Способ диагностики кишечной инфекции

Способ диагностики кишечной инфекции

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

< 1843953 ьо1са соаетскик

Социалистических

Реслублик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕ Н И Я

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (б1) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 01.11.78 (21) 2679979/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (43) Опубликовано 07.07.81. Бюллетень ¹ 25 (51) М. Кл.з

А 61 В 10/00

Государственный комитет ло делам изобретений и открытий (53) УДК Л 616-67 (088.8) (45) Дата опубликования описания

Ю. П. Царевский, Б. В. Каральник и В. А. Пушкарев

Научно-исследовательский институт "эпидемиологтйг; — — " микробиологии и инфекционных болезней (72) Авторы изобретения (71) Заявитель (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ КИШЕЧНОЙ

ИНФЕКЦИИ

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в серологических исследованиях, направленных на обнаружение антигенов в разл ичном м атер иале.

Известен способ диагностики кишечной инфекции путем проведения с пробой фекалий реакции нейтрализации антител с эритроцитарным диагностикумом с последующим диагносцированием наличия заболевания по положительному результату (1).

Однако регистрируемые при этом отрицательные результаты реакции могут быть ложными из-за присутствия в исследуемом материале агентов, непосредствен. но агглютинирующих эритроциты (лектины и др.). Кроме того, этот способ не гарантирует полной индикации антигенов во всех исследуемых пробах, содержащих искомыи антиген, и, следовательно, точность диагностики оказывается недостаточной.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Зта цель достигается тем, что с пробой фекалий предварительно ставят реакцию прямой гемагглютинации, затем при наличии положительного результата пробу истощают фиксированными эритроцитами и реакцию нейтрализации проводят с истощенной пробой.

11 р и м е р 1. Исследуют пробы фекаций двух больных с клиническим диагнозом паратифа В. Суспензию исследуемой пробы фекалий в 0,85%-ном растворе Мас1 (примерно 1: 1) прогревают в кипящеи водяной бане 15 — 20 мин и центрифугируют 3 мин при 3000 об/мин. Наличие

О-антигена паратифозных В бактерий определяют известным и предлагаемым cnoip собами.

По известному способу из надосадка каждой пробы фекалий готовят ряд последовательных разведений (от 1: 1 до 1: 64) в объеме 0,25 мл в 0,85%-ном растворе

NaCI. Затем во все разведения вносят в объеме 0,25 мл раствор неадсорбированной паратифозной В сыворотки в разведении, содержащем две минимальные агглютинирующие дозы в отношении эритроцитарного

О-дна гностикума группы В. Минимальную агглютинирующую дозу сыворотки определяют путем предварительного титрования посредством реакции пассивной гемагглютинации. После 30 мин экспозиции во все лунки ряда вносят по 0,25 мл коммерческого эритроцитарного О-диагностикума группы В, Результаты учитывают через 1,5—

2,0 ч.

По предлагаемому способу с каждой

;>р пробой фекалий сначала проводят реакцию

843953

Составитель С. Малютина

Редактор М. Сгрельникова Техрсд И, Заболотнова

Корректор В, Нам

Заказ 4459

Изд, № 418 Тираж 694

ВНИИПИ 1 осударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, iK-35, Раушская наб., д. 4/5

Г1одппсиос

Загорская типография Уирполиграфиздата Мособлисполкома

3 прямой гемагглютинации, Для этого из каждой пробы фекалий готовят по одному ряду разведений (от 1: 1 до 1: 4) в объеме 0,5 мл в 0,85%-ном растворе NaC1. Во все разведения вносят по 0,25 мл 0,75%ной взвеси формалинизированных эритроцитов. Результат прямой гемагглютинации учитывают через 1,5 ч. С первой пробой фекалий результат — отрицательныи, со второй — положительный. На этом основании осуществляют истощение второй пробы фекалий формалинизированными эритроцитами. Для этого к осадку от 1,0 мл

10о/о-ной взвеси фоРмалинизиРованных эРитроцитов прибавляют 1,0 мл цельного экстракта фскалий, смесь встряхивают и оставляют на 1 ч при комнатной температуре, Затем пробу центрифугнруют 3 мин прн

3000 об/мин и надосадочную жидкость исслсду от по известному способу.

У первого больного, у которого проба прямой гсмагглютинации с фекалиями отрицательная, О-антигсн выявлен обоими способами. У второго больного проба прямой гсмагглютинации с фекалиями — lIQложптсльная, что свидетельствует о наличии в фекалиях агента или агентов, непосредственно агглютинируюгцих эритроцптов. В пробе фекалий известным способом

0-ангпгсн ttc обнаружен, а предлагаемым способом выявлен в титре 1: 8. При наличии в фекалиях больного агентов, непосредственно агглютинирующих эритроциты, лабораторный диагноз инфекции можсг быть поставлен только при использовании предлагаемого способа.

П р tt м е р 2. Исследованию на содержание О- и Н-антигенов паратифозных В бактерий посредством известного и предлагаемого способов подвергнуты пробы фекалий 209 переболевших паратифом В и находящихся с ними в контакте людей. Для проведения реакции нейтрализации антител применен коммерческий эритроцитарный сальмонсллезный О-диагностикум группы В, приготовленный эритроцигарный

НЬ-днагностикум и коммерческая нсадсорбированная пар атифозная В-сыворотка.

Известный и предлагаемый способы осуществляют аналогично примеру 1, При известном способе постановки рсакции нейтрализации антител с 209 пробаMH фекалий получены отрицательные результаты.

Г1о предлагаемому способу пробы испь.таны в реакции прямой гемагглютинации.

29 проб (13,9 -2,4 /О) дали прямую гемагглютинацию в разведениях не ниже 1; 4.

Следовательно, данные пробы фекалий (13,9%) содержат агент (агснты), вызывающий прямую агглютинацию эритроцитов.

Все пробы фекалий подвергают истощению. Б 10 из 29 полученных надсадков

10 экстрактов истощенных фекалий в реакции нейтрализации антитсл обнаружены О- и

11-антигсны паратифозных В бактерий.

11рсдлагаемый способ в проведенном обследовании позволяет дополнительно

15 выявить специфические антигены в 5% проб фекалий с отрицательным по известному способу результатом.

11редлагаемый способ обеспечивает более точную диагностику кишечных инфекций. Обнаруженные с помощью предлагаемого способа всех людей, в выделениях которых имеются антигены того или иного возбудителя, особенно ва кно для правильной экстренной и ретроспективной диагно>5 стики заболеваний и проведения необходимого объема противоэпидемпчсских мероприятий, 30 Формула изобретения

Способ диагностики кишечной инспекции путем проведения с пробой фекалий реакции нейтрализации антител с эритроцитарным диагностикумом с последующим диагносцированием наличия заболевания по положительному результату, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения точности, с пробой фекалий предварительно

4р ставят реакцию прямой гсмагглютинации, затем при наличии положительного результата . пробу истощают фиксированными эритроцитами и реакцию нейтрализации проводят с истощенной пробой.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

5р 1. Леви М, И. и др. Реакция пассивной гемагглютинации и реакция нейтрализации антител при некоторых инфекциях.

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии, 1962, М 10, с. 40 — 44.