Способ получения 0-диоксифенилаланина
Иллюстрации
Показать всеРеферат
ОПИСЛИИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик
< 1789514
Ф
/ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 12,1278 (21) 2694783/23-04 с присоединением эаявки ¹ (23) Г1риоритет
Опубликовано 231 80, Бкзллетень № 47
{51) М. Кп.
С 07 С 101/72 с
Государственный комитет
СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 547 233. .07(088.8) Дата опубликования описания 30. 12. 80 (/
„ ; о-., I
Д.И.Стом, С.Н.Суслов и В.H.Êóðî÷êèí
1г 3 з -,-...
/ " — - -.-:. — . — ., t
Научно-исследовательский институт биологии йрй "Иркутском государственном университете им. A.А.ЖдайОва--(72) Авторы иэобретения (7! ) Заявитель (54 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ О-ДИОКСИФЕНИЛ-АЛАНИНА
Изобретение относится к способу получения аминокислот, а именно о-диоксифенил-аланина.
Известен способ получения0-диоксифенил-аланина из пирокатехина и ами- 5 ноуксусной кислоты под действием -тирозиназы (1) .
Недостатком этого способа является необходимость выделения и очистки используемого фермента, что дела- 10 ет способ трудоемким и дорогостоящим.
Цель изобретения — упрощение процесса.
Указанная цель достигается тем, что на смесь пирокатехина и аминоуксусной кислоты действуют ацетоновыми экстрактами препаратов нителлы, или подсолнечника, или картофеля. для получения ацетоновых препара- 20 тов, содержащих фенолоксидазы, можно использовать отходы пищевой промышленности.
Взаимодействие пирокатехина с аминоуксусной кислотой в присутствии 25 ацетоновых экстрактов осуществляют как правило, в ацетатном буфере при
22 26оС.
Пример 1. Ацетоновый препарат получают следующим образом. На- 30 веску растения (сырой вес 30 г) помещают в гомогенизатор, заливают трехкратным объемом (90 мл) охлажденного ацетона (-15-20 C), размельо чают в течение 2 мин на гомогенизаторе. Суспензию фильтруют на воронке Бюхнера с отсасыванием. Осадок вновь переносят в гомогенизатор и снова перемешивают в течение 2 мин в 90 мл ацетона, отфильтровывают.
Выход препарата из Nite!!а sp. состанляет 20-25%, картофеля 20-25%, подсолнечника 22-25%.
Пример 2. В реакционный термостатируемый сосуд с энергичным перемешиванием (1000-1300 об/мин) помещают смесь пирокатехина аминоуксусной кислоты и ацетатный буфер.
Затем в эту смесь, имевшую температуру 21-22о С и общий объем 100 мл, добавляют 1 г ацетонового препарата.
Через 15-20 мин в среду добавляют соляную кислоту до рН.-1,0 (по Конго), И=влечение 3,4-лиоксифенил-L-аланина из реакционной смеси ведут известными способами, например при помощи ионообменных смол. Зависимость выхода 3,4-диоксифенил-L-аланина от рН раствора (с=220 С, соотношение пирокатехин-аминоуксусная кислота
789514
0,1:0,15 м, 1 г препарата на 100 ил
Раствора) представлена в табл, 1.
Зависимость выхода 3,4-дноксифенил -аланина от соотношения пирокатехинаминоуксусная кислота (pH 5,8, 1 г ацетонового препарата на 100 мл раствора, t=22 C) представлена в табл. 2.
Зависимость выхода 3,4-диоксийенилl.-аланина от количества ацетонового препарата и, его природа (рН 5,8, Таблица 1
5,0
6,0
5,5
7,2
4,2
3,0
8,8
9,4
РН
Выход от исходного
% 22,8
38,2 39,4 32,5 30,0 24,1
29,7
Зб,б
Таблица 2
Концентрация пирокатехина, м 0,01 0,1
0,1
0 5
0 5
0 5
Концентрация аминоуксусной кислоты, м 0,005 0,1
0,2
0,5 0,25 1,0
Соотношение 1/0,5 1/1
1/1 1/1,5 1/2
1/2
Выход от исходного, Ъ 26,29 31,7 38,0 30,6 22,4 20,5
Таблица3
Количество ацетонового препарата, г/л
1,0 5,0 10,0 50,0
0,1
0,5
Выход от теоретического для препарата из картофеля, Ъ. 20,7 22,4 27,7 31,3 30,8
30,5
Выход от теоретического для препарата иэ Nitella sp., ф 13,2
24,8 28,9 28,8 26,1
19,7
Выход от теоретического для препарата из подсолнечника, %
33,8 32,5 32,5
29,0
30,0
25,3
Формула изобретения
Тираж 495 Подписное
ВНИИПИ Заказ 8972/25
Ужгород, ул. Проектная, Филиал ППП "Патент", г.
Способ получения о-диоксифенилаланина действием на пирокатехин и аминоуксусную кислоту фенолоксидазой, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса, в качестве фенолоксидазы используют
t=22,6, соотношение пирокатехин-аминоуксусная кислота 0,1:0,14) представлена в табл. 3.
Как видно из табл. 1-3, наиболее благоприятными условиями для получения 3,4-диоксифенил-аланина являются рН 5,0-7,0, соотношение пирокатехин-аминоуксусная кислота от 1/11/2 и количество препарата 5-10 г/л. ацетоновые экстракты препаратов нителлы, или подсолнечника, или картофеля. ь, Источники информации, принятые во внимание при экспертизе д) 1. Патент СИА Ю 3791924, кл. 195-29, 1970.