Способ выявления аллергического воспаления при увеите

Способ выявления аллергического воспаления при увеите

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 290977 (21) 2528389/28-13 (51) М. Кл. с присоединением заявки ¹

А 61 В 10/00

Государственный комитет

СССР но делам изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 2309.806юллетень ¹35

Дата опубликования описания 2 0980 (53) УДК 616-074 (088.8) Е, И, Коз алевс кий, Н. С. Зайцева, Ф. А, Ромашенков, А, А. Терентьев, В. С, Фаустов, Л. А. Людоговская, Л. Я. Прааина, Т. В. Беликова и Г. И. Котяшева

1 (72) Авторы изобретения

Второй Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н. И, Пирогова и Московский научноисследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца (71) Заявители (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ АЛЛЕРГИЧЕСКОГО

ВОСПАЛЕНИЯ ПРИ УВЕИТЕ

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, Известен способ выявления аллергического воспаления при увеите путем определения в крови концентрации S иммуноглобулинов (1).

Однако этот способ имеет невысокую степень специфичности при оценке аллергического компонента воспаления, Поэтому параллельно с использованием 10 названных показателей крови ставят внутрикожные пробы, не достигая при этом повышения степени специфичности аллергического компонента воспале" ния, 15

Для повышения специфичности способа выявления аллергического воспаления при увеите в крови дополнительно определяют концентрацию адреналина серотонина и II-оксикортикостероидов 20 и по уровню концентрации исследуеьых веществ выявляют аллергическое socna" ление при увеите, Способ осуществляется следующт4м образом. 25

250 кроликов (500 глаз) разделяют иа две группы, Каждую группу иммуни" зируют отдельным. тканевым (хрусталик, сетчатая оболочка, сосудистая оболочка, лошадиная. аыворотка, бычий аль- ЗО

2 бумин) или микробным (стафилококк, стрептококк, кишечная палочка) антигеном по схеме в течение одного месяца.

Спустя 10 дн, после окончания ию унизации вводят в переднюю. камеру глаза разрешающую дозу одноименного .антигена, У животных с полученной моделью увеита определяют клинико-офтальмологическую и морфо-химическую картину степени аллергического воспаления в оболочках глаза (с использованием) метода Нисселя и выявления конфигура- ции ДНК и РНК по Браше, общего белка по Гейеру,гликоген по Монтгомери и активности цикла ферментов гликолиза по Мильману с соавторами) .Одновремен" но выполняют концентрацию абсолютного количества антител к провоцирующему увеит антигену и выделяют их в чистом виде с помощью белково-целлюлозных комплексов (иммуносорбентов), а также определяют концентрацию моноаминов (серотонин,адреналин) по Оксенкругу и ХХ-оксикортикостероидов по методу

Панкова и Усватовой.При иммунизации тканевыми антигенами с адъювантом Фрейнда токсичноаллергический увеит выявляют тяжелее, чем без адъюванта Фрейнда, Тяжесть клинико-офтальмологических и структу764659 ро-химических изменений в глазу при увеите, характеризующаяся снижением концентрации ДНК, PHK белков, глико" гена и активности ферментов цикла гликолиэа, имеет прямую cBRBb с увеличением концентрации антитела к провоцирующему увеит антигену и серотони на в крови с одновременным-уменьше,нием концентрации адреналина и ЕХоксикьртикостероидов.

При иммунизации тканевыми и особен но микробными антигенами без адъюванта Фрейнда выявляют низкую концентра" цию антител к провоцирующему увеит антигену, Содержание серотонина, адреналина и ЕЕ-оксикортикостероидов у объектов исследования было или неэна" чительно изменено или оставалось в пределах норовы, а клинико-морфологические проявления увеита были нечетко выражены. Отчетливую модель токси. ко-аплергического увеита получили тольк4 после реиммунизации. При этом определяли заметное повышение концентрации антител и серотонина в кро.ви объекта исследования с однбвременным снижением содержания адренапина . и II-оксикортикостероидов;-

При иммунизации животных выявлены антигенные «свойства изучаемых веществ в убывающей степени хрусталик-3 сетчатая оболочка сосудистая оболочка глаЗ а лсшадиная -сыворотка- бычий аль-,бумин микробные ан тигены.

Клинико-офтальмологические прояв" лени я токсико-аллергического увеита у животных с определенными иммунобиохимическими изучаемыми показателями крови сопоставлены с проявлениями увеита у человека. Одновременно у человека исследована концентрация антител к предполагаемому провоцирующему увеит антигену и определено содержание серотонина, адреналийа и

-оксикортикостероидов. Как правило, при наличии аллергического компонента воспаления- прн увеите у человека, сопровождающимся наличием антител к провоцйрующему увеит антигену, выявляют повышение концентрации серотонина и снижение содержания адре.налина и II-оксикортикостероидов в крови.

