Сополимер 3-0-[4-0-( @ -d-маннопиранозил)- @ -l- рамнопиранозил- @ -аллил-d-галактопиранозида с акриламидом, обладающий серологической специфичностью 0-фактора 3 бактерий рода сальмонелла,относящихся к серологической группе е

Сополимер 3-0-[4-0-( @ -d-маннопиранозил)- @ -l- рамнопиранозил- @ -аллил-d-галактопиранозида с акриламидом, обладающий серологической специфичностью 0-фактора 3 бактерий рода сальмонелла,относящихся к серологической группе е

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

н>879970

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 2%11.79 (21)2841900/ 23-05 с присоединением заявки N (23) Приоритет

Опубликовано 150782, Бюллетень ¹ 26

Дата опубликования описания 150782 (31) М. Кд.

С 08 F 216/12С 08 F 220/56

Государственный комитет

СССР но делам изобретений и открытий (53) УДК 678. 745 (088.8) Н.К. Кочетков, Б.А. Дмитриев, А. Я. Черняк q И"тИ,Прк зовский, Ю. Я. Тендетник и Н.M. Овчарова

4 1

Институт органической химии им. Н.Д. Зе ийского АН СССР .> и Центральный научно-исследователь ский нститут ф эпидемиологии

/ (72) Авторы изобретения (71) Заявители (54) СОПОЛИМЕР 3-0 — (4-0-(P-)3-МАННОПИРАНОЗИЛ) -с(-Ь— -РАМН ОП И РАНОЗ ИЛ) -1".-АЛЛИЛ вЂ” З- A JIAKT OII H РАН ОЗ И ДА

С АКРИЛАМИДОМ,ОБЛАДАЮЩИЙ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ

СПЕЦИФИЧНОСТЬЮ 0-ФАКТОРА 3 БАКТЕРИЙ РОДА

САЛЬМОНЕЛЛА, ОТНОСЯЩИХСЯ К СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ГРУППЕ Е

1 2 лы

Изобретение относится к новому химическому соединению общей формуСЩ 1Н1 COm (tcn;c@-сн1-сн-(сн -сн)

1 сн, СН,ОН

НО < Х+ц =15, (N Л =110-160 обладающему серологической специфичностью 0-фактора 3 бактерий рода

Сальмонелла, относящихся к серологической группе Е, и может быть использовано в области биологии и медицины.

В настоящее время в иммунологических тестах как правило, используются бактериальные липолисахариды.

Недостатком этих препаратов является наличие набора специфичностей (многофакторность), нередко перекрываю- . щихся в случае липополи сахаридов бактерий, принадлежащих к разным серологическим группам. Эта перекрестная реакция в ряде случаев приводит к неопределенности результагоа серологических испытаний.

Известны сополимеры, полученные иэ с(-аллилгликоэида-Э-манноэы (а также D — галактозы, Ь-фукоэы и N-аце5 тил-D-галактоз амин а) и акриламида (1) . Эти сополимеры нашли применение при изучении специфичности лектинов углеводсвязывающих белков растительного или животного происхождения.

Однако они не обладают серологической специфичностью отдельных факторов О-антигенов грамотрицательных бактерий, поскольку О-антигенная специфичность определяется олигосахаридными структурами из 3-5 моносахаридных остатков с уникальной комбинацией типов гликозидных связей и их конфигурации.

Целью.изобретения является синтез сополимера, который может быть использован в иммунологических реакциях в качестве препарата с монофакторной специфичностью 3, характерной для бактерий рода Сальмонелла, относящихся к серогруппе Е. Укаэан. 25 ная цель достигается синтезом со- полимера указанной выше формулы.

Для получения(сополимера синте- . зирован трисахаридный мономер 3-0— 4-0-P-Э-маннопираноэил)-с(-1„-рамнопиранозил1 "Э-галактопираноза (в

87997 0 форме Р-аллилгликозида), имеющий химическую структуру 0-фактора 3 специфических полисахаридов Сальмонелла, и осуществлена его радикальная сополимеризация с акриламидом в воде.

