Способ диагностики менингококковой инфекции

Способ диагностики менингококковой инфекции

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

-е со, патен . -" ан но 3 биьлирт, "" .о я тена ц -,, Е

С А

ОП И »> 77I93l

Союз Соеетскик

Социалистических

Республик

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 05.04.79 (21) 2746558/28 13 с присоединением заявки— (23) Приоритет— (43) Опубликовано 30.03.82. Бюллетень № 12 (45) Дата опубликования описания 30.03.82 (51) М.Кл. А 61 В 10/ОО

Тосударстеекаык комитет

СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК Л616-07 (088.8) (72) Авторы изобретения

В. И. Покровский, Н. А. Семина, С. В. Ыабалина, И. В. Рубцов, В. С. Цветков и Г. А. Ермолин (71) 3аявители Центральный ордена Ленина институт усовершенствования врачей и Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ

МЕН И Н ГОКОККОВОИ И НФЕКЦИ И

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунохимической диагностике менингококковой инфекции.

Известен способ диагностики менингококковой инфекции путем фиксации на полистироле менингококкового антигена, добавления исследуемой сыворотки, инкубации смеси с последующим отмыванием смеси, добавлением меченых ферментом антител к иммуноглобулинам исследуемой сыворотки, инкубированием реакционной смеси, повторным отмыванием и диагносцированием наличия менингококковой инфекции по результатам реакции (11.

Однако известный способ не позволяет диагносцировать менингококковую инфекцию группы А.

Целью изобретения является диагностика менингококковой инфекции группы А. 20

Эта цель достигается тем, что в качестве антигена используют полисахаридобелковый антиген группы А с содержанием белка

18 — 20 мкг/мл, фиксацию антигена на полистироле проводят при рН 5,2 — 5,4, 4 — 5 С в течение 18 — 20 ч, смесь инкубируют при

37 — 38 С в течение 50 — 60 мин, а реакционную смесь, полученную после добавления меченых антител, инкубируют при тех же режимах. 30

Способ осуществляют следующим образом.

В параллельные ряды лунок микротитровальной плашки вносят раздельно растворы менингококкового антигена и индифферентного для данного случая белка, причем рН обоих растворов одинаков и равен

5,2 — 5,4; содержание белка в обоих растворах одинаково и равно 18 — 20 мкг/мл.

Плашки с содержанием в лунках инкубируют в течение 18 — 20 ч при 4 — 5 С.

Содержимое из лунок удаляют. Лунки промывают от несвязавшихся белков и вносят в соответствующие друг другу параллельные лунки (одна из которых сенсибилизирована менингококковым антигеном, а другая — инертным белком) исследуемые сыворотки.

Плашки инкубируют в течение 50 — 60 мин при 37 — 38 С.

Содержание из лунок удаляют и лунки отмывают от несвязавшихся сывороточных белков, после чего вносят в лунки антитела к иммуноглобулинам исследуемых сывороток, меченых ферментом.

Инкубируют плашки в течение 50 — 60 мин при 37 — 38 С.

Содержимое лунок удаляют, лунки отмывают от несвязавшихся месячных анти771931

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Техред И. Пенчко Корректор И. Оснновская

Редактор Е. Месропова

Заказ 255/165 Изд. № 121 Тираж 717 Подписное

НПО «Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений н открытий

113035, Москва, K-35, Раушская наб., д. 4/5

Тип. Харьк. фил. пред. «Патент» тел и вносят в них раствор субстрата для фермента — метки, Результаты учитывают качественно визуально по разнице в окрашивании раствора субстрата в лунках, сенсибилизированных менингококковым антигеном, и в лунках, сенсибилизированных инертным белком, и характеризуют количественно по превышению разности экстинкций в этих двух лунках ошибок измерения используемого спектрофотометрического устройства.

Предлагаемый способ позволяет выявлять в сыворотках больных антитела к эндемическому менингококку группы А в количествах, менее чем 0,01 мкг/мл.

Способ диагностики менингококковой инфекции путем фиксации на полистироле менингококкового антигена, добавления исследуемой сыворотки, инкубации смеси с последующим отмыванием смеси, добавлением меченых ферментом антител к иммуноглобулинам исследуемой сыворотки, инкубированием реакционной смеси, повторным

5 отмыванием и диагносцированием наличия менингококковой инфекции по результатам реакции, отличающийся тем, что, с целью диагностики менингококковой инфекции группы А, в качестве антигена ис10 пользуют полисахаридобелковый антиген группы А с содержанием белка 18 — 20 мкг/мл, фиксацию антигена на полистироле проводят при рН 5,2 — 5,4, 4 — 5 С в течение 18—

20 ч, смесь инкубируют при 37 — 38 С в те15 чение 50 — 60 мин, а реакционную смесь, полученную после добавления меченых антител, инкубируют при тех же режимах.

Источник информации, принятый во

20 внимание при экспертизе:

1. Frach С. J. Infection Diseases, 136, 1977.