Способ количественного определения гидразида изоникотиновой кислоты
Патент 857810
Авторы
Классы МПК
Способ количественного определения гидразида изоникотиновой кислоты
Иллюстрации
Реферат
Союз Советскик
Социалистических
Республик
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИ ЕТЕЛЬСТВУ
< >857810 (61) Дополнительное к авт, сеид-ву (22) Заявлено 05.1279 (21) 2 84 7486/2 3-04 с присоединением заявки ¹â€” (23) Приоритет—
Опубликовано 2308.81. Бюллетень N9 31
Дата опубликования описания 230881 (51) М. Кл.
G 01 и 21/78
Государственный комитет
СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 543.432 (088.8) (72) Авторы изобретения
A.Õ.ËàéïàHoâ и Т.В.Обухова
1
f (1
Курский государственный медицинский институт (71) Заявитель (54 ) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ГИДРАЗ ИДА ИЗ ОНИ КОТИ НОВОЙ КИСЛОТЫ
Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения гидраэида изоникотиновой кислоты {ГИНК).
Известен способ количественного определения ГИНК, путем обработки анализируемой пробы п-диметиламинобензальдегидом в кислой среде с последующим фотометрированием полученного раствора (1 j.
Недостатком способа является низкая избирательность. Определению мешают метазид, фтивазид, ларусан, салюзид и т.д.
Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения ГИНК путем обработки анализируемой пробы хлоридомЬ2.,3,5-трифенилтетразолия при рН 20 среды 2,5-2,75 с последующей обработкой сульфатом железа в присутствии бромной воды и добавления этилового спирта и фотометрирования полученного при этом раствора (21.
Недостатками способа являются невысокая точность — ошибка определения
0,83%, низкая чувствительность 1,0 мкг длительность, время определения 4550 мин, сложность проведения анализа 30 (требуется 8 операций) и плоХая избирательность (определению мешает присутствие различных сахаров и крахмала), Цель изобретения — повышение точности, чувствительности, избирательности и сокращения времени определения и упрощение способа.
Поставленная цель достигается тем, что согласно способу количественного определения ГИНК в качестве соли тетразоля используют 0,0990,0103-ный водный раствор китротетразолиевого синего и проводят обработку при рН среды 11,0-12,1 с последующей обработкой полученноro раствора хлороформом и фотометрированием хлорофор- . менного слоя
Реакция между ГИНК и нитротетразолиевым синим протекает в молярном соотношении 1:1, спектральные характеристики продукта реакции, полученные с помощью спектрофотометра
СФ-16, свидетельствуют о том, что максимум светопоглощения окрашенного раствора находится при длине волны
1 = 530 нм.
Количественное определение ГИНК проводят фотометрическим способом по предварительно построенному калибро857810 вочному графику, Оптическую плотность раствора измеряют на фотоэлектроколориметре ФЭК 56-М в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, светофильтр Р 6 (А= 540т10 нм). В качестве раствора сравнения применяют хлороформ (слепой опыт).
Построейие калибровочного графика для ГИ НК.
В делительные воронки помещали
Ою1 Ок2 0 3к Ог4 0 5е 0 ба Ок7мл стандартного раствора (концентрация
ГИНК в стандартном растворе 0,5 мг/мл) в каждую воронку добавляют соответ ственно О 9; О 8; О 7; О 6; О 5 О 4;
0,3 мм дистиллированной воды, по 1мл
0,1Ъ-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,4-0<5 мл 0,1 Н., раствора едкого натра для создания рН 11,0-12,10. Крашенные продукты извлекают дважды хлороформом по
20 мл. Хлороформенные извлечения переносят в мерные колбы емкостью 50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом. В качестве раствора сравнения используют хлороформ (слепой опыт). Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют с помощью фотозлектроколориметра ФЭК 56-М в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, светофильтр Р 6 (3.= 540110 нм). По результатам измерения оптической плотности строят калибровочный график, Количественное определение ГИНК при рН = 11,0.
Пример 1. Определение ГИНК в нижней области графика. Содержание ГИНК 0,05 мг в пробе.
