Среда для поддержания культурыинфузорий

Среда для поддержания культурыинфузорий

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

0 П И С А Н И Е " ЗЮВ!3

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВЙДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 25.12.78 (21) 2724780/30-15 (51) Ч K. 3

С 12 N 1/12

С 12 R 1/89 с присоединением заявки №вЂ”

Государственный комитет (23) Приоритет— по делам изобретений и открытий (43) Опубликовано 07.03.81. Бюллетень № 9 (53) УДК 576.8.093 (088.8) (45) Дата опубликования описания 07.03.81 (72) Авторы изобретения

Н. А. Корнеева и А. Д. Игнатьев

1 (71) Заявитель (54) СРЕДА ДЛЯ ПОДДЕРЖАНИЯ КУЛЬТУРЫ

ИНФУЗОРИЙ TETRAHYMENA PYRIFORMIS

1,99 — 2,01

0,49 — 0,51

0,09 — 0,11

0,09 — 0,11

0,005 — 0,01 до 100 мл

1

Изобретение относится к прикладной биологии и может быть использовано при культивировании простейших.

Известна среда для культивирования и поддержания культуры инфузорий Tetrahymena pyriformis, содержащая бактериологический пептон 2 г, глюкозу 0,5 г, дрожжевой экстракт 0,1 г, морскую соль или хлористый натрий 0,1 r на 100 мл воды

И

Недостатком известной среды является то, что культуру в такой среде необходимо пересевать через каждые 7 дней и поддерживать при температуре +25 С.

В случае понижения температуры ниже +18 рост ее резко замедляется, а при хранении при температуре +5 С значительная часть особей погибает.

Для консервации культуры для более длительного хранения (до 1 — 2-х месяцев) используют 5% -ный раствор глюкозы.

Хранят при комнатной температуре 18—

20 С. Хранение же при температуре +5 C ведет к отмиранию особей. Даже при хранении при комнатной температуре к концу

2-го месяца особи измсльчаются и культур а дегр адирует.

Целью изобретения является увеличение жизнеспособности культуры без ее пересева.

Поставленная цель достигается тем, что среда содержит дополнительно липоцеребрин при следующем соотношении компонентов (в r. на 100 мл среды):

5 Пептон

Глюкоза

Дрожжевой экстракт

Морская соль

Липоцеребрин

1о Вода

Пример 1. Берут 7 мг .липоцеребрина (таблетки липоцеребрина P. 72/145/36, покрытые оболочкой) вносят в 100 мл воды

16 водопроводной, растворяют путем доведения до кипения, вносят компоненты стандартной среды: 2 г пептона, 0,5 г глюкозы, 0,1 r морской соли, 0,1 г дрожжевого экстракта, размешивают, доводят до закипаio ния, разливают по пробиркам по 1,5 мл среды и по колбам плоскодонным по 10—

20 мл среды с тем, чтобы слой не был выше 1 см. Стсрилизуют 15 мин при

0,5 атм, высевают культуру Тетрахимены пириформис. Выращивают четверо суток при комнатной температуре, затем переносят в холодильник. Одновременно также поступают с контрольной средой, без внесения липоцеребрина. зо Сравнительная выживаемость Tetra810813

Стаял,артная среда+ липоцеребрин (предложенная) Число проб

Стандартная среда (известная) Наблюдение в течение четырех месяцев каждый месяц выявило жизнь, культура погибла только к концу четвертого месяца в пробирках с содержанием 1,5 мл среды.

В колбах: жизнь в течение семи месяцев, Гибель к концу восьмого месяца.

Появление погибших особей на 5-е сутки хранения в холодильнике прн

+5 С. Полная гибель к концу второй недели.

Погибшие особи на десятый день, и полная гибель к концу первого месяца.

Составитель М. Белоусова

Техред А. Камышникова

Корректор О. Тюрина

Редактор Н. Тимонина

Изд. Ка 234 Тираж 530

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Я-35, Раушская наб., д, 4(5

Подписное

Заказ 2146

Загорская типография Упрполиграфиздата Мособлисполкома

hymena pyriformis в стандартной среде и с липоцеребрином приведена в таблице.

Пример 2. Берут таблетку липоцеребрина, освобождают ее от оболочки, взвешивают 5 мг, вносят в 100 мл воды, растворяют путем прогрева до 100 С. Затем вносят остальные компоненты среды (г); пептон 2,0; глюкоза 0,5, морская соль 0,1, дрожжевой экстракт 0,1 и готовят среду обычным путем (стерилизуют при 0,5 атм

20 мин., или путем доведения до кипения в течение 1 ч), разносят по 1,5 мл в пробирки или по 10 — 20 мл в плоскодонные колбы с тем, чтобы слой не был выше 1 см. .Высевают культуру Т. pyriformis и выращивают четверо суток при температуре

+25 C или при комнатной температуре (18 — 20 С). Затем культуру переносят в

:холодильник, где хранят при температуре

+5 С до 3-x — 4-х месяцев в пробирке или ,до 8 мес. в плоскодонной колбе при наличии в ней 10 — 20 мл среды.

При хранении в холодильнике при +5 С инфузорные особи оседают на дно пробирки или колбы со средой. Доведением температуры среды до комнатной путем прогрева в ладони или через некоторое время (15 — 30 мин) нахождения в комнате особи выходят из состояния анабиоза и зани4 мают весь объем среды. Наблюдение в капле под микроскопом на увеличении

7Х10Х1,5 дает картину густой синхронизированной культуры с 80 — 90 /о особей, находящихся в стадии деления.

5 Вещество липоцеребрин изготавливается из головного мозга крупного рогатого скота заводом эндокринных препаратов

Бакинского мясокомбината, продается в аптеках страны. Одна упаковка содержит

10 50 таблеток, в 1 таблетке 0,15 г липоцеребрина, стоимость 1 упаковки 52 коп.

Добавление в среду 5 мг липоцеребрина дает возможность исследователю хранить культуру инфузории Тетрахимены

15 пириформис в холодильнике при - 5 С всегда иметь культуру для работы в логарифмической стадии роста, что имеет определенное значение для проведения научно-исследовательских работ и облегчает

20 труд исследователя.

Формула изобретения

Среда для поддержания культуры ин25 фузорий Tetrahymena pyriformis, содержащая пептон, глюкозу, дрожжевой экстракт, морскую соль и воду, о т л и ч а ющ а я с я тем, что, с целью увеличения жизнеспособности культуры без ее пересева, 30 она дополнительно содержит липоцеребрин при следующем соотношении компонентов (в г на 100 мл среды):

Пептон 1,99 — 2,01

Глюкоза 0,49 — 0,51

35 Дрожжевой экстракт 0,09 — 0,11

Морская соль 0,09 — 0,11

Липоцеребрин 0,005 — 0,01

Источники информации, 40 принятые во внимание при экспертизе

1. Игнатьев А. Д., Шаблий В. Я., Исасв М. К. и др. Методические рекомендации по биологической оценке продуктов жи45 вотноводства и кормов с использованием тесторганизма тетрахимена пириформис, М., 1977, с. 14.