Способ количественного определения кислых полисахаридов

Способ количественного определения кислых полисахаридов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П И- C А Н И E

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Соеэ Советскик

СОциблнстичэских ттвалублик

К АВТОРСКОМУ СВ ЕТЕЛЬСТВУ (б1) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 120778 (21) 2644757/23-05 Р ) М. с присоединением заявки М— (23) Приоритет

G N 31/02

С 08 В 15/04

Государственный комитет

СССР но делам изобретений н открытий

Опубликовано 15,0980. Бюллетень М 34 (53) УДК 677.469 (088. 8) Дата опубликования описания 150$80 (72) Автор изобретения

В.В.Беликов (71) Заявитель

Харьковский научно-исследовательский химикофармацевтический институт (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ КИСЛЫХ

ПОЛИСАХАРИДОВ

Изобретение относится к медицинской проьыаленности и касается анализа природных соединений, в особенности лекарственных соединений из растительного сырья.

Известен способ количественного определения натрий-карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ ) осаждением сульфатом меди в виде ее медной соли, отделением осадка и титрованием не вступившего в реакцию избытка сульфата меди Pi) .

Однако указанный способ является продолжительным и трудоемким, так как требуется точное соблюдение кислотности растворов вначале при рН 2,2-2,4 и затем доведение до рН 4,0-4,1; несколько часов занимаеч фильтрование и промывание получаемого аморфного осадка. Кроме того, 20 метод характеризуется нечетким изменением окраски раствора при титровании ввиду обильного осадка иодида меди, который адсорбирует крахмал, применяемый в качестве индикатора. Метод дает удовлетворительные результаты только при определении больших навесок КМЦ (0,5-1,0 r) и непригоден для полумикроопределений 0,01-0,1 r вещества), что необхо- ЗО димо при анализе КМЦ и кислых полисахаридов (пектина, альгина) в смесях с другими веществами, например в лекарственной смеси с флавансидами (гранулы ифлакарбин" и др.) .

Цель изобретения — упрощение и ускорение анализа и повышение его точности.

Поставленная цель достигается тем, что полисахариды (пектин, альгин и др.) осаждают 0,5-1,53-ным водным или метанольным раствором ацетата свинца, осадок отделяют центрифугированием и после промывания проводят комплексонометрическое титрование свинца раствором трилона Б в присутствии соответствующего для ионов свинца металлнндикатора.

Способ осуществляют следующим образом..

Около 20 мг КМЦ или других кислых полисахаридов осаждают 3-5-кратным весовым избытком раствора ацетата свинца, осадок отделяют центрифугированием, отмывают от маточного раствора и проводят комплексонометрическое титрование свинца растворяем трилона Б в присутствии индикатора ксиленолового оранжевого.

763777 центрифугиронания проьывную жидкость осторожно сливают в колбу для титрования, туда же прибавляют 100 мл воды, 10 мп ацетатного буфера рН 5,5 около 0,5 мя 0,1%-ного водного раствора ксиленолового оранжевого и титруют 0,01 моль раствором трилона 8 до изменения красно-фиолетового окрашивания в желтое. Разность между титрованием реактива и фильтрата соответствует расходу титранта на осах< даемый полисахарид.

Результаты количественного определения KMII и кислых полисахаридов комплексонометрическим методом и из- . вестным способом представлены в

15 табл. 1..

Таблица 1

Комплексонометрический метод

15,23 15,51 +1,82

20,44 20,11 -1,61 1

25,16 25,49 +1,33

20, 34 20, 77 +2, 12

25,15 6 24,76 -1,54 То же

30,21 29,68 -1,76

15,37 15,67 +1,94

20,64 20,33 -1,45

КМЦ очищенная

Пектин чистый

Альгин чистый

25,18 25,59 +1,63

Известный способ

786,8 +4,71

751,4

920,6

КМЦ очищенная

1000,3 1053,8 +5,34. В случае определения КМЦ и кислых полисахаридов в смеси с флаваноидами или мешающими определению веществами смесь предварительно обрабатывают горячим спиртом.

