Способ определения фосфоновыхкислот b биологических жидкостях

Способ определения фосфоновыхкислот b биологических жидкостях

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ ВТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических республик

«»819721 (61) Дополнительное к авт. свид-ву (32) Заявлено 12. 01;78 (21) 2563929/28-13 с присоединением заявки ¹ (53) PA. Кл.з

G 01 к 33/52

Государственный конитет

СССР по делаи изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 0704,81. Бюллетень N9 13

Дата опубликования описания 09.04.81 (53) УДК 616-003. .725(088.8) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОСФОНОВЫХ КИСЛОТ

В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ

Изобретение относится к медицине, а именно к оценке фармакологического действия фосфоновых кислот.

Известен способ определения фосфоновых кислот в биологических жидкостях путем их выделения с последующим разрушением С-Р-связей и колориметрией Г17 .

Однако данный способ не отличался

/ достаточной точностью. 10

Целью изобретения является повышение точности способа.

Поставленная цель достигается тем, что фосфоновые кислоты выделяют на анионообменной смоле, содержащей 15 группу четвертичного триэтаноламмониевого соединения, далее элюцию осуществляют растворами соляной кислоты в возрастающей концентрации 0,1-0,5;

0,8-1,0 и 2,0-2,2 н., а разрушение 2О связей С-P осуществляют хлорной кислотой.

Пример 1. Определение ОЭДФ.

100 мл нативной мочи, содержащей

1-10-40 мкмоль ОЭДФ илн 2 мл депроте-25 ннизированной (10% ТХУ) сыворотки, содержащей 0,1-0,5 мкмоль ОЭДФ после центрифугировання и добавления 2,5%

NaOH,до рН 7,0, осторожно наслаивают на колонку с анионитом в Сс — форме и пропускают со скоростью 3,0 мл в

1 мин. Адсорбированные на анионите фосфоновые кислоты элюируют последова-. тельно 0,5; 1 и 2 н. НСЙ по 100, 80 и 50 мл соответственно для элюции неорганических, органических с С-О-Р-связью и фосфоновых с С-Р-связью соединений. Последние 50 мл, содержащие только фосфоновые (С-Р-связь) кислоты, помещают в центрифужный стакан, подщелачивают 2 н. йаОН (рН 8), осаждают 2,5 М CaCi<, центрифугируют, осадок разводят в минимальном (1-3 мл) количестве 2 н. HCf., переносят в центрифужную пробирку, снова осаждают, прибавляя по каплям 10 М NaOH, центрифугируют, удаляют надосадочйую жидкость, к осадку добавляют 0,5 мл

5%-ного гипохлорита натрия, перемешивают, оставляют на 10 мин, затем добавляют 0,5-1 мл 1 н. НСХ до прекращения выделения пузырьков, добавляют 0,5 мл молибденового реактива, через 3 мин добавляют 0,1 мл раствора амндола и через 3Р мнн замеряют на ФЭК при красном светофильтре. Выход ОЭДФ 96,4%.

Пример 2. Определение АЭФ.

100 мл нативной мочи, 5-10 мл спинно-мозговой жидкости или 2 мл

819721

Формула .изобретения

Составитель А. Морозова

Редактор Т. 3 бкова Техред Н.Майорош Ко екто М. Коста

Заказ 1373/24 Тираж 907 Подписное

В ИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб. д. 4 5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 депротеинизированной сыворотки, сО держащей 0,1-1 мг АЭФ; наслаивают на колонку с анионитом в СН СОО -форме и пропускают"элюант со скоростью

2,0 мл в 1 мин. Дальнейшее определение проводят по примеру 1. Выход 5

АЭФ 93%.

Пример 3.. Определение ФУК.

100 мл нативной мочи или 2 мл депротеинизированной сыворотки, содержащей 1-10 мкг ФУК наслаивают на колонку с анионитом и пропускают элю- ант со скоростью 3,0 мл в 1 мин.

Дальнейшее определение проводят по примеру 1. Выход ФУК равен 95%.

Предлагаемый способ позволяет повысить выход фосфоновых кислот до

90-96% при ошибке 5-8%.

Способ определения фосфоновых кислот .в биологических жидкостях путем 20 их выделения с последующим разрушением С-P-связей и колориметрией, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа, фосфоновые кислоты выделяют на анионообМенной смоле, содержащей группу четвертичного триэтаноламмоииевого соединения, далее элюцию осуществляют растворами соляной кислоты в возрастающей концентрации 0,1-0,5;

0,8-1,0 и 2,0-2,2 н., а разрушение связей С-P осуществляют хлорной кислотой.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1 ° Bisaz, R. Felix and Н ° Fleisch.

Quantitative determination ot Ethane-1-hydroxy - 1,1-diphosphonate in

urine arid plas®a. С1in. chlim. acta, 1975., 65, р. 299-307.