Синтез трисахаридного мономера осуществлен по следующей схеме сн он сн а

Но ОСН1СН=СН1 О ЮЪСН Са

0Н вЂ” — 0

Щ он сн, ок (1(0) 3,— н, () 3- 3со, сн20СОСН5 Ос с

КО ООН2СН=СН Ж СОО О ОСН Сн= сН

0Н он +

ОСОСН (1V) ос ос 4 (П1) СН<ОСОСН

CH)СО (1Ч) 54соо ососН3

СН,ОК

О

ОСН СН=Сн

СН,ОК

Ко OE (vra) 3,--снзсо ъ (спи) E--í

Ключевой стадией синтеза трисахарид| ного мономера является гликозилирование 2,4,6-.три-О-ацетил-Р-аллил-3-галактопиранозида (lу) с помощью пер-О-ацетилбиозилбромида (Ч), полученного из 1,2,3,-три-О-ацетил-4-0 — (2, 3, 4, б-тетра-О-ацетил-ф-Э-манн опи ран оз ил ) =.()-Ь-рамнопиранозы, синтез которой проводится по oggсанной методике (2), Синтез. (ХЧ), включает следующие стадии. Конденсация (.-ацетобромгалактозы с аллиловым спиртом в присутствии окиси серебра в сухом хлороформе с последующим омылением О-ацетильных групп приводит к (5-аллил-2-галактопираноэиду (1) ° При ацетонировании (1) присутствии безводного сульфата еди получается 3,4-0-изопропилиден- -аллил-1«-галактопираноэид (Ila). наряду с 4,б-изомером., (llа) ацетилированием переводится B 2,б-ди-О-ацетил-3,4,0-изопропилиден-) -аллил-1)-галактопиранозид (11б), который в условиях гидролиза разбавленной ук сусной кислот ой превращается в 2,б-ди-О-ацетил- 3-аллил-Э-галактопираноэид (111). Реакцией с триэтилортоацетатом в присутствии и-толуолсульфокислоты (111) превращают в 3, 4-0 -этилорт оацетат, к от орый «без выделения гидролизуют 80Ъной уксусной кислотой, в результате чего получают 2,4,6-три-О-ацетил-1«-аллил-р-галактопиранозид (IV) .

Положение свободной гидрок сильной группы в (1У) доказано методом метилирования и данными спектроскопии ЯМР- « С.

10 При гликозилировании (IV) в аце- тонитриле B присутствии цианида ртути пер-О-ацетилбиозилбромидом (V) из реакционной смеси выделяют кристаллический 2,4,6 три-0-ацетил3-0 — (4-0 (2, 3, 4, б-тетра-О-ацетил-(-Я-маннопиранозил) -2, 3-ди-0-ацетил-g-Ь-рамнопиранозил1-р-аллил-.0-галактопиранозид (VI), при омылении которого метилатом натрия в метаноле получают трисахаридный мономер -3-О-14-0(-f> J) маннопиранозил)—

-d. — (-рамнопиранозил) — P-аллнл- галактопиранозид (Ч?6) . Строение мономера (VIб) следует из,данных моно-.

25 сахаридного анализа и анализа спектра ЯМР- 3C соединения (ЧТб) с привлечением литературных данных . Сополимеризация полученного трисахаридного мономера с акриламидом в воде в присутствии персульфата аммония и тетраметилэтилендиамина приводит к сополимеру приведенной выше формулы, для выделения которого из реакционной смеси использована гель-фильтрация на сефадексе g-100. При гельфильтрации на сефадексах g -50, ф-200 и на сефарозе 2В сополимер также выходит с колонки с холостым объемом,что указывает на принципиаль.ное отличие сополимера в свойствах

40,от полисахаридов и белков .

Сополимер содержит 34% углеводов ,и является водорастворимым. Из данных спектроскопии ЯМР- С следует, что олигосахаридный фрагмент включается в сополимер без нарушения структуры и соотношение углеводного и неуглеводного мономеров в.сополимере составляет 1:13. Сополимер достаточно гомогенен, его молекулярный вес колеблется от 160.000 до

16, 235.000 (данные аналитического ультрацентрифугирования 0,5 и 0,7Вных водных растворов сополимера

Йри 35.000 об/мин). Молекулярный вес сополимера (т.е. «« в общей формуле) можно регулировать, изменяя концентрацию инициатора полимеризации (персульфата аммония) в реакционной смеси..Однако установлено, что изменения в молекулярном весе не влияют на серологическую активность полученных препаратов.

Получение промежуточных соединений и сополимера трисахаридного мономера с акриламидом осуществлено

65 по следующим методикам.