При анализе гранул "Флакарбин" кроме обработки смеси спиртом КМЦ осаждают иэ подкисленного уксусной кислотой водного раствора метанольным раствором уксуснокислого свинца в смеси с триэтаноламином. Это позволяет унифицировать реактив для последую-® щего осаждения кверцетина в метиловом спирте. Кроме того, определение КМЦ проводят титрованием свинца в осадке после растворения его в азотной кислоте.

Пример 1. В центрифужную пробирку емкостью,25-50 мл помещают

10 мл исследуемого водного раствора

=и прибавляют 5 мл 0,5%-ного водного раствора уксуснокислого свинца. Смесь реагентов в центрифужной пробирке перемешивают стеклянной палочкой, которую затем проьывают 5 мл воды, присоединяя ее к .центрифугируемой смеси. Через 20-30 мин взвесь цент рифугируют 5-10 мин со скоростью

5-6 тыс. оборотов в минуту, жидкость над осадком осторожно сливают в колбу для титрования, а осадок промывают взмучиванием с 20 мл водно-cIlHpTQBQA смеси с помощью той,же палочки, про мывая ее 5 мл указанной смеси. После

955,8 +3,83 6,5

Пример 2. Определение КМЦ в гранулах "Флакарбин". Около 1 г порошка растертых гранул (точная навеска) в мерной колбе емкостью 50 мл обрабатывают 2-3 раза горячим этиловым спиртом, сливая спиртовый раствор через стеклянный фильтр пор 40.

Фильтр промывают 10-15 мл горячей воды, которую помещают в мерную колбу, с промытой навеской препарата. Затем в эту же колбу прибавляют 20 мл воды и взбалтывают в течение 15-20 мин до получения однородного раствора и доводят водой до метки.

10 мл полученного раствора помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 2,5 мл разведенной уксусной кис763777

10,14

10, 41

Полисахарид определить невозможно

9,83

9,92

10, 11

9,78

То же

Пектин

9,93

10,36

-2,74

9,58

9,85

-1, 12

-3,25

9,74

9,53

Формула изобретения

Составитель T.Èàðòûíñêàÿ

Редактор О.Колесникова Техред A.Ùåïàíñêàÿ Корректор Г.Назарова

Заказ 8129 Тираж 1019 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная,4 лоты, 5 мл 1,5%-ного метанольного раствора ацетата свинца с 10%-ным триэтаноламином, жидкость перемешивают и оставляют на 20-30 мин. Затем проводят .центрифугирование и промывание осадка указанным способом. Осадок в центрифужной пробирке взмучивают стеклянной палочкой с 1 мп разведенной азотной кислоты до растворения осадка. Содержимое пробирки с помощью 70-80 мл воды количественно пеПреимуществом предлагаемого метода является простота, меньшая продолжительность, большая точность и воэможность проведения полумикроопределений КМЦ и кислых полисахаридов в исходных препаратах и в смесях с другими веществами(моносахаридами, флавоноидами, нейтральными полисахаридами и др.) .

Способ количественного определения кислых полисахаридов из раствора реносят в колбу емкостью 200-300 мл, прибавляют раствор ацетата натрия до рН 5-6, и проводят титрованне

0,01 моль раствором трилона Б укаэанныч способом.

Результаты количественного опре1 деления КМЦ и кислых полисахарндов в искусственных смесях гранул "Флакарбин" (состав смеси,Ъ: глюкоза

76, КМЦ и пектин 10, кварцетин и ликуразид 2) представлены в табл. 2.

Таблица 2

+2,66

-3, 06

-2,17

-3,26.

-1,78

-2,47 осаждением раствором соли металла, отделением осадка и титрованием ионов металла, отличающийся тем, Ю что, с целью упрощения и ускорения анализа и повьыения его точности, осамдение проводят 0,5-1,5%-ным водным или метанольным раствором ацетата свинца, а титрование проводят комп лексонометрическим методом.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. OCT 6-05-386-73 (прототип).