Штамм 109 продуцент бактериоцина р109

Штамм 109 продуцент бактериоцина р109

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскид

Социалистических

Республик

<1771152 (61) ???????????????????????????? ?? ??????. ????????-???? (22) ???????????????? 03. 10. 78 (21) 2685277>

Опубликовано 151080. Бюллетень ¹ 38 (51)М. Кл.3

С 12 0 9/22

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 615.779. .925(088.8) Дата опубликования описания 151080 (72) Автор . изобретен и я

В.A.ÔHëèïïîâ

Полтавский медицинский стоматологический институт (71) Заявитель (541 ШТАМИ LACT08ACILL05 PLANTARUM 109

ПРОДУЦЕНТ БАКТЕРИОЦИНА P 109

Изобретение относится к области микробиологии и касается получения нового штамла — продуцента антибиотика бактериоцина, который может быть использован для бактериоцинотипирования и бактериоциногенотипнрования лактобацилл, а также в исследованиях с целью изучения генетических элементов, детерминирующих синтез бактероцина, их функциональных осо- 10 бенностей, химического состава, механизма действия.

Известен штамм Lactobacillus

acidophilus, продуцирующий бактериоцин (1) . 15

Однако спектр действия этих бактерицинов ограничивается подавлением роста ряда культур L.acidophilus, L.salivarins, L.helveficus, l..fermenti, L.pigurti u L.buchneri. 20

Целью изобретения является получение штамма Lactobacillus plantarum 109, продуцирующего бактериоцин, с более широким спектром действия.

Штамм Lactobacillus р1antarum 25

109 — продуцент бактериоцнна 8109.

Штамм Lactobacillus plantarum 109 .выделен из слюны человека.

Хранится в лаборатории культур

ВНИИА под номером 1601. 30

Культурально-морфологические при.знаки. На среде МРС-1 (48-часовая культура) представляет собой умеренно полиморфные палочки размером 2-Зк к0,5-0,8 мкм, расположенные попарнопоследовательно с закругленными концами. Спор и капсул рте имеет. Волютиновых зерен на образует. Грам-поло жительны. Неподвижны.

Ацетатный агар. Через 72 часа роста при 37 С в атмосфере СО> образует круглые беловато-желтоватого цвета колонии размером до 2 мм в диаметре, с выпуклой гладкой, блестящей поверхностью, не прозрачные, с ровным краем, мелкозернистой структурой, мягкой консистенции.

Жидкая среда МРС-1. Через 24 часа роста при 37 С образует равномерное о помутнение и небольшой аморфный осадок.

1,5Ъ-ная агаровая среда #PC-1, скошенная через 48 часов роста образует налет беловато-желтоватого цвета с гладкой блестящей поверхностью, непрозрачной, мягкой консистенции,располагающийся на поверхности среды.

Среда МРС-5. Через 24 часа роста равномерное помутнение и небольшой аморфный осадок.

771152

Физиолого-биохимические признаки.

Факультативный анаэроб. Оптимальный рост при 32-37 С. На среде МРС-2 ,растет при 15 С,не растет при 50 С. На среде МРС-2 с 0,4% типоля растет через 24 часа. Обезжиренное молоко с 5% дрожжевого автолиэата и 1% глюкозы створаживает на 2-е сутки, На среде Дейвиса створаживание и пожелтение среды на 2-е сутки.Молоко створаживает на 2-е сутки, через 14 суток содержание кислот достигает 0,4%.

Желатину не разжижает. Нитраты в нитриты не восстанавливает.Каталазу не образует.

На среде Гибсона и Абд-Эль-Малека ферментирует глюкозу без образования газа.

Ферментирует целлобиоэу, сорбит, галактоэу, мальтоэу, сахарозу, манноэу, маннит, лактозу и салицин с образованием кислоты. Рамнозу и крахмал не расщепляет.

Антагонистические свойства. Пода.вляет рост Lact.saiivarius, Lect.

jugurti, Lact. fermenti, Lact.lactis, Lact de1brueckii..

Получение бактерицина Р 109 с помощью предлагаемого штамма.

Суточную культуру L.plantarum

109 засевают уколом на чашку с

1,5%-ной агаровой средой MPC-1 и выращивают 2 суток, при 37 С в вакуумэксикаторах, в которых воздух заменен углекислым газом. Выращенную макроколонию стерилизуют парами хлороформа, после чего поверхность среды заливают вторым слоем 4 мм 0,8%-ной агаровой среды MPC-1, расплавленной и охлажденной до -46 С, смешанной с

0,5 мл 4-часовой индикаторной культуры L.jugurti 329.

