Способ получения 7 -/д-2-амино-2-(низ-ший алкилсульфониламинофенил)-ацетиламино/- 3-метокси (или хлор) -3цефем-4-карбоновыхкислот или их солей

Способ получения 7 -/д-2-амино-2-(низ-ший алкилсульфониламинофенил)-ацетиламино/- 3-метокси (или хлор) -3цефем-4-карбоновыхкислот или их солей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Союз Советских

Социалистических

РЕСНУбЛИК

<>803862 (61) Дополнительный к патенту (51) М. КлЯ (22) Заявлено 1?08,77 (21) 2388518/2511695/

/23-04 (23) Прнорнтет 180876(32) 2pp 875

С 07 D 501/06

С 07 0 501/59//

A 61 К 31/545

Государстаенный комнтет

СССР но делан нзобретеннй н открытнй (3I ) 10822/75 (33) Швейцария (И) УДК 547 ° 869. . 1.07 (088.8) Опублнковано07.02.81. Бюллетень Jта 5

Дата опубликования оннсання 070281

Иностранцы

Рене Видеркер и Ханс Биккель (Швейцария) P2) Авторы изобретение

1 i ! ,Ь ! (Иностранная фирма

"Циба-Гейги АГ" (Швейцария ) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 7 - (D-2-АМИНО-2-(НИЗШИЙ

АЛКИЛСУЛЬФОНИЛАМИНОФЕНИЛ)-AUETHJIANHHOJ-3—

-МЕТОКСИ(ИЛИ ХЛОР) -3-ЦЕФЕМ-4-КАРБОНОВЫХ

КИСЛОТ ИЛИ ИХ СОЛЕЙ

Изобретение относится к способу получения новых химических соединений: 7 (-D-2-амино-2-(низший алкилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси(или хлор)-3-цефем-4-карбоновых кислот, где низший алкил содержит до 4 атомов углерода, или их солей, обладающих физиологически активными свойствами.

Известен способ получения 3-заме- 1О щенных 7-ациламидо-3-цефем-4-карбоновых кислот ацилированием соответствующей 3-замешенной 7-амино-3-цефем-4-карбонсзой кислоты, обладающих физиологически активными свойства Е13Целью изобретения является получение новых цефалоспориновых соединений, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм.

Эта цель достигается способом получения 7 - (D-2-амино-2-(низший алкилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси(или хлор)-3-цефем-4-карбоновых кислот, где низший алкил содержит до 4 атомов углерода, или их солей, который заключается в том, что 7 — амино-3-метокси(или хлор)-3-цефем-4-карбоновую кислоту, где 4-карбоксильная группа может быть защищена эфирной группой, такой. как триметилсилильная или дифенилметильная, и 7 -аминогруппа может быть защищена в виде силиламиногруппы, подвергают ацилированию соответствующей D-2-амино-2-(низший алкилсульфониламинофенил)-уксусной кислотой, где 2-аминогруппа может быть защищена такой группой, как трет.-бутоксикарбонильная или алкоксикарбонилзамещенная изопропилиденовая, или ее смешанным ангидридом, или соответствующей 2-азидо-2-(низший алкилсульфониламинофенил) -уксусной кислотой, или ее смешанным ангидридом в среде органического растворителя в присутствии основания при температуре от -20 до о

+40 С или энзиматическому ацилированию соответствующей 2-амико-2-(низший алкилсульфониламинофенил)-уксусной кислотой, или ее низшим алкиловым эфиром в водной среде при температуре от 20 до 50 С и рН среды

5-9 и в полученном соединении удаляют защитные группы путем обработки трифторуксусной или муравьиной кислотой, и/или азидогруппу восстанавливают в аминогруппу путем катали— тического гидрирования и выделяют

803862 целевой продукт в виде свободной кислоты или ее соли.

Энзиматическое ацилирование преимущественно ведут под действием микроорганизмов рода Pseudomonas melano,genum АТСС 17808.

Пример 1. а) К суспензии

0,764 r тонкоизмельченного гидрохлорида 7Р-амино-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты, содержащего

1,";оль диоксана, в 10 мл абсолютного хлористого метилена прибавляют в атмосфере аргона и при комнатной температуре 1,04 мя бис-(триметилсилил)ацетамида (прибавляют в течение приблизительно 10 мин) и перемешивают в течение 45 мин. 15

К охлажденному до -15 С раствору о

0,896 г 0-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)уксусной кислоты и 0,29 мл 4-метилморфолина в 10 мл абсолютного хлорис- щ того метилена прибавляют в атмосфеge аргона 0,34 мл изобутилового эфира :.лормуравьиной кислоты и оставляют реагировать еще 15 мин. К по- лученному смешанному ангидриду прибавляют по каплям при -10 С вышеуказанный силилированный исходный продукт и реакционнчю смесь перемешивают по

