Способ культивирования клеток

Способ культивирования клеток

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

- (72) Авторы изобретеим я

Э. И. Лежнев, О. П. Макарова, Б. К. Гаврилюк, С. Б. Naxaposa и Э.М. Швирст

Институт биологической физики АН СССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК

Изобретение относится к технике культивирования тканевых клеток животных и человека и может найти применение в медицине, сельском хозяйстве, вирусологии, онкологии для получения

S клеточной биомассы в производстве биологически активных препаратов, вакцин и сывороток.

Известен способ культивирования клеток с помощью микроносителей на.ос; нове полимерного материала 1).

Однако высокие концентрации микроносителя ингибируют рост клеток и способ не обеспечивает высокого выхода целевого продукта. 1S

Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта.

Цель достигается тем, что согласно способу культивирования клеток с помо- щью микроносителей, в качестве микроносителей используют частицы сополимера стирола с дивинилбензолом, покрытые коллагеном.

Пример. Для опыта используют клетки ВМК-21 (культура клеток иэ почек однодневных сирийских хомяков).

В качестве микроносителей для культивирования используют сополимер стирола с 8Х-ным дивинилбензолом. Микроносители диаметром 0,1-0,8 мм дваждЫ кипятят в бидистилляте. После этого выдерживают в течение 5-10 мин в 1Х-ном растворе коллагена; удалив излишек раствора коллагена, проводят полимеризацию покрытия в течение 2 ч при комнатной температуре и затем автоклавируют в растворе Хенкса при 0,5 атм в течение 1 ч. Для культивирования клеток используют среду "Игла" с 10Х бычьей сыворотки. В чашки Карелля вносят 15 мл питательной среды и 1 г микроносителя. Посевная концентрация клеток составляет 500 тыс. клеток на

15 мл питательной среды. Условия кульо тивирования: рН среды 7,0; Т 37 С.

Общий выход клеток через 6 дней составляет 70 млн.

3 8725

Прн использовании в качестве микро носителей частиц сополимера стирола с 8Х-ным дивинилбензолом, покрытых коллагеном, возможно культивирование клеток при концентрации 1 г микроноS сителей на 15 мл питательной среды.

При использовании микроносителей типа "Cytodex" с концентрацией l

Микроносителя на 200-500 мл питатель« ной среды выход культивируемых кле- 1а ток составляет 2 ° 10, при этом поверх» ность, на которой закрепляются клет" ки1составляет 0,6 м, повышение концентрации микроносителей ингибирует рост клеток. При использовании сополимера стирола с 8Х-ным дивинилбензолом s том же объеме питательной среды (200-500,мл) выход культивируемых клеток составляет 6 10ш,,что в три раза выше, чем при культивйрова-, нии на микроносителях типа "Cytodex", 47 4 а поверхность, на которой закрепляются клетки, составляет 1,8 м .

Предложенный способ позволяет значительно увеличить выход целевого продукта.

Формула изобретения

Способ культивирования клеток с помощью микроносителей, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, в качестве микроносителей используют частицы сополимера стирола с дивинилбеизолом, покрытые коллагеном.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

l.. Levine 0.W. et а11. Homogenius

Gultlvatlon of animal cells for the

productton of virus and virus product, "8 lotechno1ogy and Bioengineerin9

N 1l, 1969 рр. 875-885.

Составитель С. Малютина

Редактор С, Тимохина Техред Л.Пекарь Корректор C 111екмар ,Заказ 8948740 Тираж 531 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

)13035> Москва Ж-35 Раушская наб. «8. 4/5

Филиал ППП "Патент.", r. Ужгород, ул. Проектная, 4