После застывания среды посевы выращивают при 37 С в течение 2 суток.

Вокруг макроколонин L.plantBrum 109 наблюдается прозрачная, с нечетким краем, диаметром 30 мм зона подавления роста индикаторного штамма

L.jugurti 329.

Бактериоцин Р 109 не инактивируется трипсином, химотрипсином, пепсином, папаином, ДНК-азой, РНК-азой, лизоцимом. При 100 С не инактивируется в течение 30 мин. Бактериоцин не реплицируется при пассажах на индикаторном штамме L jugurti 329 и хорошо диффундирует в агар. Не диффундирует через целлофан.

При бактериоцинотипировании 585 культур лактобациол разных видов поЛучены следующие данные: иэ 65 культур L saiivarius 9 культур относились к первому бактериоцинотипу и 56 культур ко второму; из 16 культур L° . juguгti 1 штамм ОтнОсился к первому бактериоцинотипу и 15 культур хо второму; иэ 84 культур L.ferment1 1 штамм относился к первому и

t6

Формула изобретения

26

$0

83 культуры ко второму бактериоцинотипу; из 2 культур L,iасtis 1 штамм относился к первому и 1 ко второму бактериоцинопипу; 1 культура L.delbrueckii относилась к первому бактериоцинотипу.

420 культур L.acidophilus, L.hel„-.

veficus, L.leichmanuii, L.casci, L.planiarum, L.brevis, L.buchueri, L.cellobiosus u L..virldescens были устойчивыми к бактериоцину Р 109.

Предлагаемый штамм обладает широким спектром действия на культуры лактобацилл, что позволяет приводить бактериоцинотипирование и бактериоциногенетипирование культур L.jugurti

Е.iactis и 1 .delbrueckii.

Штамм Lactobacillus plantarum

109 — продуцент бактериоцина P 109.

Хранится в лаборатории культур

ВНИИА под номером 1601.

Культурально-морфологические признаки. На среде МРС-1 48-часовая культура представляет собой умеренно полиморфные палочки размером 2-3х0,50,8 мкм, расположенные попарно-последовательно с закругленными концами.

Спор и капсул не имеет. Волютиновых зерен не образует. Грам положительны.

Неподвижны.

Ацетатный агар через 72 часа роста при 37 С в атмосфере СО2 образует круглые беловато-желтоватого цвета колонии размером до 2 мм в диаметре, с выпуклой кладкой блестяа,ей поверхностью, не прозрачные, с ровным краем, мелкозернистой структурой, мягкой консистенции.

Жидкая среда MPC-1. Через 24 часа роста при 37 С образует равномерное помутнение и небольшой аморфный осадок.

1,5%-ная агаровая среда MPC-1, скошенная. Через 48 часов роста образует налет беловато-желтоватого цвета с гладкой блестящей поверхностью, непрозрачный, мягкой консистенции, располагающийся на поверхности среды.

Среда МРС-5. Через 24 часа роста равномерное помутнение и небольшой аморфный осадок.

Физиолого-биохимические признаки.

Факультативный анаэроб. Оптимальный рост при 32-37 С. На среде МРС-2 растет при 15 С, не растет при 50 С.На среде MPC-2 с 0,4% типоля растет через 24 часа. Обезжиренное молоко с 5% дрожжевого автолизата и 1% глюкозы створаживают на 2-е сутки. На среде Дейвиса створаживание и пожелтение среды на 2-е сутки.

Молоко створаживает на 2-е сутки, через 14 суток содержание кислот достигает 0,4%. Желатину не разжижает.

Нитраты в нитриты не восстанавливает.

Каталазу не образует. На среде Гиб771152

Составитель С.Na."þòèíà

Редактор Н . Потапова Техред Н. Бабурк а Корректор Г. Решетник

Заказ 6622/Зб Тираж 522 Подписное

ВННИП » Государ=твенного комитета СССР пс :.евам изобретений и открытий

113035, . .эсква, W-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал П:;::: Патент", ;.Ужгород, ул.Проектная,4 сона и Абд-Эль-Малека ферментирует глюкозу без образования газа.

Ферментирует целлобиозу, сорбит, галактозу, мальтозу, сахарозу, маннозу, маннит, лактоэу и салицин с образованием кислоТы. Рамноэу и крахмал не расщепляет.

Антагонистические свойства. Подавляет рост Lact.salivarius, Lact.jugurti, Lact termenti, Lact Iact!s, Lact.delbrueckii.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР ,5 по заявке 9 2594015/28-13, кл. С 12 0 9/20, 1978.