Точную навеску, около 0,05 r иаониазида, переносят в мерную колбу .емкостью 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора водой до метки» 0,1 мл приготовленного раствора (содержание
ГИНК в пробе 0,05 мг) переносят в делительную воронку, куда добавляют последовательно: 0,9 мл дистиллированной воды, 1 мл 0,099%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,4 мл 0,1 н ° раствора едкого натра, В результате мгновенно образуется фиолетовое окрашивание.
Окрашенный продукт извлекают дважды хлороформом по 20 мл. Хлороформенные извлечения переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом. В качестве раствора для сравнения используют хлороформ (слепой опыт), Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-М, кювета 20 мм при Х= 540 10 нм.
Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНК в нижней области графика представлены в табл.1.
Пример 2. Определение ГИНК в оптимальной области графика. Содержание ГИНК 0,20 мг в пробе.
Точную навеску, около 0,05 r изониазида, переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора водой до метки, 0,4 мл приготовленного раствора (содержание
ГИНК в пробе 0,20 мг) переносят в делительную воронку, куда добавляют последовательно: 0,6 мл дистиллированной воды, 1 мл 0,1Ъ-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,4 мп 0,1 н.раствора едкого натра.
В результате образуется мгновенно фиолетовое окрашивание. Окрашенный продукт извлекают дважды хлороформом по 20 мп. Хлороформенные извлечения переносят в мерную колбу емкостью
50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом. В качестве раствора сравнения используют хлороформ ( слепой опыт). Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-М, кювета 20 мм при А= 540+10 нм.
Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНК в оптимальной области графика представлены в табл. 2.
Пример 3. Определение ГИНК в верхней области графика. Содержание
ГИНК 0,35 мг в пробе.
Точную навеску,около 0,05 г изониаэида, переносят в мерную когбу емкостью 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора водой до метки. 0,7 мл приготовленного раствора (содержание ГИНК в пробе 0,35 мг) переносят в делительную воронку, куда добавляют последовательно: 0,3 мл воды дистиллированной, 1, мл 0,1%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,4 мл
0,1 н.раствора едкого натра. В результате мгновенно образуется фиолещ товое окрашивание. Окрашенный продукт извлекают дважды хлороформом по 20 мл.
Хлороформенные извлечения переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом (слепой опыт). Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-М, кювета 20 мм при k =
=540+10 нм.
Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНК в верхней области графика представлены в табл. 3.
Количественное определение ГИНК при pH = 12,1.
Пример 4. Определение ГИНК в нижней области графика. Содержание
ГИНК 0,05 мг в пробе.
Точную навеску,около 0,05 г иэониаэида, переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют в дистил857810 лированной воде и доводят объем раствора водой до метки. 0,1 мл приготовленного раствора (содержание ГИНК в пробе 0,05 мг) переносят в делительную воронку, куда добавляют последовательно: 0,9 мл дистиллированной воды, 1 мл 0,1Ъ-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,5 мл
0,1 н.раствора едкого натра. В реэуль тате мгновенно образуется фиолетовое окрашивание. Окрашенный продукт извлекают дважды хлороформом по 20 мл.
Хлороформенные извлечения переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом. В качестве раствора сравнения используют хлороформ (слепой опыт), Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-М, кювета 20 мм при А = 540 10 нм.
Результаты количественного опре- 20 деления и статической обработки 10 определений ГИНК в-нижней области графика представлены в табл. 4.
Пример .5. Определение ГИНК в оптимальной области графика,.Содер- 25 жанне ГИНК 0,20 мг в пробе.
Точную навеску, около 0,05 г изониазида, переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раство- ® ра водой до метки.0,4 мл приготовленного раствора (содержание ГИНК в пробе
0,20 мг) переносят в делительную воронку, куда добавляют последовательно: 0,6 мл дистиллированной .воды, р
1 мл 0,1%-ного водного раствора нитротетраэолиевого синего, 0,5 мп 0,1 н. раствора едкого натра. В результате образуется мгновенно фиолетовое окрашивание. Окрашенный продукт извлекают дважды хлороформом по 20 мл. Хлороформенные извлечения переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом. В качестве раствора сравнения используют хлороформ (слепой опыт), 45
Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколорнметра ФЭК 56-М, кювета
20 мм при Л= 540 10 км.
Результаты количественного опре- Я деления и статической обработки 10 определений ГИНК в оптимальной области графика представлены в табл.5.
Пример 6. Определение ГИНК в верхней области графика. Содержание ГИНК 0,35 мг в пробе.
