Способ количественного определенияникотинамида

Способ количественного определенияникотинамида

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Севетскик

Социалистических республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ ЕТВЛЬСТВУ

< 834468 (61) Дополнительное к авт, свид-ву— (22) Заявлено 3007,79 (21) 2809393/23-04 (51)М. Кл З с присоединением заявки ¹ (23) ПриоритетG 01 N 21/64

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий

Опубликовано 300581, Бюллетень й9 20 (53) УДК 543. 544 (088.8) Дата опубликования описания 300581 (72) Авторы изобретения

В. П. Баранов и A. A. Хабаров

Читинский государственный медицинский институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НИКОТИНАМИДА

Таблица 1

Концентрация никотинамида, мкг/мл

) 8

1 2 3 4

5 6 (7

16 22 16 100

14 32 35 74

10 100

20 50

0,1

0,2

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения никотинамида.

Известен способ количественного определения никотинамида, путем титрования анализируемой пробы, растворенной в уксусной безводной кислоте раствором хлорной кислоты в присутствии индикатора (11.

Недостаток способа — низкая избирательность определения.

Наиболее близким к описываемому изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения никотинамида путем обработки анализируемой пробы в щелочной среде смесью раствора синильной кислоты и хлорамина Т с последующим измерением флуоресценции полученного при этом раствора (2).

Недостаток способа состоит в низкой чувствительности (50мкг/мл1.

Цель изобретения — повышение чувствительности определения.

Поставленная цель достигается тем, что в способе количественного определения никотинамкда обработку анализируемой. пробы в щелочной среде проводят хлоральгидфатрм при 99

100оС с последующим измерением флурресценции полученного раствора.

15 При излучении оптимальных условий реакции найдена линейная зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации препарата, которая лежит в интервале 0,7-50 мкг/мл

20 и приведена в табл. 1.

Относительная интенсивность флуоресценции, Ф

834468

4 Б 6 7 8

30 20 12 38 45 37

40 10 16 42 56 22

12 48 62 10

14 56 74 4

30 64 77

38 80 74

48 86 80

50 100 80

5

100

10 фильтрами .ФК-1 и

Чувствительность реакции, описываемой в изобретении составляет

0,7 мкг/мл, что позволяет проводить определение препарата в лекарственных смесях.

Определение проводится на отечественном электронном флуориметТаблица 2

Концентрация раствора хлоральгидрата, ф

Концентрация раствора едкого натра, Ф

2 ) 5 ) 0,1 0 5 1 10

i.l

4 4 4 4 4 . 4

0,1

0,5

4 10 б 4

4 4

4 4

37 16

1,0

4 4 4

4 12 20 30

3,0

5,0

4 14 22 37 52 45 б . 12 29 28

10,0

37 40

20 18 24 36 30

28 26 26 28 27

20,0

30

Насыщение

Оптимальньвюи концентрациями реактивов являются- 5%-ный раствор едкого натра и 5%-ный раствор хлоральгидрата по 2 мл на обработку одной анализируемой пробы объемом

1 мл.

Определено оптимальное время кипячения исследуемых растворов на кипящей водяной бане. ависимость относительной интен- си ости флуоресценции от времени кипячения на водяной бане, приведена в табл. 3.

Таблица 3

Время кипячения мин

Отцосительная интенсивность флуоресценции,% 1 7 27 62 60 64 58

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1,0 Продолжение табл. 1

1 ре ЭФ-3NA с

В1 — 2.

При изучении оптимальных условий

2О проведения флуоресцентной реакции на никотинамид найдены оптимальные концентрации едкого натра и хлоральгидрата, которые . приведены в табл. 2.

Время обработки анализируемой пробы на кипящей водяной бане составляет 0,2-10 мин. Оптимальные значения этого интервала 2-10 мин. При определении использовалось время кипячения равное 5 мин.

Определению никотинамида в лекарственных смесях не мешают цианкобаламин, тиамин, фолиевая кислота, аскорбиновая кислота. Никотиновая.кислота

55 обработанная по методике не дает флуоресценции характерной для никотинамида.

П р .и м е р 1. Определение никотинамида в инъекционном 1%-ном растgp воре °

1 мл 1%-ного раствора из ампулы переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят водой до метки и перемешивают. К 1 мл полученного раствора 5 прибавляют поочередно 2 мл 5%-ного

0,2 0,5 1 2 3 5 10

834468

Таблица 4

Метрологические характеристики

Никотинамид

По калибровочному графику, мкг/мл

В 1 мл 1%-ного раствора, г/мл х = 0,01057

18,7

0,00935

0,01035

0,00965

0,01150

0,01153

0,01100

0,01100

0,01035

0,01050

0,01065

20,7

19,3 б = + 0,00241

23,0

22,7

95 + 0 0

22,0

22,0

20,7

Истинное значение определяемой величины: а

0,01057+0,000765

21,0

21,3 по стандартному раствору, для приготовления которого к 1 мл стандартного водного раствора никотинамида с содержанием препарата 100 мкг/мл поочередно прибавляют 2 мл 5%-ного раствора едкого натра и 2 мл 5%-ного раствора хлоральгидрата. Стандарт45 ный образец помещают на кипящую водяную баню на 5 мин и после охлаждения раствор флуориметрируют одновременно с исследуемыми образцами.

Результаты определения никотин50 амида в таблетках представлены в табл. 5.

