Способ количественного определения аде-нозина и инозина или производных аденози-ha и производных инозина при их совместномприсутствии b смеси

Способ количественного определения аде-нозина и инозина или производных аденози-ha и производных инозина при их совместномприсутствии b смеси

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советских

Соцналистмческих

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к &BT. свид-ву

С ПРИСОЕДИНЕНИЕМ ЗаЯВКИ Йо (23) Приоритет

G 01 N 31/16

Государственный комитет

СССР но делам изобретений н открытий

Опубликовано 15.02.81, Бюллетень Н9

Дата опубликования описания 15 . 02. 81 (53) УДК 543 257 ° 1 (088.8) Ъ»- I !

l ! ! (72) Авторы изобретения

А.Я. Веверис, Б.A. Спинце и И.П. Давидсо (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АДЕНОЗИПА

И ИНОЗИНА ИЛИ ПРОИЗВОДНЫХ АДЕНОЗИНА

И ПРОИЗВОДНЫХ ИНОЗИНА ПРИ ИХ СОВМЕСТНОМ

ПРИСУТСТВИИ В СМЕСИ периодатом и полученный раствор восстановигь глюкозой, и ограниченная область применения способа при анализе смесей производных аденоэина с производными инозина, так как способ применим только для анализа смесей производных аденоэина и инозина,имеющих в рибозной части молекулы с — гликолевую группировку.

Цель изобретения — упрощение и расширение области применения способа.

Поставленная цель достигается способом количественного определения аденозина и инозина или производных

15 аденоэина и производных иноэина при их совместном присутствии в смеси, заключающимся в потенциометрическом титровании анализируемой пробы растворенной в смеси метилцелло20 эольва и 1,3-пропиленгликолькарбоната, взятых в объемном соотношении

1:8-10, раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллоэольва и 1,3-пропиленгликолькарбоната, вМятых в объемном соотношении 1:8-10.

Методика определения. Навеску (0,12-0,20 r) определяемой смеси аденоэина и инозина или производных аденозина и производных инозина при

30 нагревании растворяюг в 5-6 мл меИзобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения аденозина и инозина или производных аденозина и производных инозина при их совместном присутствии в смеси.

Известен способ количественного определения смеси аденоэина и инозина путем хроматографирования анализируемой пробы (1).

Недостатком способа является его трудоемкость и длительность определения.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения аденозина и иноэина при их совместном присутствии в смеси путем растворения анализируемой пробы в воде с добавлением йодной кислоты, обработкой полученного раствора глюкозой при 50-60 С о и добавлением диметилформамида до объемного соотношения вода-диметилформамид 1:5 с последующим потенциометрическим титрованием полученного раствора раствором щелочи (2).

Недостатком способа является сложность исполнения, поскольку анали.зируемую пробу необходимо окислить (22) Заявлено 230179 (21) 2715135/23-04 (51)M. Кл.

805167 тилцеллоэольва, затем к раствору добавляют 50 мл пропиленгликолькарбоната и потенциометрически титруют

0,1 н. раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллозольва и пропиленгликолькарбоната (1:&-10) . На кривой потенциометрического титрования

1 ,появляются 2 скачка потенциала.Первый скачок потенциала соответствует количественному титрованию аденозина и его производных, а второй — количественному титрованию инозина и его производных.

Пример 1. Количественное определение аденозина с инозином.

Навеску анализируемой смеси

0,1208 r (0,0834 г аденозина и

0,0374 r иноэина) помещают в стаканчик для титрования и нри нагревании растворяют в 6 мл метилцеллозольва.

Раствор охлаждают до комнатной температуры и добавляют 50 мл 1,3-пропиленгликолькарбоната, в раствор погружают пару электродов (стеклянный и каломельный) и потенциометрически титруют 0,0993 н. раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллозольа-1, 3-пропиленгликолькарбонат

1:8 до появления двух скачков потенциала на кривой титрования.

Расход титранта на титрование аденозина — 3,14 мл, а расход титранта на титрование инозина 1,41 мл.

Содержание аденозина рассчитывают по формуле

3 14 0,0993 0,267 ° 100=69%

О, 1208

Содержание инозина рассчитывают следующим образом

1,41 0,0993 0,26 100=38%

0,1208

Стандартное отклонение при определении аденозина составляет + 0,9% и при определении инозина и 0,9%.

Пример 2. Количественное определение смеси дезоксиаденозина с дезоксииноэином.