15 мин при -10,0 С и комнатной температуре. Затем разбавляют 100 мл этилового эфира уксусной кислоты и промывают три раза насыщенным водным раствором хлорида натрия. Водные фазы экстрагируют еще раз этиловым эфиром уксусной кислоты, а объединенные органические растворы высушивают при помощи сульфата магния и освобождают при пониженном давлении .от растворителя. Остаток очищают на силикагеле смесью хлористого метилена и этилового эфира уксусной кислоты 40 (1:1) в качестве элюента. мешивают 1,5 ч при 0 С. Приготовленную смесь перемешивают со 100 мл

gg 1/3 М фосфатного буфера (pH 7) и из

Получают согласно тонкослойной хроматографии однородную 7) - fD-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2†(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновую кислоту в виде аморфного продукта. Тонкослойная хроматограмма (силикагель; идентификация при гоМощи нингидрина): ВГ 0,63 (система: втОр.-бутанол-уксусная кислота-вода, 67:10:23). Уф-спектр (в 95%-ном водыор этаноле):Л 273 нм (F =7100) . ь ИК-спектр (в хлористом метилене): характерные полосы при 3380, 2930, 1765, 1685, 1605, 1485 и 1160 см

То же самое соединение можно получить и следующим образом. а ) К суспензии 6,22 г (27 моль)i тонко из-.мельченной 7 -амино-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты в 120 мл абсолютного хлористого метилена прибавляют в атмосфере аргона и при комнатной температуре 7,52 мл бисвЂ(триметилсилил)-ацтамида (прибавлю. ют в течение приблизительно 10 мин) и перемешивают в течение 45 мин.

К охлажденному до -15 C раствору

10,33 r (30 моль) D 2-трет.-бутилок— сикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-уксусной кислоты и Ç,ЗЗмл

4-метилморфолина в 180 мл абсолютного ацетонитрила прибавляют в атмосфере аргона 3,93 мл изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты и оставляют реагировать еще 25 мин. K полученному смешанному ангидриду прибавляют по каплям при -15 С вышеуказанный силилированный исходный продукт и реакционную смесь перемешивают 2 ч при 0 С, о а 30 мин при комнатной температуре.

Затем удаляют в ротационном выпарном аппарате растворитель, а остаток растворяют в 400 мл этилового эфира уксусной кислоты и промывают три раза насыщенным водным раствором хлорида натрия. Водные фазы экстрагируют еще раз этиловым эфиром уксусной кислоты. Объединенные органические растворы высушивают при помощи сульфата магния и освобождают при пониженном давлении от растворителя. Остаток очищают на силикагеле смесью хлористого метилена и этилового эфира уксусной кислоты (1:1) в качестве элюента.

Получают согласно тонкослойной хроматографии однородную 7 - (0-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновую кислоту в виде аморфного продукта, который кристаллизуют из смеси хлористый метилен — простой диэтиловый эфир (1:3), т. пл. 140 С (с разл).

Физико-химические данные продукта идентичны с данными продукта из примера 1а). а ) К суспензии 891 мг 7-амино-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты в 10 мл абсолютного хлористого метилена прибавляют 1,23 мл 0-бисвЂ(триметилсилил) -ацетамида и перемешивают 1 ч при 23 С (раствор А).

К раствору 1,58 r 0-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-уксусной кислоты и

0,52 мл й-метилморфолина в 20 мл ацетонитрила прибавляют при температуре от -10 до -15 С 0,58 мл изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты и перемешивают 30 мин при этой температуре (раствор Б).

К охлажденному до -25 С раствору

Б прибавляют при пропускании азота быстро раствор А, а затем смесь пересмеси удаляют в вакууме органический растворитель. Для удаления нейтральной части оставшийся водный раствор промывают уксусным эфиром. Слой водной фазы покрывают слоем уксусного

803862 эфира, подкисляют 85%-ной фосфорной кислотой до рН 2, охлаждают и насыщают хлоридом натрия. После разделения фаз и дополнительного экстрагирования уксусным эфиром получают экстракт, который после высушивания при помощи сульфата натрия и выпарива

1 ния дает в тонкослойной хроматограме однородную 7 — (0-2-трет.-бутилоксикарбониламино -" -(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновую кислоту в виде светло-бежевой пены. Соединение можно кристаллизовать согласно примеру

1а

Исходный продукт можно получить следующим образом.

К суспензии 1,17 г 7-феноксиацетиламино-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты и 1,45 мл N,N-диметиламилина в 5,5 мл абсолютного хлористого метилена прибавляют в атмосфере азота при 20 С 35 мл диметилдихлорсилана, а затем перемешивают

30 мин при этой температуре. Прозрачо ный раствор охлаждают до -20 С, прибавляют к нему 0,8 г пентахлорида фос фора и перемешивают 30 мин. При этой температуре прибавляют в течение 2-3 мин предварительно охлаж денную до -20 С смесь 0,45 мл N,N-диметиланилина и 0,45 мл н-бутанола, а затем прибавляют быстро 10 мл предварительно охлажденного до -20 С н-бутанола, после чего перемешивают

20 мин при -20 С, а 10 мин без охо лаждения. При приблизительно -10 С приливают 0,2 мл воды, перемешивают сначала 10 мин в ледяной бане (приблизительно О С), затем прибавляют

5,5 мл диоксана, а после перемешивания в течение 10 мин при О С прибав ляют по порциям приблизительно

2,25 мп три-н-бутиламина до тех пор, пока рН разбавленных водой проб не достигнет постоянной величины 3,5.

