Способ получения 14 @ -оксиандрост-4-ен-3,17-диона

Способ получения 14 @ -оксиандрост-4-ен-3,17-диона

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 14о6-ОК- СИАНДРОСТ-4-ен-3,17-ДИОНА формулыР'.xsL_^rtV^о^^-'^бнпутем микробиологического гидроксиг лирования андрост-4-енч'—3,17-диона в водной среде при температура 27- 28''с, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода целевого продукта, процесс проводят с использованием культуры Curvularia lunata при концентрации андрост-4-ен- 3,17-диона 0,5-1,5 г/л.2. Способ ПОП.1, отличающийся тем, что используют раствор андрост-4-ен-З,17-диона в спирте или диметилформамиде.(Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) ()!) (5)) 4 С 07 ) )3/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCKOIVlV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (2)) 2785625/23-04 (22) 26.06.79 (46) 30.12.88. Бюл. )) 48 (7!) Всесоюзный научно-исследовательский химико-фармацевтический институт им. С.Орджоникидзе (72) Л,А.Краснова, О.В.Мессинова, В.И.Баюнова, Т.С.Колыванова. и Г.С,Гриненко (53) 547.689.6.07(088.8) (56) Sondheimer. F. and others. Synthesi.s of Bufadienolides The Synthes1s of Bufali.n and Resibufogenin.

J.Am. Chem. Soe. 91,1229, 1969.

Gabor А. and Wix D.Y. Transformation of Stегоids by Absidia orchidis. I Hydroxylation of androst4 ene — 3,17 — dione. Acta chim.

Acad. Sci. Hund 55,99. 1968.

Singh et al Transformation of

stегоids Canadian Tournal of Microbiology, 13,1273, 1967. (54) (57) 1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ )4 К-ОКСИАНДРОСТ-4-ен-3,! 7-ДИОНА формулы

0 путем микробиологического гидрокси-. лирования андрост-4-ен. -3,)7-диона в водной среде при температуре 2728 С, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода целе-. вого продукта, процесс проводят с использованием культуры Curvularia

1ипаеа при концентрации андрост-4"ен3,17-диона 0,5-1,5 г/л.

2. Способ по п.l о т л и ч а юшийся тем, что используют раствор андрост-4-ен-3,17-диона в спирте или диметилформамиде.

801517

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения 14 gà— оксиандрост-4-ен-3,17-диона формулы

О он который находит применение в синтезе гормонов.

Известен способ получения 14 Ы.-оксиандрост-4-ен-3,17-диона, заключаю.щийся в том, что 14 -оксикортексолон подвергают взаимодействию с висмутатом натрия в разбавленной уксусной кислоте. Выход целевого продукта — 73%. Однако, используемое в этом способе исходное вещество — 14 о6-оксикортексолон малодоступен, так как он является побочным продуктом производства 11 Р --оксикортексолона и выход его не превышает 5-10%.

Известны также способы микробиоло-25 гического 14 oL-гидроксилирования андрост-4-ен-3,17-диона. Так, под дейст« вием культуры Absidià orchidis образуется смесь 6Р, -7, -lloL- и 14о1; оксипроизводных, однако в ней преобладает продукт 7<-оксистероид.

Наиболее близким к описываемому является способ получения 14оС-оксиандрост-4-ен-3,17-диона, заключающийся в том, что андрост-4-ен-3,17дион подвергают гидроксилированию с использованием культуры M.gri.sco-cyanus в водной среде при температуре

25-28 С. Выход целевого продукта—

10%.

Недостатком этого способа является низкий выход целевого продукта.

Цель изобретения — повышение выхода целевого продукта.

Поставленная цель достигается описываемым способом получения 14 оС -оксиандрост-4-ен-3,17-диона, заключающимся в том, что андрост-4-ен-3,17дион при концентрации 0,5-1,5 г/л подвергают микробиологическому гидроксилированию с использованием культу"50 ры Curvularia lunata в водной среде при температуре 27-28 С. Выход целевого продукта -35-70%

Андрост-4-ен-3,17-дион предпочтительно используют в виде раствора в 55 спирте или диметилформамиде.