Точную навеску, около 0,05 г изониазида, переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют в дистил- лированной воде и доводят объем раст- 60
sopa водой до метки. 0,7 ил приготовленного раствора (содержание ГИНК в пробе 0,35 мг) переносят в делительную воронку, куда добавляют последовательно: 0,3 мл дистиллированной 65 воды, 1 мл 0,099%-ного водного раствора нитротетраэолиевого синего, 0,5 мл 0,1 н.раствора едкого натра.
В результате мгновенно образуется фиолетовое окрашивание..Окрашенный продукт извлекают дважды хлороформом по 20 мл. Хлороформенные извлечения переносят в мерную колбу емкостью
50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом (слепой опыт).Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-М, кювета 20 мм при
3. = 540110 нм.
Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНЕ в верхней области графика представлены в табл. 6.
Пример 7. Количественное определение ГИНК в таблетках с содержанием действующего вещества 0,3 r.
Точную навеску, около 0,05 г порошка растертых таблеток, взбалтывают с 30 мл дистиллированной воды, раствор фильтруют в мерную колбу емкостью>
100 мл, промывая осадок на фильтре
20-30 мл воды. Полученный объем раствора доводят водой до метки, 0,4 мл приготовленного раствора переносят в делительную воронку, добавляют
0,6 мл дистиллированной воды 1 мл
0,1%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего и 0,4-0,5 мл 0,1 и. раствора едкого натра для создания рН среды 11,0-12,1. Образовавшийся окрашенный в фиолетовый цвет раствор извлекают дважды хлороформом по 20 мл, собирая экстракт в мерную колбу емкостью 50 мл. Объем экстракта доводят до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколори,иетра ФЭК 56-М в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при . = 540
110 нм. В качестве раствора сравнения используют хлороформ (слепой опыт).
Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНК в таблетках представ лены в табл. 7, Как видно иэ данных, приведенных в таблицах 1-6, относительная ошибка метода количественного определения
ГИНК в оптимальной области не превышает +0,67%, а в случае таблеток (табл. 7) + 1,69, что полностью удовлетворяет требованиям фармацевтического анализа. Сравнительная характеристика методов количественного определения гидраэида изоникотиновой кислоты по следующим параметрам точность, чувствительность, время выполнения внутригрупповая специфичность представлена в табл. 8.
Предлагаеьый способ точен, прост в выполнении, высокочувствителен
857810 (чувствительность реакции составляет
? ° 10 7 г/мл) и специфичен. Подобную реакцию не дает ни один из препаратов, производных изоникотиновой кислоты (метазид, фтивазид, ларусан,салюзид, салюзид растворимый и др.), а также исходные продукты синтеза
ГИНК. и для определения примеси ПИНК в противотуберкулезных препаратах производных изоникотиновой кислоты при контроле качества препарата в заводских условиях и контрольно-аналитических лабораториях. Количество аналитических операций сокращают с 8 до
5, что упрощает анализ и сокращает время его проведения на 20-25 мин, полностью исключает расходы этилового
10 спирта.
В связи с этим метод экстракционной фотсметрии может использоваться
Таблица
Найдено вещества
Метрологические данные
Содержание вещества в пробе,взятой на анализ мг
Навеска вещества, г
В пересчете на наве ску, г
В пробе, мг
0,209
О, 0521 101, 36 К=99,62
0,0514
0,0514 б =1,16 (1Х вЂ” — 0,37
0,0480
0,0488
0,0513
0,192
0,195
0,0490
0,0493
0,0511
0,0490
0,0493
0,0511
Д =0,85
М=99,62+
+О, 85
А=+0,85
0,205
0,202
0,0504
0,208
0,193
0,201
98,36
100,00
99,41
0,203
О i 197
99, 39
0,0496
Таблица 2
Содержание вещества в пробе взятой на анализ, мг
Найдено вещества
Навеска вещества, Г
Метрологически.е данные
В пересчет е н а навеску, r
В пробе, мг
0,654
0,2044
0,1972
0,2000
0,0511
О, 0493
X=99,77
8=0,95
0,631
0,640
0,652
0,651
0,0500
0,0508
0,0509
0,2032
0,2036
О, 0511
0,0489
0,2040
О, 1968
98,84
0,0510
Ою0492 100 61
0,0502
0,1992
0,2024
0,1948
О, 0498
99,?0
0,0510
0,0496
99,61
98, 18
0,0506
0,0487
0,0507
0 0516
О, 0489
0,0502
0 0510
0,0496
О, 0514
0,0490
0,0493
0,0511
0,0507
0,0507
0,0516
0,0489
0,0502
0,0510
0,2056
0,1960
О, 1972
0,2044
0,2028
О, 2064
0,1956
0,2008
0,2040
0,1984
0,653
0,630
0,638
0,650
0,623
0,0521
0,0480
0,0488
0,0513
0,0504
0,0521
0,0451
0,0502
0 0507
0,0493
0(0521
0,0481
0,0502
0,0507
0,0493
97,96
98 99
100, 39
99,41
100,97
99, 42
100,61
100,42
99,41
100,39
G=Oi 30
3 =0,67 р Р
М =99 774.