После перемешивания в течение 1 ч при О С осадок отфильтровывают, промывают диоксаном и перекристаллизовывают из смеси вода-диоксан. Полученный гидрохлорид 7 -амино-3-метокI си-3-цефем-4-карбоновой кислоты содержит 1 моль диоксана и имеет т. пл. выше 300 С. Тонкослойная хроматограмма: Rf 0,17 (силикагель; система: н-бутанол-тетрахлорметанметанол-муравьиная кислота-вода, 30:40:20:5- 5) .

Пример 2. а)Аналогично примеру 1а получают 7 - (0-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-хлор-3-цефем-4-карбоновую кислоту путем обработки смешанного ангидрида, полученного из 0,448 r D-2-трет;--бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-уксусной кислоты и 0,17 мп иэобутилового эфира хлормуравьиной кислоты в присутствии 0,14 мл 4-метилморфолина и 5 мп хлористого метилена при -15 С, трио метилсилиловым эфиром 7з-амино-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты, 5 который получен иэ 0,24 г 7(-амино-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты и> 0,5 мл бис-(триметилсилил)—

-ацетамида в 10 мл хлористого метилена. а ) Аналогично примеру 1а из смешанного ангидрида, полученного иэ . 1,55 r (4,5 моля) 0-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфо(ниламинофенил)-QKcgjcHQA кислоты н . 0,6 мп иэобутилового эфира хлорму15 равьиной кислоты в присутствии 0,5 мл

4-метилморфолина и 25 мл ацетонитри ла при -15 С, путем обработки его триметилсилиловым эфиром 7(3-амино-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты, который получен из 0,88 r (3,75 моль) 7 -амино-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты и 1,05 мп бис-(триметилсилил)-ацетамида в 20 хлористого метилена, получают

7)-(0-2-трет.-бутилоксикарбониламинс—

-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино1-3-хлор-3-цефем-4-карбоновую кислоту.

Тонкослойная хроматограмма (силикагель идентификация при помощи.

30 нингидрида), Rf 0,68 (система: втор.—

-бутанол-уксусная кислота — вода, 67:10:23) . ИК-спектр (в хлористом метилене): характерные полосы при

3390, 2930, 1775, 1685, 1485 и

35 1160 см. .

Исходный продукт можно получить следующим образом. б) 1,59 г (4 моль) дифенилметилового эфира 7 -амино-3-хлор-3-це4О фем-4-карбоновой кислоты растворяют при О С в 5 мл трифторуксусной кислоты и перемешивают в течение 15 мин.

Прозрачный светло-желтый раствор разбавляют 20 мп толуола, а затем

45 иэ него удаляют при пониженном давлении избыток трифторуксусной кислоты и толуола. Остаток растворяют в приблизительно 20 мл смеси вода этилацетата (1:1), отделяют от органической Фазы, a KHcxy Bo+Hye Фазу доводят 20%-ным триэтиламином в метаноле до рН 3,0. Светло-желтый осадок отфильтровывают, промывают этил- ацетатом и простыМ диэтиловым эфиром и высушивают в высоком вакууме. При этом получают 320 мг 7 -амино-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты в виде светло-желтого аморфного порошка..

Тонкослойная хроматограмма: Rf 0,08 (силикагель, н-бутанол-уксусная кисщ) лота-вода, 67:10:23).

Пример 3. К охлажденному до -15 С раствору 3,1 г (9 моль)

0-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2†(3-метилсульфониламинофенил)-уксусной кислоты и 1,0 мл 4-метилморфо.803862 лина в 50 мл абсолютного ацетонитри,ла прибавляют в атмосфере аргона в безводных условиях 1,18 мл (9 моль) изобутилового эфира хлормураньиной кислоты. Через 30 мин к полученному смешанному ангидриду прибавляют при е

-35 С 3,0 г (7,5 моль) дифенилметилового эфира 7 5-аМино-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты, растворенного в 50 мл абсолютного хлористого метилена. Реакционную смесь перемеинают по 1,5 ч при 0 С или при комнатной температуре. Затем в ротационном выпарном аппарате удаляют растнорители. Остаток растворяют в

500 мя этилацетата и промывают три раза насыщенным водным раствором 15 хлорида натрия. Органическую фазу высушивают при помощи сульфата магния и удаляют из нее при пониженном давлении растворитель. Сырой продукт очищают на 40-кратном количестве 20 силикагеля смесью хлористый метиленэтилацетат (1:1) в качестве элюента.

