует.
Физиологическая характеристика штамма Candida Sp. SPM 180 сс: .Использование источников гле о а зооз
О-глюкоза
0-галактоза
t-сорбоза
Сахароза
Мальтоэа
Пеллобиоза
Трегалоза
Лактоэа
Мелибиоза
Раффиноза
Мелецитоза
Инулин
Крахмал
0-ксилоза
В-арабиноэа
D-арабиноза
О-рибоза
2-рамн о з а
Этанол
Глицерин
Эритритол
Рибитол
Галактикол
О-маннитол
D-глюцитол
Молочная кислота
Янтарная кислота
Лимонная кислота
Инозит
Нитраты
Отсутствие витаминов при 37
Способ иллюстрируется с
Пример 1. В конические емкостью 500 мл вносят 50 мл пи ной среды следующего состава:
КН РО4 2,0 г/л
МН РО4 Н ф 2,0 г/л (йН4) SO4 5,0 г/л
MgSO4 7Н О 0,2 мг/л
FeS04 7Н О 2,0 мг/л
CaCi 2,0 мг/л
ZnS04 7Н 0 2,0 мг/л
Дрожжевой экстракт 2,0 мг/л
Биотин 200 мг/л
Микроэлементы 1 мл/л .
Раствор микроэлементов
5 (0
10 мг/л
Mo"g
Н 504 (концентрированная) 1 мг/л, Среду доводят до рН 5,0. Среду в колбе стерилизувт при температуре
116 С в течение 20 мин. В две колбы добавляют 0,75 мл (1,9Ъ по объему) метанола, и засеивают штаммом Сandida
Sp. SPM 180 сс. Колбы инкубируют в течение 72 ч на вращающемся перемешивающем устройстве при скорости вращения 220 об/мин с разбегом по диаметру 3,5 см. Температура контролируется термостатированием и составляет 32,5ос.
К содержимому других колб, в которых имеется та же среда, добавляют:
1% (об/об) метанола, 2% (об/об) этанола и 2% (вес/об) глюкозы.
Эти колбы засеивают 5 мл культуры, описанной выше. Спустя 24 ч после начала инкубирования,в каждую колбу дополнительно добавляют 1% метанола (об/об). Через 48 ч инкубации определяют содержание биомассы в колбах и содержание белка в биомессе.
Полученные результаты приведены в таблице.
О, 340
0,270
0,095
Глюкоза
Метанол
3,99. 54,5
3,68 51,0
1 18 54,1
Этанол
Содержание белка определяется биуретовым методом.
Пример 2. D ферментер с эффективным объемом 8 л вводят питательную среду, укаэанную в примере 1, и засеивают штамм Candida Sp SPM
180 сс в виде суспензия. В ферментер, температура которого поддерживается на уровне 32,5 С, добавляют метанол с таким расчетом, чтобы его остаточная концентрация в среде не превышала 1 об.Ъ. После процесса накопления культуры начинают непрерывно вводить стерильную питательную среду в фе лентер. Содержание метанола в ней составляет 29,6 г/л.
Одновременно производят отбор дрожжевой суспензии из ферментера. Скорость разбавления среды постепенно увеличивают до 0,166 час ". При работе в таком режиме отходящий поток содержит 10,28 г/л сухой биомассы и 146 ч на миллион остаточного метанола. Выход полезного продукта составляет 35%, продуктивно .ть 1,72 г/л в час. Получаемая биомасса содержит
55,6% белка (определено с помощью биуретовой реакции).
759055
Составитель Великославинская:, Tехред Н. Барадулина Корректор О. Ковинская
Редактор Т. Шагова
Заказ 5664/53 Тираж 522 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобертений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Пример 3. К ферментеру, описан ному в примере 2, подключают отстойник. Часть дрожжевой суспензии отводят в отстойник, где биомасса отстаивается, и ее регулярно возвращают в ферментер. В ферментер вводят также свежую питательную среду, содержащую 24 г метанола. Скорость разбавления была 0,267 час-<. Дрожжевая суспензия, выводимая из ферментера, содержит 7,80 г/л-биомассы н 120 ч на миллион остаточного метанола. Выход полезного продукта составляет 32,5%. Продуктивность по биомассе была 2,08 г/л в час.
Биомасса содержит 53,0% белка (определено с помощью биуретовой ре- 15 акции).
Формула изобретения
Способ получения биомассы,предусматривающий культивирование дрожжей рода Сàndidа на питательной среде, содержащей метанол в качестве источника углерода, источник азота и минеральные соли и биостимуляторы в условиях аэреации среды, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повыаения выхода белка в биомассе, из рода Candida используют штамм
Candida Sp. SPM 180 сс, при этом культивирование ведут при температуре 20-35 С и рН среды 2,5-6,5.
Источники информации, принятые во внимание при экспергизе
1. Патент Англии Р 1435865, кл. С 6 F, опублик. 1976.