1

Отличительным признаком способа является использование культуры Сигvularia lunata и андрост-4-ен-3,17диона в концентрации 0,5-1,5 г/л.

Следует отметить, что только в пределах укаэанной концентрации соединения процесс, протекает. однозначно.

Увеличение концентрации исходного соединения приводит к снижению выхода и качества продукта.

Следует отметить, что культура

Curvularia lunata ранее использовалась только для 11 8-гидроксилирования соединений прегнанового ряда, например кортексолина и 16 еЕ-метилкортексолона. Использование этой культуры для гидроксилирования соеди- нения адростанового ряда .в литературе не описано и полученный эффект при этом является неожиданным.

Пример 1. Культуру Curvularia lunata поддерживают íà агаровых косяках. 1 мл водной суспензии мицелия вносят в колбу емкостью 0 5 л со 100 мл водной среды (рН 6,0-6,1) следующего состава, г/л:

Caxaposa 30

Дрожжевой автолизат 2,5

Азотнокислый натрий 2

Фосфорнокислый аммоний двузамещенный 3

Фосфорнокислый калий двузамещенный 1

Хлористый калий О, 5

Сернокислый магний 0,5

Выращивание мицелия проводят на качалке (220 об/мин) при 27-28 С.

Через ЗО ч выращивания мицелия в колбу емкостью 0,5 л со 100 мл среды того же состава переносят стерильно

3 мл культуры и продолжают выращивание мицелия Curvularia lunata еще в течение 24 ч. Затем переносят по 7 мл выросшего мицелия в каждую иэ 30-ти колб (емкостью 0,5 л) со 100 мл среды указанного состава, далее прбдолжают выращивание культуры в течение

24 ч, после чего мицелий иэ каждой колбы отделяют от среды фильтрованием, промывают стерильным фосфатным буфером (рН 6,0-6, 1) и переносят в колбу (емкость 0,5 л) со 100 мл стерильного фосфатного буфера.

Составитель . !

Редактор Н. Сильнягина Техред M.Дидык

Корректор В, Бутяга

Заказ 7104 Тираж 348 Подпис но е

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., a. 4/5, Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

801517

Затем в каждую колбу вносят по кристаллизуется, отделяют 2,2 г (70K)

2 мл раствора андрост-4-ен-3,17-дио- целевого продукта, т.пл. 250-252 С на, приготовленного растворением 3 г (из метанола) (о 1 > + 178 (с=1),сп, (0,0105 г/м) в 60 мл этанола. Пример 2. В условиях примеГидроксилирование проводят при 27- ра ) с использованием культуры CurvuO

28 С ° laria lunata и 40 мл раствора, приготовленного из 2 г (0,007 г/м) исходКонтроль за ходом гидроксилирова- ного вещества и 40 мл этанола, провония осуществляют методом ТСХ на плас- 10 дят гидроксилирование и прерывают его тикках силуфола UV 254 с использо- через 66 ч, когда в среде еще имеетванием системы хлороформ-ацетон-цик- ся исходный стероид. Выделение целелогексан (6:3:1). Гидроксилирование вого продукта проводят в условиях ведут до исчезновения исходного веще- примера 1. Выделяют 1,6 г продукта в ства. Через 40 ч встряхивания обье-:15 виде масла, которое обрабатывают, как диненную культуральную жидкость (3 л) описано в примере 1. Получают 0,74 г вместе с промывными водами трижды (35X) целевого продукта, т.пл. 245экстрагируют хлороформом (1,7 л, 247 С (из метанола) ° (+)66 (Сы), 0,9 л, 0,9 л). Хлороформный экстракт спирт). промывают водой (3х0,5 л), сушат суль-20 Мицелий промывают хлороформом. По фатом натрия и упаривают, получают данным ТСХ экстракт содержит исходное

3,6 г продукта в виде масла, которое вещество и небольшое количество целепосле кипячения с гексаном (2х)0 мл) вого продукта.