Т0,67
А =+0,67
857810
Т а блица 3
Навеска вещества, г
Найдено вещест ва
Содержание вещества в пробе, взятой на анализ, мг
В пересчете на навеску, г
В проб мг
98,77
100,78
99,59
100 41
99,80
98,42
100,9 7
99 40
98,04
99, 19
Х=99, 54
6 =0,96
А =+0,69
Таблица 4
Метрологические данные
Найдено вещества
Содержание вещества в пробе,взятой на анализ мг
Навеска вещества, г
В пробе, В пересчемг те на на- Ъ веску, г
L б,0514 0,0514
Х=99, 70
0 =0,95
100,39
98,45
98,98 . 98,99
99,40
100,98
0,206
0,203
0,0512
0,0515
0,0512
0,0507
0,0487
0,0507
0,0487
0,0515
0,0492
0,0497
0,0503
0,0510
Cj=0, 30
Д =0,69
M=99, 7+
+0,69
0,0492
0,0497
0,0503
0,195
О, 197
0,200
0,206
0,0492
0,0515
0i0515
0,0492
0,05 15
0,0515
0,0510
О, 0498
0,0508
100,80
100,98
A=+0,69
О, 0502
0,0502
0,0513
0,201
0,205
0,0498
0,0508
0,0514
0 0513
0,0509
0,0499
0,0514
0,0504
0,0509
0,0499
99,03
99,01
0,204
0,200
0,0504
Таблица 5
Найдено вещества
Навеска вещества, г
Содержание веще ст в а в пробе,взятой на анализ мг
Метрологические данные
В пробе, В пересчемг те на навеску,г
Х=99,89
G =0,84
100,78
98,83
99,59
98,99
100,6О
0,0516
0,0509
0,0490
0,0492
Ок0506
0,2064
0,2036
О, 1960
О, 1970
0,2024
0,2048
0,2060
О, 1968
0,1988
0,2012
0,660
0,651
0.627
0,0512
0,0515
G„=0 27
О =0,62
М 99, 89+
+0,62
0,0492
0,630
0,648
0,0492
0,0503
О, 0489
0,0514 .0,0490
0,0493
0 0511
0,0507
0,0516
0,0502
0,0510
0,0496
0,3423
0,3598
0,3430
0,3451
0,3577
0,3549
0,3612
0,3514
О, 3570
0,3472
1, 034
1,110
1,044
1,060
1,092
1,068
1,115
1,067
1,069
1,053
0,3381
О, 3626
0,3416
0,3465
О, 3570
0,3493
О, 3647
0,3493
0,3500
0,3444
0,0483
0,0518
0,0488
0,0495
0,0510
0,0499
0,0521
0,0499
0,0500
0,0492
1е т рол о гиче ские данные б, =0,30
3 =0,69
М =99, 54+0,69
857810
Продолжение табл 5
Навеска вещества, r
Содержание вещества в пробе,взятой на анализ, мг
Найдено вещества
Ме трологические данные
В пробе, В пересчемг те на % навеску, г
0,.1992
0,2032
0,2056
0,2016
0,1967
0,2056
0,2048
0,2008
0,0492
0,0514
0,0512
0,0502
0,630
0,658
0,655
0,643
0,0498
0,0508
0,0514
О, 0504
99,61
99,60
Найдено вещества, r
Содержание вещества в пробе,взя- 0 той на анализ мг
Найдено вещества
Метрологические данные
В пробе, В пересчемг те на на- % веску, r
0,3598
Х=99,78
0,3626
0,3437
0,3430
0,3507
0=0,95
С =О,ЗО
)(Р др=0,69
М=99,78+
+0, 69
A=+0,69
0 3598
0,3479
0,0508
О, 0514
0,0504
0 3556
О, 3598
0,3528
1,090
1,074
1,084
О, 3563
0,3514
0,3542
0,0509
0,0502
0,0506
100,20
97,66
100,40
Таблица
Метрологические данные
Найдено ГИНК
Средний вес таблетки, г
Навеска порошка растертых таблеток, г
