Способ получения липосом

Способ получения липосом

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П Й O А

НИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Сюветскик

Соцналнстнческнк

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к ввт, саид-ву— (22) Заявлено 22Л177 (21) 2548605/28-13 (5t)М. КЛ. с присоединением заявки ¹

А 61 К 9/00

Государственный комитет

СССР но делам изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 301080. Бюллетень № 40

15З) ИЖ 615. 45: 615.7(088,8) Дата опубликования описания ЗЦ1080 (72) Авторы изобретения

М.В. Штейнгарт, В.Н. Васильченко, И.А. Тихонова, И.Г. Зайцева, И.С. Гусева, О.И. Самодаева и Н.A. Бугрим

Физико-технологический институт низких температур

AH Украинской ССР и Харьковский научно-исследовательский физико-фармацевтический институт (71 ) За яв ите ли (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИПОСОМ

Изобретение относится к области медицины, а именно к химико-фармацевтической промышленности.

Известен способ получения липосом, заключающийся в том, что липиды раст- 5 воряют в органическом растворителе, например в хлороформе, и смешивают с водным раствором, содержащим лекарственные вещества, полученную смесь обрабатывают ультразвуком с последую- lp щим центрифугированием и хроматографированием для концентрирования липосом и удаления невключившихся лекарственных веществ f1) .

Однако известный способ не позволяет получить высококонцентрированные дисперсии липосом, так как количество включаемого вещества составляет 7Ъ.

Целью изобретения является увеличение количества включаемого вещества.20

«Эта цель достигается тем, что в качестве липидов используют лецитин, который растворяют в смеси растворителей, а именно фреона 12-фреона 11 при соотношении 1г1, хлористого эти- 25 ла-фреона 12 — 1:5, хлористого этилахлороформа-фреона 12 — 1:1:10. Полученный раствор лецитина барботируют в водный раствор лекарственного вещества, преимущественно инсулина. ЗП °

Пример 1. 1 г яичного лецитина растворяют на холоде в 10 мл хлористого этила в баллоне, снабженном распылительной форсункой. аллон заполняется 50 г фреона 12. Полученную смесь барботнруют в 10 мл раствора инсулина с концентрацией

40 ме/мл при температуре 20оС и интенсивном помешивании магнитной мешалкой. Молочно-белую дисперсию озвучивают ультразвуковым диспергатором при частоте 22 кГц в течении

10 мин до появления голубой опалисценции смеси. Лигосомы осажпаются центрифугированием при 105000 д в течение 1 ч. Образованные липосоьвя, как показывает электронная микроско- пия, имеют размеры 300-500 А.

Пример 2. 70 мг яичного лецитина и 3 мг холестерина растворяют в 5 г фреона 11 в баллоне, снабжен-. ном распылительной форсункой. Баллон заполняют 5 г фреона 12. Полученную смесь барботируют в 10 мл раствора трис-HCC c PH-8, содержащего рубомицин с концентрацией 2 мг/мп. ДалЬше, как в примере 1. Полученные липосомы имеют размеры 240-450 А.

П р И м е р 3. 1 г яичного лецитина, 0,1 г холестерина, 0,1 r кар 774555

4, .р

Формула изобретения

Составитель Т. Павлович

Редактор Г. JIpycoaa Техред Е.Гаврилешко Корректор Г. Григорук

Тираж 673 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.; д. 4/5

Заказ 7579/3

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 диолипина растворяют на холоде в си, содержащей 0,125 г гидрокортизона ацетата, 5 г хлористого этила и

5 г хлороформа, в баллоне, снабжениом распылительной форсункой. Баллон заполняют 50 г фреона 11. Полученный раствор медленно барботируют в 10 мл

G,9 N раствора NaC0 и дальше, как в примере 1.

Пример 4. 200 мг яи ного ле- цитина, 8 мг холестерина растворяют на холоде в 10 г хлористого этила в баллоне, снабженном распылитель.ной форсункой. Баллон заполняется 50 r фреона 12. Полученную смесь медленно барботируют в 30 мл буферного раствора трис-HCP с РН-8, содержащего 5-фтор-урацил с концентрацией 2 мг/мл, при энергичном перемешивании маг-нитной мешалкой. Исключая стадию обработки ультразвуком, отделяют липссомы от невклйчившегося 5-фтор-урацила хроматографией на колонке с сефарозой 4Б. Как показывает электронная микроскопия, липосомы имеют размеры

300-ЗОО К.

Приведенные примеры показывают, что предлагаемый способ получения липосом позволяет использовать низкокипящие смеси растворителей, что приводит к быстрому удалению их из раствора биологически активного вещества позволяет получить 1ОЪ-ную дисперсию липосом в растворе, что значительно увеличивает количество включаемого вещества до 26%. Кроме этого, предлг- гаемый способ позволяет включить в липосомы различные лекарственные вещества, в том числе и нерастворимые в воде. Способ не требует использова ния сложного оборудования и дает возMoKHocTb получить высококонцентрированные дисперсии липосом в промыапенных масштабах.

Способ получения липосом, содержащих лекарственные вещества, путем смешения раствора липидов в хлорофор15 ме с водным раствором лекарственных веществ, с последующим озвучиванием и центрифугированием, о т л и ч.а ю— шийся тем, что, с целью увеличения количества включаемого вещества, 20 в качестве липидов используют лецитин, который растворяют в смеси раст, ворителей, а именно фреона 12-фреона

11 при соотношении 1:1, хлористого этила-фреона 12 — 1:5, хлористого

2 этила-хлороформа-фреона 12 — 1:1.:10 и барботируют в водный раствор лекар-. ственного вещества, преимущественно инсулина.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент Франции Р 2221122, кл. A 61 К 9/ОО, опублик. 1974 (прототип).