Способ получения стрептокиназы

Способ получения стрептокиназы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОИЗОМУ 6ИЛЬСТЕУ

Союз Сеавтсинх

Социалистических

Ресаубйнк

g»836083 (63) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Зеяваеие 018274 А21) 1995921/28-13 (23) Приоритет - (32) 02. 02. 73 (33) ЧРС120/168615 (33) ГДР

Опубликовано 070681.бюллетень И921

Дата онублмкованмя епксеиия 070681 рц „З

С 12 0 13/10

Гесуяарствеявыя аенвтет

СССР ве вмви, «эебРФтеяяя в «твРмтвй (53) УДК 615.779.

94(088 8) (73) Заявитель рцнаймиттельверк Дрезден (ГДР) (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТРЕПТОКИНАЗЫ

ЗО

Изобретение относится к мякробиологической промыталенности и касается" получения стрептокиназы.

Известен способ получения стрептокинаэы путем выращивания продуцента на питательной среде с последующим выделением целевого продукта из фильтрата культуральной жидкости с помощью сорбеита, элюированием фосфатным бу- .10 фером и осаждением его Щ .

Однако известный способ не обеспечивает получение стрептокиназы с вы сокой активнрстью.

Целью изобретения является повыше- 1$ ние активности стрептокиназы.

Эта цель достигается тем, что выращивают продуцент на питательной среде, выделение осуществляют с помощью карбоксиметилцеллюлозы при 26 рН 2,0-3,5, а элюироваиие ведут при рН 7,5-8,5.

Пример . 10 г СМ-целлюлозы уравновешивают с 500 мл 0,2 и. уксус- >5 ной кислоты в течение 30 мин и затем промывают 500 мл 0,1 н. уксусной кислоты. Подготовленную таким путем карбоксиметилцеллюлозу добавляют к

5 л культурального фильтрата стреп,тококков, у которого величину рН предварительно устанавливают до 3,0.

После 2 ч перемешивания фильтруют через грубый фильтр из спекшихся частиц стекла (G — 2) н выбрасывают фильтрат. Карбоксиметилцеллюлозу протелэают 0,5 л 0,01 н.. уксусной кислоты. Затем производя элюирование стрептокиназы посредством 1 л фосфатногО буфера (0,05 М фосфата, 0,1 М

ИаК рН 8,0). Величину рН в элюате устанавливают 7,0 н (10 мл 1 И СаСВ ) при постоянно поддерживаемой величине рН осаждается стрептокизин. Осадок отделяют центрифугированием после 30 мин и выбрасывают. Стрептокиназу осаждают при рН вЂ” 5,5 при ломо щи 350 г сульфата .аммония (на 1 л).

ОсаМденнъй осадок растворяют приблйзителъно в 60 мл воды, устанавливают величину рН суспензии 9,0, подвергают диализу с удалением сульфата и лиофилизации.

Получают 450 мг стрептокиназы с титром 2,5>10 ад. Кристенсена на

1 мг. Это соответстэует 80%-ной ис« ходной активности. Для терапевтичес ких целей полученный продукт можно очистить дальше по одному из известных способов.

836083

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Редактор Н. Потапова ТекредЖ. Кастелевич Корректор Н. Бабинец

Заказ 2831/10

Тирам 529 Подписное

ВВИИПИ Государственного комитета СССР но делам изобретений и открытий

113035, Москва, й-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Предлагаемы способ позволяет получить стрептокинаэу с повышенной активностью.

Способ получения стрептокиназы путем выращивания продуцента на питательной среде с последующим выделением целевого продукта нз Фильтрата культуральной жидкости с помощью сор4 бента, элюированием ФосФатным буФе-. ром и осаждением его, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения активности стрептокиназы, выделение осуществляют с помощью карбоксиметилцеллвлозы при рН 2,0-3,5, а элюирование ведут при рН 7,5-8,5.

Источники инФормации, принятые во внимание прн экспертизе

1. Патент США 9 2753291, кл. 195-66, 1956 °