Получают согласно тонкослойной хроматографии однородный дифенилметиловый эфир 7) -(0-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты, т.пл.184187оС (из смеси ацетон — простой эфир — простой петролейный эфир, 30

1:2:2). Тонкослойная хроматограмма (силикагель, идентификация при помощи нингидрина): Rf 0,52 (система: толуол — этилацетат, 1:1). ИК-спектр (н хлористом метилене): характерные полосы при 3420, 1790, 1725, 1700, ..620, 1158 см

Пример 4 Аналогично примеру 3 из смешанного ангидрида, полученного из 1,05 г (4,5 моль) 40 D-2-трет.бутилоксикарбониламино-2†(3-метилсульфониламинофенил)-уксусной кислоты и 0,6 мл изобутилового эфира хлормураньиной кислоты в присутствии 0,5 мл й-метилморфолина н

25 ыт ацетонитрила при -15оC путем его обработки 1,49 r (3,75 моль) дифенилметилового эфира 7 -амино-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кис- . лоты, растворенного в 25 мл хлорис-,1 того метилена, получают дифенилметиловый эфир 7р- (0-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефей-4-карбоновой кислоты, т. пл. 127о

130 С. Тонкослойная хроматограмма:

Rf 0,21 (силикагель; толуол-ацетон, 3:1). ИК-спектр (н хлористом метилене): характерные полосы при 3440, 1787, 1725, 1705, 1342 и 1162 см""Пример 5. а) 482 мг (1 моль) ) ()

7 -(О-2-азидо-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино) -3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты, растворенной в 32 мл смеси метанол — хлороформ (3:1), Гидрируют н IIpHcjjTGT ф5 вии 120 мг окиси платины при комнатной температуре и нормальном давлении (время реакции 2 ч) . Раствор разбавляют 5 мп воды и доводят 1 мл

1 н соляной кислоты до рН 2. После фильтрования рН водной фазы доводят

20%-ным раствором триэтиламина в метаноле до 5,2. Раствор концентрируют до приблизительно половины объема, затем прибавляют 12 мл ацетона и смесь выдерживают в течение 16 ч при о приблизительно -18 С. Образовавшийся осадок отфильтровывают, промывают ацетоном и простым диэтилоным эфиром и высушивают. Таким образом, получают 7(-(О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбононую кислоту в виде внутренней соли моногидрата, которая разлагается при температуре выше 170 С. Тонкостойная хроматограмма (силикагель; идентификация при помощи нингидрина): R f 0,20 (система: втор-. -бутанолуксусная кислота вода 67: 10: 23) . УФ-спектр (н О, 1 н водной соляной кислоте):Р.,ц,о 272 нм (с 7200). Исходный продукт можно получить следующим образом.

К суспензии 0,622 r (2,7 моль) тонкоизмельченной 7Р-амино-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты н 12мл. абсолютного хлористого метилена прибавляют н атмосфере аргона и при комнатной температуре 0,75 мл бисвЂ(триметилсилил)-ацетамида (прибавляют в течение приблизительно 10 мин) и перемешивают в течение 45 мин. о

К охлажденному до -15 С раствору

0,81 г (3,0 моль) 0-2-азидо-2-(3-метилсульфониламинофенил)-уксусной кислоты и 0,35 мл 4-метилморфолина в

18 мл абсолютного ацетонитрила приливают и атмосфере аргона 0,4 мп изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты и останляют реагировать еще

25 мин. К полученному смешанному ангидриду прибавляют по каплям при -15 С

D вышеуказанный силилиронанный исходный продукт и реакционную смесь перемешивают 2 ч при Оо С и 30 мин при комнатной температуре. Затем удаляют в ротационном ныпарном аппарате растворитель, а остаток растворяют в 400 мл этилового эфира уксусной кислоты и промывают три раза насыщенным водным растнором хлорида натрия. Водные фазы экстрагируют еще раз этилоным эфиром уксусной кислоты. Объединенные органические растворы высушивают при помощи сульфата магния и затем из них при пониженном давлении уды ...aT растноритель.

Остаток очищают на силикагеле смесью хлористый метилен — этиловый эфир уксусной кислоты (1:1) в качестве элюента. Получают согласно тонкослойной хроматографии однородную 7(- (0-2-азидо-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино -3-метокси-3-це803862

10 фем-4-карбоновую кислоту в виде аморфного продукта, который применяют непосредственно в следующей стадии синтеза аналогично примеру 5.

Пример 6.К раствору 10 моль дифенилметилового эфира 7 -(2-фенок. сиацетиламино)-3-метокси-3-цефем- 1

-4-карбоновой кислоты и 25 моль

N, N-диметиланилина в 50 мл абсолютного хлористого метилена прибавляют при -20 С 12,5 м ... твердого пентахлорида фосфора и перемешивают

36

30 мин при -20 С. Затем прибавляют при этой температуре холодную смесь .0,2 моль метанола и 12 моль N,N-ди метиланилина, после чего перемешивают 2 ч при ООC. При О С прибавляют 1$

60 моль М-метилморфолина и раствор смешанного ангидрида, полученного путем перемешивания в течение 30 мин при О С смеси 15 моль> D-2-(трет. — ° о

-бутилоксикарбониламино) -2- (3-метил- 2О сульфонрламинофенил ) -уксусйой кислоты, 14 моль изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты и 16 моль

N-метилморфолина в 50 мп хлористого метилена, и перемешивают 1 ч при О С.

