Способ консервирования спермы рыб
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Согоз Советскик
Социалистических
Республик
ОПИСАНИЕ,ц, ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИ ИТЕЛЬСТВУ (б1) Дополнительное к авт. саид-ву (2".) ЗаЯвлено 040179 (2t) 2710095/28-13 (5 )м
3 с присоединением заявки № (23) Приоритет
A 01 К 61/00
Государственный комитет
СССР оо делам изобретеннй и открытий
Опубликовано 151280. Бюллетень ¹ 46
Дата опубликования описания 151280 (53) УДК 639. 3., 034. 2 (088 8) (72) Авторы изобретения
Н.С.Пушкарь, A,Ì,Áåëoóñ, A.Н.Новиков, Е.Ф.Копейка и С.Т.Олейник
Институт проблем криобиологии и крномедицины
AH УССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ СПЕРМЫ РЫБ
Изобретение относится к рыборазведению, а именно к способу консервирования спермы рыб, в частности осетровых, и может быть использовано при воспроизводстве и селекции новых пород рыб.
Известен способ консервирования спермы рыб, заключающийся в смешивании ее с защитным раствором, содержащим трис- НСг, буфер, яичный желток и криопротектор — диметилсульфоксид, и в последующем замораживании (1J .
Данный способ имеет недостаток, !5 состоящий в том, что при замораживании гибнет большая часть клеток (до
30-40Ъ), вследствие чего нельзя использовать для замораживания сперму с активностью ниже 80t. 20
Целью изобретения является повышение сохранности клеток в процессе консервирования и повьвггенне производительности процесса замораживания.
Для достижения этой цели в защитный раствор вводят тонкодисперсный кристаллический иодид серебра, при этом замораживание осуществляют сначала до минус 35-45 С со скоростью 30
2 снижения 8-12оС/мин, а затем до минус 1960С со скоростью 130-150 С/мин, Кроме того, компоненты защитного раствора берут в следующем соотношении, Ъг диметилсульфоксид 18-25, О, 1 н.трис- НСс буфер 65-75 яичный желток 7-10, кристаллический иодид серебра 0,004-0,0008.
Способ осуществляют следующим образом, Сперму разбавляют в соотношении
1i1 раствором, содержащим трис- НС6 буфер, яичный желток, криопротектор (диметилсульфокснд) и тонкодисперсный кристаллический иодид серебра.
После этого разбавленную сперму разливают в ампулы и помещают в замораживающую установку для охлаждения со скоростью 10-12@С/мин до минус 3545 С, а затем со скоростью 130
150оС/мин до температуры хранения минус 196оc.
Пример . От самца севрюгн после гипофизарной инъекции получа ют сперму с начальной активностью не ниже 70%. К 100 мл спермы приливают 100 мл раствора, состоящего из
32,5 мл раствора триса (24,33 гтрис-(оксиметил)-аминометана B
1000 мл Н О),32,5 мл 0,1 н. НОВ 10 ма
786947
1. Составитель Е.Лебедюк
Редактор T.Êèíü Техред A.Ùåïàíñêàÿ КорректорГ.Решетник
Заказ 8204/1 Тираж 723 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП Патент, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 желтка куриного яйца, 2,5 мл диметилсульфоксида,и 0,0004 г тонкодисперсного кристаллического иодида серебра.
После перемешивания сперму разливают по ампулам емкостью 1 мл, которые помещают в замораживающую установку и охлаждают со скоростью 10 C/мин до минус 40 С, а затем со скоростью
150 С/мин до температуры хранения минус 1.96 С.
Технико-экономический эффект способа заключается в повышении сохраннос- 0 ти клеток при замораживании (активность деконсервированной спермь1 повышается в 1,4 раза), кроме того, для замораживания может быть использована сперма с исходной активностью 70%. 15
При данном способе консервирования повышается производительность работы, так как длительность процесса замораживания сокращается на 403 эа счет высоких скоростей охлаждения.
Формула изобретения
1. Способ консервирования спермы рыб путем смешивания ее с защитным раствором, содержащим трис- НС буфер, яичный желток и криопротектордиметилсульфоксид,и последующего замораживания,отличающийся тем,что,с целью повышения сохранности клеток в процессе консервироваHHR и повышения,.%,ïðîèýâîäèòåëüíîñòè замораживания, в защитный раствор вводят тонкодисперсный кристаллический иодид серебра, при этом замораживание осуществляют сначала до минус 35-45оС со скоростью снижения 8-12 С/мин, а о затем до минус 196ОС со скоростью снижения 130-150 С/мин.
2. Способ по и. 1, о т л и ч а ющ и. и с я тем, что компоненты защитного раствора берут в следующем соотношении, Ъ:
Диметилсульфоксид 18-25
О,lн.трис-НС8 буфер 65-75
Яичный желток 7-10
Кристаллический иодид серебра 0,004-0,0008, Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Лвторское свидетельство СССР
9 591164, кл. A 01 К 61/00, 1976.