Способ диагностики угрозы выкидыша

Способ диагностики угрозы выкидыша

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союэ Советских

Социалистических

Республик ()822814

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 30.07. 79 (21) 2808809/28-13 с присоединением заявки Но (23) Приоритет

Опубликовано 230481. Бюллетень No 15

Дата опубликования описания 2 3. 04. 81 (51)М К 3

А 61 В 10/00

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (5Ç) Ю 616. 06 (088. 8) г

В. С. Толмачев и Е. И. Боровицкая!

1 1 (72) Авторы изобретения (71) Заявитель г (54 ) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ УГРОЗЫ ВЫКИ ПСА

Изобретение относится к медици-, не, а именно к акушерству и гинекологии.

Известен способ диагностики угрозы выкидыша путем культивирования лимфоцитов крови в питательной среде (1J .

Недостатком известного способа является большой срок диагностирования, что задерживает проведение соответствующей терапии.

Цель изобретения — ускорение способа диагностики угрозы выкидьиаа.

Указанная цель достигается тем, что при осуществлении диагностики 15 угрозы выкидыша путем культивирования лимфоцитов крови в питательной среде, культивируют лимфоциты крови доноров в присутствии сыворотки крови обследуемой, после чего из куль- 20 туры выделяют лимфоциты, окрашивают их акридиновым оранжевым и измеряют интенсивность флуоресценции,при уменьшении которой по сравнению с контролем диагностируют угрозу выкидыша.

Способ осуществляют следующим образом.

Берут кровь обследуемой и донора, отстаивают в течение 1 ч, сливают насадочную жидкость с лимфоцитами 30 и цент рифу гируют ее. к лимфоцит ам донора добавляют питательную среду и собственную сыворотку в одну пробирку, а в другую — сыворотку обследуемой до 20% от общего объема. Культивируют в термостате при 37оС. После 5 мин инкубации цент рифугируют, из осадка делают мазки, которые фиксируют в смеси спирт-ацетон (1:1) 30 мин при комнатной ,температуре.

Окрашивают в следующеи последовательности, мин:

Этиловый спирт 100 5

90 5

60 5

30 5

Бидистиллированная вода 1

Ацетатный буфер рН 4,4 5

Раствор АО на буфере М 15

10-6 М 5

10 М

10-6 М 5

Препараты заключают в каплю г>уферного раствора, содержащего краситель АО (10 М), и закрывают покровным стеклом. Для предотвращения вы822814

Формула изобретения

Составитель Ю. Алмазов

Редактор Б. Иванова Техред Е.Гаврилешко Корректор H.Øâíäêàÿ

Заказ 1929/3 Тираж 687 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 сыхания клеток края покров ных стекол окатывают парафином или резиновым клеем.

Измерение интенсивности связывания красителя АО с клетками определяют на флуориметре. О количестве свяэанног ядрами лимфоцитов красителя судят по интенсивности зеленой люминесценции при длине волны 530 нм. В каждом препарате измеряют по 10 клеток.

Окраску препаратов проводят одновремснно для всех изучаемых групп. Результаты измерения клеток для каждого случая усредняют, вычисляют ошибку среднего и достоверность различия по критерию Стьюдента-Фишера. Результаты показывают,что добавление сыворотки крови беременных женщин с у=розой выкидыша к лимфоцитам донора снижает. интенсивность флуоресценции в среднем на 17% по сравнению с собственной сывороткой донора. Изучение 0 добавления сыворотки крови женщин вне беременности, имевших привычные выкидыши, выявляет снижение интенсивности флуоресценции лимфоцитов доноров, культивируемых с собственнои сывороткой. Обнаруженные четкие различия интенсивности флуоресценции лимфоцитов донора при добавлении сыворотки крови беременных, имевших выкидыши, позволяет рекомендо вать данный способ для ранней дианостики угрозы выкидыша.

Пример . Больная, 25 лет, история родов Р 97, обратилась в клинику с жалобами на наличие болей внизу живота и в пояснице. Анамнез:

1-я беременность в 1971 году — срочные роды; 2-5-е беременности — медицинские аборты в сроке 9-10 недель беэ осложнений; б-я беременность в

197б году — самопроизвольный выкидыш 40 с выскабливаением в сроке 13 недель;

7-я беременость в 1977 году — самопроизвольный выкидыш в сроке 27 недель r. выскабливанием; 8-я беременность, данная — 22 недели. Объектив- 4 но: положение плода продольное, сердцебиение прослушивается, матка возбудимая. На основании объективного клинического осмотра поставлен диагноз: беременность 22 недели, угроза выкидыша.. Результаты лабораторного обследования: из периферической крови больной добавили сыворотку и культуру лимфоцитов донора, пригото-, вили мазки, зафиксировали, окрасили.

Результаты цитофлуориметрии показали, что интенсивность флуоресценции лимфоцитов донора при добавлении сыворотки пациента составила 85+ 3,1 отн.ед. и уменьшилась на 20% по сравнению с интенсивностью флуоресценции лимфоцитов донора, культивируемых в собственной сыворотке (102+4,08 р.

0,00Ц .

Предлагаемый способ обеспечивает ускорение диагностики угрозы выкидыша на 2 дня по сравнению с известным способом и может применяться в качестве контроля при лечении, позволяя экономить 1215 руб в год.

Данные подтверждены клиническими и лабораторными испытаниями на 18 обследованных больных.

Способ диагностики угрозы выкидыша путем культивирования лимфоцитов крови в питательной среде, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью ускорения способа, культивируют лимфоциты крови доноров в присутствии сыворотки крови обследуемой, после чего из культуры выделяют лимфоциты, окрашивают их акридиновым оранжевым и измеряют интенсивность флуоресценции, при уменьшении которой по сравнению с контролем диагносцируют угрозу выкидыша.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Мирохмедов У. М. и Резников Л. A. Методы исследования в клинической медицине, 1975, с. 1б5.