Далее приливают 100 мп воды, встряхивают, разделяют фазы и органичес-, кую фазу промывают фосфатным буфером с рН 2 и фосфатным буфером с рН б. После высушивания экстракта при. помощи сульфата натрия и выпаривания получают дифенилметиловый эфир 7 -(О-2-трет-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино(-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты, который растворяют в 20 мл трифторуксусной кислоты и 1 мл анизола. Выдержав раствор при комнатной температуре, его выпаривают, остаток растворяют в метаноле и

7 - (О-2-амино-2-(3-метилсульфонилами- gp нофенил) -ацетиламино) -3-метокси-3-цефем-4-карбоновую кислоту выделяют осторожным прибавлением диэтиламина (до изоэлектрической точки).

Пример 7. а) В среде, содер- g5 жащей 0,7% ацетона, 0,5Ъ мясного экстракта, 0,5% дрожжевого экстракта, 0,5 % натриевой соли L-глутаминовой кислоты и 0,3% хлорида натрия, культивируют Pseudomonas melanogenum

АТСС 17808 под водой в течение 55 ч при 28 С, Клетки отделяют центрифугированием, промывают их 0,8%-ным раствором хлорида натрия и суспендируют в 0,1 н. ацетатном буфере (рН 6,5). К 100 мл этой суспензии (содержащей приблизительно 6 r влажных клеток) прибавляют 1 г 7 -амино-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты и 3 г гидрохлорида 0-2-(3-метилсульфониламинофенил)-глицинметилового 60 эфира и перемешивают 2 ч при 35ОС.

Смесь центрифугируют, а очищенный фильтрат помещают на колонку амберли.та XAD-2. После промывания колонки водой элюируется 7(- 10-2-амино-2- 65 — (3-метилсульфонилами нофенил ) -ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновая кислота с возрастающими долями метанола в воде. б) Гидрохлорид D-2-, 3-метилсульфониламинофенил)-глицинметилового эфира получают из D-2-(3-метилсульфониламинофенил)-глицина путем этерификации в сложный эфир метанолом в присутствии сухого хлористого водорода.

От полученных соединений можно отщеплять защитные группы следующим образом.

Пример 8. а) Смесь 0,557 r

7(-(0-2-трет.-бутнлоксикарбониламино) -2-(3-метилсульфониламинофенил )—

-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты, 2,5 мл предварительно охлажденной трифторуксусной кислоты и 2,5 мл хлористого метилена перемешивают в те:ение 30 мин при

О С в атмосфере аргона, а затем прибавляют 25 мл смеси простого петролейного эфира и простого диэтилового эфира (1:1) при О С. Бежевый осадок отфильтровывают, промывают небольшим количеством простого диэтилового эфира и высушивают при пониженном давлении. Полученную соль трифторуксусной кислоты 7 - (О-2-амино -2-(3-метилсульфониламинофенил) ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты растворяют в 5 мл воды, экстрагируют два раза, применяя по 3 мл этилового эфира уксусной кислоты, а кислую водную фазу (рН 1,8) доводят путем прибавления по каплям 2 н. водного раствора гидроокиси натрия до рН 5,2. Раствор концентрируют до приблизительно по,ловины объема, приливают 12 мп ацетона и смесь выдерживают 16 ч при приблизительно -18 С. Образовавшийся осадок отфильтровывают, промывают ацетоном и простым диэтиловым эфиром и высушивают. Получают 7 -(О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)—

-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновую кислоту в виде внутренней соли в качестве моногидрата, которая разлагается при температуре выше 170 С. Тонкослойная хроматограмма (силикагель; идентификация при помощи нингидрина): R f О, 22 (система: втор.-бутанолуксусная кислота вода, 67:10:23). УФ-спектр (в 0,1 н. водной соляной кислоте): мс,„,272 нм (E 7000).

То же самое соединение можно получить и следующим образом. а ) К о:лажденному до-0 С раствору 8,0 г (14,4 моль)) 7 - (0-2-трет.бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)—

-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кис лоты в 40 мя абсолютного хлористого метилена прибавляют 40 мп предварительно охлажденной трифторуксусной кис— лоты, перемешивают в течение 25 мин

803862

12 при 0 С в атмосфере аргона и прибав- ляют 500 мя смеси простого петролейного эфира и простого диэтилового эфира (1:1) при 0 С. Бежевый осадок отфильтровывают, промывают небольшим количеством простого диэтилового эфира и высушивают при пониженном .давлении. Полученную соль трифтор.уксусной кислоты 7 -(D-2-амино-2†(3-метилсульфониламинофенил)ацетиламино)-Э-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты растворяют в 70 мл ледя- ® ной воды и экстрагируют три раза, применяя по 30 мл этилового эфира уксусной кислоты. Кислую водную фазу (рН 2,0) доводят путем прибавления по каплям 20%-ного раствора три- 15 этиламина в метаноле до рН 5,2. При

0 С приливают 160 мп изопропанола.

Образовавшийся осадок перекристаллизовывают из смеси изопропанол — вода (2:1), затем его отфильтровывают, проьывают небольшим количеством изопропанола и высушивают. Так как кристаллизат содержит и после высушивания еще небольшое количество органического растворителя, его дигерируют еще 30 мин при 40 С в

50%-ном водном растворе, охлаждают до 0 С, фильтруют и высушивают еще раз в высоком вакууме при комнатной температуре. Таким образом получают

7Р- (О-2-амино-2-(3-метилсульфонилами- 36 нофенил) -ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновую кислоту в виде внутренней соли моногидрата, т . пл.