В навес- В пересче- В % к ке, г те на сред номинальний вес,г ной
X=100,О9
99,01
99,70
97,63
98,70
99,50
100 70
103,03
101,43
100,10
101,10
0,3237
О, 3237
0,3237
0,3237
О, 3237
6=2,39 „=О, 76
3 =1,69
M=100,О9
0, 3237
0,3237
0,3237
0,3237
0,620
А=+1,69
0,630
0,620
0,610
0,3237
0,0512
0,0515
0,0492
0,0497
0,0503
0,0510
0,0498
0,0490
0 0487
0,0483
0,0492
0,0488
{},0495
0 0510
0,0518
0,0512
0,0507
О, 3500
0,3605
0,3444
0,3479
0,3521
О, 3570
0,3486
1,100
1,109
1,051
1,050
1,071
1,100
1,064
0,582
0,578
0,566
0,584
0,578
0 i 586
0,0450
0,0450
0,0437
0,0450
0,0450
0,0462
0,0487
0,0487
0,0475
0,0475
0,0514
0,0518
0,0491
0,0490
0,0501
0,0514
0,0497
0,2973
0,2991 0,2929
0,2961
0,2985
О, 3021
О, 3091
О, 3043
О, 3003
0,3033
98, 79 A=to,62
101 18.
Табли ца 6
100, 39
100,58
99,80
98,59
%9, 60
100,78
99,80 б57810
14
Таблица 8
Навеска веще ст эа, r
Чувствительность мкг
Еоличество ана литиче ской операции
Точность. анализа в оптимальной точке
Найдено ГИНЕ
Время анализа, мин
Специфичность
Способ
Из ве стный
Неспеци1 45 50 8 фнчный
+О, 83
Специ5 фичный
15-20
+0,67 0,2
Формула изобретения
Способ количественного определения гидразида изоникотиновой кислоты путем обработки анализируемой пробы солью тетразолия с использованием фотометрирования, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью упрощения и сокращения времени определе,ния, в качестве соли тетразолия используют 0,099-0,10%-ный водный раствор нитротетразолиевого синего и обработку ведут при рН среды 11,012,1 с последующей обработкой полуСоставитель Л. Соломенцева
Техред T. Маточка Еорректор Г. Решетник
Редактор Н. Рогулич
Заказ 7230/70 Тираж 907 Подписное.
HHHHIIH Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб, д. 4/5
Филиал ППП "Патент", r . .Ужгород, ул. Проектная, 4
0,0514
0,0508
О;0544
0,0498
0,0507
0,0510
0,0512
0,0486
0,0503
0,0509
Предлагаемый 0,0514
0,0490
0,0493
0,0511
0,0507
0,0515
0,0489
0,0502
1 0,0510
0,0496
0,0510
0,0497
0,0541
0,0490
0,0513
0,0512
0,0507
0,0482
0,0500
0,0511
0 0511
0,0493
0,0500
0,0508
0,0509
0,0510
0,0492
0,0498
0,0508
0,0487
99,22
97,83
99,45
98,39
101,18
100,99
99,02
99,18
99,40
100,39
99,42
100,61
101,42
99,41
100,39
98,84
100,61
99,20
99r61
98, 18 ченного раствора хлороформом и фотометрированием хлороформенного слоя.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Коренман И.и. Фотометрический анализ. Методы определения органических соединений, И., "Химия", 50 1970, с. 234.
2. Hashml И.й., Rashld Abdur, Azam Faroog. Spectrophotometr1c
determlnatlon of lxonlcotlnlc acid
hydrazlde. - "Nlkrochlm acta",1966, 55 9 ), р. 513-517 (прототип).