Способ определения пировиноградной кислоты в крови

Способ определения пировиноградной кислоты в крови

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советскнк

С оциалнстнчвскня

Ресоубйнк

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCKOMY СВИ ЮтИЛЬСтВУ (61) Дополнительиов к авт, сеид-ву (22) Заявлено 130280 (21) 2877502/28-13 (51 jN с присоединением заявки Но

G 01 М 33/52

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (23) Приоритет(53) УДК 615. 3 (088 ° 8) Опубликовано 30.10.81, Ьюллатеиь Й9 40

Дата опубликования описания 3Q1081 (72) Автор изобретения

П.М.Бабаскин

Психиатрическая клиническая больница 9 им. П.П.Кащенко (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПИРОВИНОГРАДНОЙ

КИСЛОТЫ В КРОВИ

Экстинкция

Количество пировиноградной кислоты в стандарте, мкг

9 про2О бы

1,0

2,0

4,0

8,0

30

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в клинической биохимии при изучении энергетического обмена.

Известен способ определения пиро. виноградной кислоты в крови путем получения безбелкового фильтра с послецующей обработкой его динитрофенилгидразином и фотометрии смеси (1).

Однако известный способ трудоемок и недостаточно точен.

Цель изобретения — повышение точности способа и ускорение его.

Поставленная цель достигается тем, что способ определения пировиноградной кислоты в крови осуществляют путем получения безбелковогo фильтрата с последующей обработкой его динитрофенилгидразином и фотометрии смеси. в реакционную смесь после обработки ее дифенилгидразином вносят водный раствор NaOH.

Пример. 0,1 мл капиллярной крови вносят в центрифужную пробирку в которую предварительно наливают

1,9 мл 5%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Содержимое смешивают и центрифугнруют 20 — 30 мин при

1500 об/мин. Надосадочную жидкость переносят в обыкновенную пробирку и прибавляют О, 4 мл О, 1%-ного динитрофенилгидролизина (ДНФГ) и ставят пробу на 20 мин в темное место. Затем приливают 1 мл 1%-ного раствора едкого натрия и через 5 мин фотометрируют при синем светофильтре в кюветах

5 мл. В качестве компенсационной жидкости берут контрольный раствор, который готовят также как опытную пробу, только вместо крови берут дистиллированную воду. Расчет проводятпо данным калибровки стандартного раствора пирувата натрия,кототжй обрабатывают так же как опытную пробу крови.

Калибровочная таблица

877436

Количество пирови ноградной кислоты, мгЪ, определенное по способу

Исследуемый субстрат известному предлагаемому

Стандартный раствор пирувата натрия с концентрацией пировиноградной кислоты

5 мгЪ

Пробы крови

4 — 5

2 — 3

0,4-0,7 0,9-1,2

Ьо о,z Á м«т С О,Ф 1000

Составитель С.Малютина

Редактор Е.Дичинская Техред A.Áàáèíåö Корректор А.Ференц

Заказ 9605/68 Тираж 910 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва,Ж-35, Раушская наб.,д.4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул.Проектная, По показателям калибровочной таблицЫ вычисляют цену одного деления экстинкции в микрограммах пировиноградной кислоты для каждой стандартной точки (1,0:4 = 0,25; 2,0:8 = 0,25;

4,0:16 0,25; 8,0:32 = 0,25) и pac: чет пировиноградной кислоты в исследуемой крови проводят по формуле

СК В х C„30OO

10 где количество пировиноградной кислоты в анализируемой крови;

С вЂ” объем крови, в котором требуется определить количество пировиноградной 15 кислоты; цена одного деления экстинкции,мкг пировиноградной кислоты;

Б - экстинкцияопытной пробы; 2О количество крови, идущей в опыт.

1ppp — перевод микрограммов в миллиграммы.

Для того, чтобы определить количество пировиноградной кислоты в

100 мл крови в опыт берут 0,1 мл. Цена одного деления экстинкции 0,25 мкг пировиноградной кислоты, экстинкция опытной йробы 5 делений. Подставляя цифровые данные в формулу, получают

Сравнительные данные количествен". ного анализа пировиноградной,кислоты представлены в таблице.

Из таблицы видно, что предлагаемый способ определения пирувата в

1,5 — 2 раза точнее известного.

Предлагаемый способ прост в выпол-. нении, не требует дефицитных реактивов и обеспечивает высокую точность.

Формула изобретения

Способ определения пировиноградной кислоты в крови путем получения безбелкового фильтрата с последующей обработкой его динитрофенилгидразином и фотометрии смеси, о т л и ч а-: ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа и ускорения его, в реакционную смесь после обработки ее дифенилгидразином вносят водный раствор NaOH.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Покровский A.A. Биохимические методы исследования в клинике. М., "Медицина", 1969, с. 254-255.