;выше 174 С (с разл.). а ) Раствор 300 мг (0,54 моль)

7 -(0-2-трет.-бутилоксикарбониламино-. 2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты в 3 мл муравьиной 40 кислоты перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре при пропускании аргона, охлаждают.до 0 С и прибавляют к нему 30 мл смеси простой диэтиловый эфир — простой петро- 4 лейный эфир (1:1). Выпавшую соль муравьиной кислоты 7 -(D-2-амино-2†(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты растворяют в 3 мл ледяной воды, экстрагируют три раза 1,5мл этилацетата и освобождают в ротаци онном выпарном аппарате от воды и избытка муравьиной кислоты. Остаток растворяют еще два раза, каждый раз в Э мл воды, и концентрируют досуха, причем можно выделять непосредственно моногидрат 7 - (О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино) -3-метокси-4-карбоновой кислоты н виде светло-желтых кристал- d0 лов, т. пл. 173-175 С (с разл.).Тонкослойная хроматограмма (силикагель, обработка нингидрином): Rf 0,21 (система: втор.-бутанол — уксусная кислота — нода, 67:10:23). УФ-спектр ф5 (н 0,1 н. водной соляной кислоте):

Л вс 272 нмс (7100) . а ) Раствор 2,2 г 7 - (D-2-трет.—

-бутилоксикарбониламнно-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)—

-3-метокси-3-цефем-4 -карбононой кислоты в 22 мл 99%-ной муравьиной кислоты выдерживают в течение 1,5 ч при 23 С, а затем выпаривают н вакууме. Полученную смолу дигерируют последовательно простым эфиром, ацетонитрилом и смесью ацетонитрил— вода (95:5), применяя каждый раз

25 мл. Получают 78-(0-2-амино.-2- (3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновую кислоту в виде светло-бежевого порошка. После перекристаллизации из смеси вода — изопропанол (1:2) моногидрат обладает следующими снойствами:(D() ) = +143 + 1 С 1, 0,1 í. HCI), поглощение н ультрафиолетовой области B Оg1 H ° HCK )1макс 272 нм (с 7300) .

Пример 9. а) Аналогично примеру 8а) можно освобождать путем взаимодействия с трифторуксусной кислотой в 7) -(0-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоте аминогруппу и превращать полученную соль трифторуксусной кислоты 7 - (О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)- ацетиламино)-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты путем обработки водным раствором гидроокиси натрия до изоэлектрической точки во внутреннюю соль 7) - (О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты. ал) Аналогично примеру 8а можно освобождать путем взаимодействия с трифторуксусной кислотой в 7 - (О-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-хлор-3-цефем-4-карбононой кислоте аминогруппу и превращать полученную соль трифторуксусной кислоты

7 - (О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-хлор-3-цефем-4-карбононой кислоты путем обработки 20%-ным раствором триэтиламина в метаноле до изоэлектрической точки во внутреннюю соль 7 - (О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)ацетиламино)-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты, т. пл. выше 165 С (с разл.). Тонкослойная хроматограмма (силикагель; обработка нингидрином): Rf 0,17 (стема: втор.-бутанол - уксусная кислота — вода, 67:

:10:23). УФ-спектр (н 0,1 н. соляной кислоте) ).макс 267 нм (Е 7600) . а ) Аналогично примеру 8а g можно освобождать путем взаимодействия с муравьиной кислотой н 7 -(О-2-трет.—

-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино1—

13

803862

-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоте аминогруппу. Получают 7Р- (0-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)—

-ацетиламино)-3-хлор-3-цефем-4-карбоновую кислоту в виде мелкого кристаллизата с указанными в пункте а свойствами.

Пример 10. Раствор 2,18 г (3 моль) дифенилметилоного эфира

7 - (D-трет . — с, .:.поксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-3-хлор-3-цефем-4-карбононой кислоты, ®

1,8 мл анизола и 0,6 мл трифторуксусной кислоты в 20 мп хлористого метилена перемешивают в течение 30 мин. при

0 С, а затем прибавляют 200 мл смеси о простой эфир — простой петролейный 15 эфир (":1). Соль трифторуксусной кистоты растворяют н 10 мл ледяной воды и экстрагируют два раза, применяя по

4 мл этилацетата. Водную фазу доводят

20%-ным раствором триэтиламина н 20 метаноле до рН 5, О, причем после прибавления 24 мп изопропанола образуется бесцветный осадок. После фильтрования, промывания небольшим количеством изопропанола и высушинания при пониженном давлении получают бесцветные кристаллы 7)т- (0-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)—

-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты, т . пл. выше 165 С (с разл.) . Тонкослойная хроматограмма (силикагель, Зо обработка нингидрином): Rf 0,17 (система: втор.-бутанол — уксусная кислота — вода, 67:10:23). ИК-спектр (в нуджоле): характерные полосы при

