Способ получения иммобилизованного дигитонина

Способ получения иммобилизованного дигитонина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ ЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (11)857144 (61) Дополнительное к авт. свмд-ву— (22) Заявлено 130779 (21) 2804495/23-04 с присоединением заявим М— (23) Приоритет

Опубликовано 230881, Бюллетень Н9 31

Дата опубликования описания 23.08.81 (51) М.. Кл.3

С 07 Ю 21/00 °

Государствеииый комитет

СССР ио делам изобретеиий и открытий (53) УДК 547.689. .6.07(088.8) (72) Авторы изобретения

И. В. Березин, А. М. Егоров и А. В. Ананичев, Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного

Знамени государственный университет имени М.В. Ломоносова (7 1) Заявитель (54 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММОБИЛИЗОВАННОГО ДИГИТОНИНА

Изобретение относится к способу получения иммобилизованного дигитонина, который является одним из наиболее распространенных представителей класса стероидных сапонинов.

Известно, что дигитонин является аналитическим реактивом на свободный холестерин, с которым он образует нерастворимый осадок (11 .

Дигитонин, иммобилизованный химическим путем на нерастворимом носителе, может быть использован для специфической сорбции холестерина из биологических жидкостей, в частности для удаления избыточного холестерина 15 из плазмы крови.

Получение иммобилизованных стероидных сапонинов, в частности дигитонина, в литературе не описано.

Известны способы иммобилизации фер-20 ментов на твердых носителях на оснОве двуокиси кремния 2).

Цель изобретения — получение иммобилизованного дигитонина, который можно было бы испольэовать в качестве 25 сорбента для удаления холестерина.

Указанная цель достигается описы-. ваемьхи способом, заключающимся в том, что дигитонин, предварительно окисленный периодатом натрия, обрабатывают 30 о силохромом или силикагелем, содержащими свободные 3-аминопропильные группы.

Связывание дигитонина с носителем происходит за счет взаимодействия альгидных групп окисленной формы дигитонина с амнногруппами носителя с образованиеМ ковалентных связей типа оснований Шиффа. Наличие химической связи между дигитонином и носителем обеспечивает прочное удерживание дигитонина на поверхности носителя при перфузии через него плазмы крови. Выбранные носители отличаются инертностью по отношению к компонентам крови.

Способ 6существляют следующим образом.

Дигитонин окисляют периодатом натрия., как правило, в темноте при перемешивании в течение 3 ч при температуре 18-20оС. Более длительный срок инкубации или повьыение температуры нежелательны, так как это приводит к более глубокому окислению днгитоиина.

К полученному раствору, содержащему окисленный дигитонин, добавляют предпочтительно макропористый аминированный 3-аминопропилтриэтоксисиланом силикагель или силохром и перемешивают

857144

Формула изобретения

Составитель Ю. Хропов

Редактор Н. Лазаренко Техред Л. Пекарь КорректорМ. щароши

Заказ 7136/37

Тираж 397 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. ужгород, ул. Проектная, 4 в течение 6 ч при комнатной температуре. На 1 r носителя обычно связывается 15-20 мг дигитонина.

Пример 1 ° 1 г дигитонина растворяют в 200 ьш воды при нагревании, прй этом образуется коллоядный раствор. К полученному раствору после охлаждения его до комнатной температуры добавляют 0,5 г перяодата натрия.

Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в темноте в течение 3 ч. z полученному раствору, содержащему окисленный дигитонин, добавляют 10 г макропористого силохрома с размером нор 700-1000 Я, аминированного 3-аминопропилтриэтоксисиланом, и перемешивают в течение 6 ч пои 15 комнатной температуре. Полученный препарат иммобилизованного дигитонина отделяют на стеклянном фильтре и тщательно отмывают 40В-ным раствором спирта от несвязавшегося дигитонина до отрицательной реакция с холестерином. На 1 г носителя связывается

18 мг дигитонина.

Пример 2. Способ осуществляют согласно примеру 1, однако в качестве носителя используют макропористый аминированный 3-аминопропилтриэтоксисиланом силикагель с размером пор 800-1200 K. Ha 1 r носителя связывается 17 мг дигитонина.

Дигитонин, иммобилизованный на аминированном силикагеле или силохраме предлагаемым способом, в опытах по освобождению крови от избыточного холестерина, в отличие от применявшегося ранее активированного угля, действует строго селективно и связывает свободный холестерин в нерастворимый комплекс.

Способ получения иммобилизованного дигитонина, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что дигитонин окисляют периодатом натрия, затем обрабатывают силохромом или силикагелем, содержащими свободные 3-аминопропильные группы.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Робертс Дж. Основы органической химии. М., "Химия", 1978, т. 2, с. 571.

2. Иммобилизованные ферменты

Под ред. И. В. Березина, И., ИГУ, 1978, с. 105-.126.