Навеску анализируемой смеси

0,1390 (0,0750 г деэоксиаденоэина и 0,0640 г деэоксиинозина) при наг. ревании растворяют в 5 мл метилцеллозольва. После охлаждения к раствору добавляют 50 мл 1,3-пропилен-. гликолькарбоната и потенциометрически титруют 0,1058 н. раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллозольв -1,3-пропиленгликолькарбонат .1:9 до появления двух скачков потен-. циала на кривой титрования., Расход титранта на титрование дезоксиаденозина 2,83 мл, а на титрование дезоксиинозина 2,40 мл.

Содержание дезоксиинозина рассчитывают по формуле

2,83 ° 0,1058 ° О 251 100=54%

0,1390 стандартное отклонение составляет

40,6%. Содержание дезоксииноэина рассчитывают следующим образом, Х 2,40 0,1058 0 252 ° 100 вЂ

° 100 46%

Пример 3. Количественое определение смеси 2,3 -изопропил-

/ / ! I лиденаденоэина с 2,3-изопропилли-!

О денинозином

Навеску анализируемой смеси

0,1984 г (0,0980 г 2,3 -изопропиллиденаденозина и 0,1004 г 2,3-изопропиллиденинозина) при нагревании растворяют в 4 мл метилцеллозольва.

После охлаждения к раствору добавляют 35 мл 1,3-пропиленгликолькарбоната и потенциометрически титруют

0,1075 н раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллозольв-1,3-пропилен20 гликолькарбонат 1:10 до появления двух скачков потенциала на кривой титрования. Расход титранта на титрование 2,3-изопропиллиденаденозина составляет 2,86 мл, а на титрование

2,3-изопропиллиденинозина — 3,15 мл.

Рассчитывают содержание 2,3-изопропиллиденоэина — 49,4 % и 2,3-изопропиллиденинозина — 50,8%.

Стандартное отклонение при определении 2,3-изопропиллиденаденозина составило +0,7%>а при определении 2,3-иэопропиллиденинозина + 0,8. 1,3-пропиленгликолькарбонат оказывает высокое дифференцирующее действие в отношении слабых оснований, но обладает весьма низкой растворяющей способностью в отношении аденозина, инозина и их производных.

Положительный эффект обеспечивается совокупностью растворяющих и

40 дифференцирующих свойств, которыми обладает предлагаеж и растворитель— смесь метилцеллозольва и 1,3-пропиленгликолькарбоната в объемных соотношениях 1:8-10. Изменение этих соотношений приводит либо к уменьшению растворяющей способности, либо к уменьшению дйфференцирующего действия

Использование в качестве титранта раствора хлорной кислоты в смеси метилцеллоэольв-1,3-пропиленгликолькарбонат (1:8-10) обеспечивает необходимые соотношения метилцеллозольва и 1,3-пропиленгликолькарбоната среды титрования во всем процессе

H титрования, а также обеспечивает образование растворимых в данной среде продуктов титрования.

Упрощение процесса достигается тем, что предварительная обработка щ образца, т.е. окисление периодатом, восстановление раствора глюкозой в известном способе раздельного количественного определения смесей зденозина с иноэином и производных дденоэина с производными инозина

805167

Формула изобретения

Составитель Л. Соломенцева

Техред A. Ач Корректор Н. Бабинец

Редактор Н. Минко Эаказ 10870/65

Тираж 918 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,4 не требуется, так как на проведение анализа не влияет отсутствие с гликольной группировки в рибозной части производных аденозина и инозина (деэоксиаденозин, дезоксиинозин и др.) расширяется область приме нения способа.

Способ количественного определения аденозина и иноэина, или производных аденозина и производных инозина при их совместном присутствии в смеси путем потенциометрического титрования анализируемой пробы в среде органического растворителя, отличающийся тем, что, с целью упрощения определения и расширения -области применения способа, в качестве органического растворителя используют смесь метилцеллоэольва и 1,3-пропиленгликолькарбоната, взятых в объемном соотношении 1:8-10, и титрование проводят раствором хлорной кислоты в смеси метилцеллозольва и 1,3-пропиленгликолькарбоната, взятых в объемном соотношении 1:8-10.

Источники информации, принятые во внимание при экспертихе

1. F Сraveri, G. Oondi ".Separation ай0 determination of nucleosides in the presence of organ extracts" . Boll. Chim. Pharm. 1965, 104, р. 574-579.

2. Авторское свидетельство СССР по заявке 2428028/23-04, кл. G 01 М 31/16, 1976 (прототип).