3500, 3220, 1780, 1685, 1340 и " 35

1155 см

П v и м е р 11. а) Аналогично примеру 10 путем обработки 1,08 г (1,5 моль) дифенилметилоного эфира

7 -(0-2-трет.-бутилоксикарбонилами- щ но-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты 4,5 мл трифтор уксусной кислоты и 0,8 мл анизола н

10 мп хлористого метилена можно освобождать аминогруппу и защищенную

4-карбоксильную группу и превращать полученную соль трифторуксусной кислоты путем обработки 203-ным раствором триэтиламина в метаноле до изоэлектрической точки но внутреннюю

-соль 7 — (О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)) -3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты, т. пл. выше

172 С (с разл.). а ) Смесь 10, 12 г (14 моль), 55 дифенилметилового эфира 7 - (О-2-трет-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты, 8,6 мл анизола и 145 мл трифторуксусной кислоты перемешивают в о течение 15 мин при О С, затем прибавляют 400 мл предварительно охлажденного толуола и-выпаривают при по ниженном давлении. Остаток высушивают в высоком вакууме, дигерируют

Простым диэтиловым эфиром и отфильтровывают. Таким образом получают в порошкообразном виде т ифторацетат

7 - (О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты, который растворяют в 70 мл воды. Затем промывают три раза, применяя по 25 мл этилового эфира уксусной кислоты, и доводят рН 20%-ным раствором триэтиламина в метаноле до приблизительно 5,6, причем образуется после прибанления 160 мл изопропанола бесцветный осадок. Перемешивают 1 ч на ледяной бане. Бесцветный осадок отфильтровывают, промывают изопропанолом и простым диэтиловым эфиром и высушивают при пониженном давлении. Так как кристаллиэат содержит и после нысушивания еще небольшое количество изопропанола или простого диэтилового эфира, его дигерируют еще 30 мин в 50%-ном водном растворе при 40 С, охлаждают до О С, фильтруют и еще раз высушивают. Таким образом получают в виде микрокристаллического порошка 7р-(О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил}ацетамидо)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновую кислоту в миде внутренней соли моногидрата, т. пл. выше 175" С (с разл.),() — +144 С (с 1,035, 0,1 н. соляная кислота).

Тонкослойная хроматограмма (силикагель обработка нингидрином): Rf

0,19 (система: втор.-бутанол уксусная кислота — вода, 67:10:23) .

УФ-спектр (в 0,1 н. водной соляной кислоте):jL „ 272 нм (Я 7300).

ИК-спектр (в минеральном масле): характерные полосы при 3500, 3180, 1760, 1692, 1608, 1150 и 978 см .

Пример 12. Суспензию 4,75 r

7 - (О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбононой кислоты н 50 мл воды и 2 мл спирта растворяют мед ленно при перемешивании и контроле рН при величине рН ниже 7,6 в приблизительно 5 мл 2 н раствора едкого натра. Раствор, освобожденный путем фильтрования от остатка, дает после лиофилизации 4,9 г натриевой соли

7 - (О-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбононой кислоты.

Пример 13. К суспензии

1,151 r (5 моль)) 7Р-амино-3-метокси-3-цефем-4-карбононой кислоты в

50 мл метиленхлорида прибавляют

1.,392 мл (5,75 моль) бис-(триметилсилил)-ацетамида н атмосфере аргона и н течение 1 ч перемешивают при комнатной температуре.

К охлажденному до ннутренней температуры от -10 до -15 C раствору

2,186 г (6 моль) натриевой соли

D-2 -(1-метоксикарбонил-2-пропилилен—

80386.

16

Формула изобретения.3:(ха: i (:6 7/7> ираж 454

"l I НН>>Н

Подписное

Ф.(»:1 i I!ill "Патент" гQp(.. ул. Проектная, 4 мило) -2- (,3-м<зтилсульфонила<лк»о :>е1; ,->ил ) -у к(>у —;.,"-ой кислоты и 2 капель и „ It-димет:-..: -!.Ñ ен зил(амина н 4 G мл ацeтoнитрила прибавляют в атмосфере аргoHQ О, < ><4 ???? (6 ????????) ????????????????????????0 ??????????;<?????????????????????????? ?????????????? ?? ?? ???? ????:-:= нескельких ???????????? ???????? ????????????????????????????. ?? ????????????:.???????? ?????????? ?????????????? ???????????????????? ?????????????????? ????????????????>от по каплям вышеописанный силилир".!>àfный исходный продукт при той ж=-: ..:>пературе . реакционну<а смесь р«ле>((и t,-> ют 2; пр и температуре от 0,:.,О -5" С «Ра=творитель удаляют н ротац-;Q:-:IQ>ì испарителе н вакууме, остаток растворяют в 15 мл дистиллирона>f!i<0:=: во„:<ы и 30 мл ацетонитрила ..ол.,—.,-;:-,f:.(;<; —..;"tòûé раствор при помощи соля-",Ои:<ислоты донодят до рН 1.