Пример . Предварительно про водят иммунизацию 20 кроликов лсиаа-. диной сывороткой в количестве О, 1 мп на 100 г веса животного по схеме с адъювантом Фрейнда. После окончания йммунизации у животных при концентрации антител s крови. 150-200 мкг/мл введение разрещающей дозы антигена в количестве 0,1 мп в переднюю каме ру глаза способствует, развитию экссудативно-альтернативной форьы увеита с инволюцией токсико-аллергического воспаления в глазу на 35-40 день. На третий дейь после введения разрешающей дозы антигена при максимальной воспалительной реакции глаза берут. пробу крови. Для исследования абсолютной концентрации антител к О, 5 wr исследуемой сыворотки крови добавляют

О, 2 мл иммуносорбента, содержащего иммобилизиров анную лсыадиную сыворотку. Через 30 мин инкубации иммуносорбент Отьывают от исследованных белков. С помощью 0,5 мп глицин HCIбуфера рН 2, 5 отделяют от иммуносор" бента, связывавшиеся антител и йх абсолютную концентрацию определяют иммунодиффуэионным способом или метОдом спектрофотометрии. Концентрация антител 160-200 мкг/мп.

Концетрация II-оксикортикостерои дов, определяемая по методу Панкова и Убватовой.

Концентрация серотонина, выявляемая по методу Оксенкруга и Шатаповой

s была повышена до 5-.10 мкг/мп, а адреналина снижена до 0,004 мкг/мп.

20 У животных при концентрации антител в крови после иммунизации лсыадиной сывороткой в пределах 75-.

100 мкг/мп после введения разрешающей дозы антигена, как правило, раэвива15 ется менее тяжелый по клиническому течению подострый экссудативный увеит.

При этом в крови концентрация иммунных тел к провоцирующему увеит антигену в пределах 80-100 мкг/мп, серотонина до 3 мкг/мл, адреналина до

0,009 мкг/мп, II-Оксикортикостероидов до 10 мкг на 100 мп крови, ПровОдят параллельные иммунологические и биохимические исследования у 120 больных с увеитами различной этиОлОгии и дОнОрОв °

Для диагностики аллергического увеита проводят 350 иммунологических исследований по выявлению антител к бактериальным антигенам в реакциях

40 мнкропреципитации (метод нефелометрии) и бласттрансформации с бактериальными антигенами и фитогемагглютинином.

Одновременно проводят исследования содержания II-оксикортикостероидов в

45 плазме крови: гидрокортиэона и кортикостерона, адреналина и серотонина, а также активности ферментов углеводо родного обмена.

Результаты исследований покаэыва5Q ют повышение иммунологической реактивности у 10% больных и понижение ее более чем в 50%,- у остальных больных выявлена нормальная реактивность, Установлен4, что при-повышенной иммунологичеСкой реактивности значительно снижено содержание свободного ,гидрокортизоиа по сравнению с нормальной реактивностью (4,2-5, 5 при норме

6,2 мкг/100 мл плавуны) и повышено содержание кортикостерона (3,0-4,7

60 при норме 2 9 мкг/100 мп плазмы).

Кроме того, при этом состоянии обнаружено также значительное повышение содержания белковосвязанных форм г гидрокортиэона и кортикостерона. Со

65 держание адреналина было повышено

764659

Формула изобретения

Составитель Л, Соловьев

ТехредН. Ковалева

Редактор Т. Шагова

Корректор В, Синицкая

Заказ 6368/4 1ираж 673 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 1 30 35 Москва, Ж-35, Раушск ая наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент,, Г. Ужгород, ул, Проектная, 4 до 50%, а серотонина в 1,5-2 раза по. сравнению с контропьной группой (дойоры) . Активность ферментов сыворотки крови больных; с повышенной иммунологической рештивностью при этом была повышена по сравнению с нормальными показателями °

При снижении иммунологической реактивности содержание гидрокортиэона было снижено до 50%, а содержание свободного кортикостерона наоборот увеличено в 2 раза, показатели содер.жания адреналина и серотонина увели" чены в 2-4 раза и значительно возрас-, тала активность ферментов углеводного обмена.

Предлагаемый способ диагностики в сочетании с офтапьмологическими данными позволяет судить о наличии аплергического воспаления глаза и служит обоснованием при выборе,методов иммунотропной терапии у больных увеитами с различной иммунологической реактивностью.

Экон омическ ая . эффективность данного способа состоит в сокращении сроков диагностического обследования с

10 до 5 дней и обосновании выбора эффективной терапии. На основе применения метода сокращаются сроки лечения, предупреждаются рецидивы и улучшаются функциональные исходы.

Способ выявления аллергического воспаления при увеите путем определения в крови концентрации иммуноглобулинов, отличающийся тем,, что, с целью повышения специфичности способа, в крови дополнительно определяют концентрацию адреналина, серотонина и II-оксикортикостероидов и по . уровню концентрации исследуемых веществ выявляют аллергическое воспаление при увеите.

20 Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Материалы 2-ro Всероссийского съезда офтальмологов. 1968, с. 272294.