Т а б л и ц а .5

Метрологические характеристики

Никотинамид

Навеска измельченных таблеток, r по калибровочному графику, глкr /мл иэ расчета на одну таблетку, г

0,096

0,096

19,3

0,01458

0,01404

18,6 х = 0,0139 раствора едкого натра и 2 мл 5%-ного раствора хлоральгидрата. Анализируемую пробу йомещают на водяную кипящую баню на 5 мин. После охлаждения раствор переносят в кювету и флуориметрируют. Содержание никотинамида определяют по стандартному раствору, для приготовления которого к 1 мл стандартного водного раствора никотинамида с содержанием препарата

Пример 2. Определение никотинамида в таблетках по 0,015 г.

0,1 г (точная навеска) мелкоизмельченных таблеток никотинамида помещают, в колбу на 100 мл, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают.

К 1 мл полученного раствора приливают поочередно 2 мл 5%-ного раствора едкого натра и 2 мл 5%-ного раствора хлоральгидрата. Пробу помещают на водяную кипящую баню на 5 мин. После охлаждения раствор переносят в кювету и флуориметрируют. Содержание никотинамида в таблетках рассчитывают

100 мкг/мл приливают поочередно 2 мл

5%-ного раствора едкого натра и 2 мл

5%-ного раствора хлоральгидрата. Полученный раствор помещают на 5 мин на кипящую водяную баню и после охлаждения флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов.

Результаты.флуориметрического определения никотинамида в 1%-ном раствор приведены в табл. 4.

834468

Продолжение табл. 5

0,093 17,6

0,01372

0,093 17,0 0,01325

0,091 17,0 0,01354

0,093 17,6 0,01372

0,100 19,6 0,01421 д = +0,000332

Е< 9 =+0,000237

0,094

0,096

0,096

18,0

0,01388

0,01435

0,01404

Истинное значение определяемой величины: 0,0139 +

+0,00024 = а

19,0

18,6

Пример 3, .Определение никотинамида в драже "Декамевит-2".

0,08 г (точная навеска) мелкоизмельченных драже переносят в мерную колбу на 50 мл, растворяют в дистиллнрованной воде и доводят до метки.

Полученный рЫствор фильтруют через . бумажный фильтр. К 1 мл фильтрата добавляют поочередно 2 мл 5%-ного раствора едкого натра и 2 мл 53-ного раствора хлоральгидрата. Пробирку помещают на водяную кипящую баню, где проба находится 5 мин. После охлаждения раствор переносят в кювету и флуориметрируют одновременно со станТаблица 6

Никотинамид

Навеска измельченных драже, г

Метрологические характеристики

I по калибровоч- из расчет ному графику, на одну мкг/мл драже, г

18,0 х = 0,0495

0,045

0,044

0,045

0,048

17,6 (Р = +0,0071

18,0

19,2

Е =+0,00508 о,95 "

19,2

0,047

23,6

0,059

0,048

0,058

0,048

0,052

19,2

Инстинное значение определяемой величины: а = 0,0495+

+0 00508

23,2

19,2

0,08144

20,8

0,06608

0,06480

0,06576

0,075722

0,07235

0,09392

0,07040

0,09056

0,07360 дартными образцами. Количество нико тинамида в исследуемом растворе рас-. считывают по калибровочному графику, для построения которого в пробирку .вносят 1,0; 0,5; 0,,25 мл стандартного водного раствора никотинамида с концентрацией препарата 100 мкг/мл, доливают поочередно 0,0; 0,5 и 0,75мл дистиллированной воды, в каждую пробирку приливают реактивы как указано выше и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов.

Данные по определению никотинамида в драже "Декамевит-2" представлены в табл. 6.

834468

Пример 4. Определение никотинамида в драже "Пентонит".

0,075 г (точная навеска) мелкоизмельченных драже переносят в мерную колбу на 50 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят водой до метки. К 1 мл полученного раствора добавляют псочередно по 2 мл 5В-ного раствора едкого натра и 5Ъ-ного раствора хлоральгидрата, перемешивают, помещают пробу на водяную кипящую баню на 5 мин.. После охлаждения растТаблица 7

Найдено никотинамида

Навеска измельченных драже, r

Метрологические характеристики по калибровоч- иэ расчет ному графику, на одну д мкг/мл же, r

0,0197

19,7

0,07225 х = 0,01863

19,7

18,7

+0,0021

20,3

19,7 с .= +0,0015

16 3

19,7

18,8

Истинное значение определяемой величины: а = 0,01863+

+0,0015

0,07750

17,1

0,07750

16,3

Чувствительность предлагаемого способа 0,7 мкг/мл, а известного—

5,0 мкг/мп.

Формула изобретения

Способ количественного определения никотинамида путем обработки анализируемой пробы хлорсодержащим органическим реагентом в щелочной среде с последующим измерением флуоресценции полученного при этом раствора, отличающийся

Составитель Л. Соломенцева

Техред H. Келушак Корректор .О. Билак

Редактор Е. Кинив

Заказ 4056/64 Тираж 907 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент",г. Ужгород, ул. Проектная, 4

0,07750

0,07975

0,07875

0,07675

0,08275

0,08100

0,07325 вор переносят в кювету и флуориметрируют одновременно со стандартными образцами. Количество никотинамида в исследуемом растворе рассчитывают по калибровочному графику, для построения которого готовят стандартные образцы с содержанием никотинамида 5, 10 и 20 мкг/мл по описанной выше методике.

Данные по определению никотинамида в драже "Пентонит" представлены в табл.7.

0,0197

0,0187

0,0203

0,0197

0,0163

0,0197

0,0188

0,0171

0,0163 тем, что, с целью повышения чувствительности определения, в качестве хлорсодержащего органического реагента используют хлоральгидрат и

45 обработку ведут прч температуре

99-100 С.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Государственная фармакология

5Р СССР. 10-е изд. М., 1968, с. 463.

2. Франке 3 и др. Химия отравляющих веществ ° М., 1973., т. 2, с. 110 (прототип).