П<зс>-.е перемен>ив ания B тече;-:ие 2 ч желтый раствор при помощи 2 н.. раст— но,>- . =;„ ::,.о награ доводят до рН 3,5 и:..:((0.>: сгуща;от и нану и» при комнатной т-.м (>О-:>-: у -e . >4аслянист --и «желтый

Ос= ",О:.:-;:,,.,:.:0!(.> взбалтывают (15 мл но: г(л(»>ого с> -Ожн<з>»,-> эфира

Уf1 с!И>1((ес". (:-,>. Водимо фазы соед. 1н —.: % !II.: -.г.о< тef<пературе до;,1>ц<" . -;, -* = ОН н О 5 пои лОщи

<" ".,<З: <- ";?? i?????? !(????tsct.. ?????????? (>рг;<1>-= 1:.: -. 40 >ля. .<зо.(»О>таг>ола осаж O1i - ..i . i,",, * Л > " r. .!(Е . ИЛа»<Г1 (> — -MPT— >,. . ф ... " — -;.- Обо но>з ая к . <А <От а >

КО " . . ...- 0- 1 --. Н ..ЗТ. ЛО fi М .:i >Æf(ÛÌ э< .>О!«;, у, ., у . . . =.. ." О«О . ы !. i:=ÿo<<1HÂа=a у:.;=- пр-.-. комнатной температурЕ. il -- -;:Зр»КОИСтагн>П За;;ИИ ИЗ смсс>1 з». .. — <13îï",е пан Ол г«IОжнО пОл<, —

Нсхо> .(i: . f р<здук It <110>((но получит>ь е д,> >(!g« j f< f б р, < > (> гл „ нору 7 < 329 ",30 моль >

2 — l - - .,р т г> л с <: (1 ь ф О н и.<>;;;,<;., >; Q <5 e f ???? ) .?? ?? „??-<????” ????(. ?? ?? 6 0:: 0, 0 ?? o;.-.c; -:.,??-..::,> (ети. ° =— т с(на . :. и: е 2 t>QÎ IIÎò:-(Огл О а f! Оле <;ря бавляк>(3 < мл (3 6 i>е<,>->,,, 1 и "иле <о".. Q ть> <>, f(П><тят Э ГЕЧen!I.,(уу ме < к осад,(.,> 1 и- - —: "r. -:е раприt«;"o!f11 <1>0, абсолю > tf>, t. <>«. ; <" = <л

1< аждь<>> ра. От гоняют приб >if:> и :::, .JIIt! .o при 4 0 C. Осадок рас . :р<н(т (; ..;: ил:-.-.;— хлОридогл и <:. (>ил> троньп>ают ><<> емый продукт еще . .ес(<О:((..кс р.-.з .Г>е>(р=<вают метиленхлоридом и полученную натриевую соль D-2- (1-метоксикарбонил-2—

-пропилиденимино)-2- (3-метилсульфониламинофенил)-уксусной кислоты сушат в течение 16 ч при комнатной температуре и данлении 0,01 мм рт.ст.

1. Способ получения 7)0-(О-2-ами1О но-2- (низший алкилсульфониламинофенил) -ацетиламино|-3-метокси (или хлор) -3-цефем-4-карбоно:.-:ых кислот, где низший алкил содержит до 4 атомов углерода, или их солей, о т л ич а ю шийся тем, что 7ф-амино-3-метокси-(или .<лор — 3-цефем-4—

-карбоновую кислоту, где 4-карбоксильная группа может быть защищена эфирной группой, такой, как триметилси2О л ильная или дифенилглетильная, и 7(1-аминогруппа может быть защищена в ниде силиламиногруппы, подвергают ацилированию соответствующей D-2-амино-2-(низший алкилсульфонилаглинофенил)-уксусной кислотой, где 2-аглийогруппа может быть защищена такой группой, как трет.-бутоксикарбонильная или алкоксикарбонилзамещенная изопропилиденовая, или ее смешанным ангидридом, или соответствующей 2-азидо-2-(низший алкилсульфониламинофенил)-уксусной кислотой, или ее смеженным ангидридом н среде органического растворителя в присутствии оснонания при температуре от -20 до

+40 С или энзиматическому ацилированию

o„ соответ<.твующей 2-амино-2-(низший алкилсульфониламинофенил)-уксусной кислотой, или ее низшим алкилоным в;-..О„,:-, О =; среде при температур< - ?О;;(> 50 С и рН среды 5-9

>-<(.. — .<ном соединении удаляют защ:ю iit гo,:ппы путем Обработки три.— I.t (tt.i < t < ", и или глуравь>чнои кисло . Ой.: . > .. зицогругтпу восстанавли=-:.>От<. З .,::... Е »У ПУ ПУТЕМ КатаЛИтИЧЕС" --о ги,.a(...:Qf-:àH!я H выделяют целевой

>дукт в виде свободной кислоты или

СОЛИ.

2. Способ по и. 1, о т л и ч а юй с я тегл„ что энзиматическое

;=:..:Лирование недут под действием д<>((>опа s me I à(>оуеп(>п> ATCC 17808 .

Н:.точники информации, >:;>и>>ятые но внимание при экспертизе

1. Патент СССР 7 566525, N.

С 07 D 501,/06„ 1973.