879970

Пример 1. Р -Аллил-D-галактопиранозид (I). 35 мл аллилового спирта, перегнанного над окисью кальция, перемешивают 1 ч с 66 r безводного сульфата кальция и 18 r окиси серебра в 60 мл сухого хлороформа, за- 5 щищая от влаги воздуха. Затем по каплям добавляют раствор 24,6 г cL-ацетобромгалактозы в 60 мл сухого хлороформа и перемешивают еще 2,5 ч. Реакционную смесь фильтруют через слой 10 активированного угля, осадок промывают спиртом, объединенный фильтрат упаривают со спиртом и водой для удаления избытка аллилового спирта.

Полученный при упаривании остаток хроматографируют, на колонке со

100 r силикагеля, вымывая градиентам ацетона в хлороформе (от О до

2% по объему), выделяют 21,7 г

2,3,4,6-тетра-О-ацетил- -аллил-T)—

-галантопиранозида, сироп, /А/Я

13,75 (с 2, хлороформ), Rg 0,5 (хлороформ-ацетон, 97: 3) . Полученное вещество растворяют в 150 мл метанола и омыляют 10 мл 1 н, метилата натрия (20, 24 ч), затем смесь нейтрализуют катионитом КУ-2 (Н+) и упаривают. Остаток хроматографируют на 500 r силикагеля при элюировании градиентом спирта в хлороформе (от 1 до 40% ), выделяют

8,9 r (I) выход 67,7%. После перекристаллизации из ацетона при добавлении пентана (или абсолютного эфира) получают 7,1 г (1), т.пл.

101-102ОС, /а(/Я 11 (с 2, вода). 35

Найдено,Ъ: С 48,72; H 7,19.

С9н.,б 06Вычислено,Ъ: С 49,08; Н 7,32.

Пример 2 ° 3,4-0-изопропилиден-р-аллил-З-гала ктопиранозид 40 (llа) .

1, 5 г Р>-àëëèë-|)-галактопиранози. да перемешивают 24 ч с б г безводного сульфата меди и 2-3 мг П-толуолсульфокислоты в 75 мл абсолютного ацетона. Отфильтровывают осадок, фильтрат нейтрализуют несколькими каплями триэтиламина и упаривают в вакууме. Полученный остаток по данным тонкослойной хроматографии на силикагеле в смеси бензолацетон 45:55,содержит два компонента: главный с Rg 0,45 и минорный R g

0,25. При хроматографировании этой смеси на колонке со 100 r силикагеля при элюировании градиентом смеси ацетона в бензоле (от 1 до 60%) выделяют 1,33 r (Ila) и 0,31 r второго изомера. (11а),выход 75%,т..пл.

91-92 С (абс. ацетон-петролейный эфир) .

)сЦD + 10,3 .(с 2,04, хлороформ) .

Йайдено, Ъ: С 55,12; Н 7,68.

С„, Н „О

Вычислено,Ъ: С 55,37; Н 7,75.

Пример 3. 2,6-Ди-О-ацетил-3, 4, -О-изопрапилиден- Ь-аллил-D-галактопиранозид (116).

1,61 г 3,4-изопропилиден-Р-аллил- Р-галактопиранозида растворяют в 10 мл сухого пиридина и добавляют 5 мл уксусного ангидрида смесь выдерживают 24 ч при 20 С, после чего упаривают с толуолом и гептаном, получают 2,13 r (II6) выход количественный, т.пл.61,563 С (абс.спирт-петр. эфир).(,() о Х)

24 (c 2, хлороформ) . Спектр ПМР (в четыреххлористом углероде), Ij м.д.: 1,31 (синглет, ЗН, СН ), 1,54 (синглет ЗН, СН ), 2,05

Ф (синглет 6Н, CH CO), 5,84 (мультиплет, IН,-ОСН СН=СН ).

Найдено,%: С 55,87; Н 6,94.

С«н«О9

Вычислено,Ъ: С 55,80; Н 7,03.

Пример 4. 2,6-Ди-О-ацетил-P-аллил-13-галактопиранозид (111).

1,43 г 2,б-ди-О-ацетил 3,4-0-йзопропилиден-Р-аллил-9-галактопиранозида растворяют в 16 мл уксусной кислоты и добавляют 8 мл воды, смесь нагревают 35 мин при 95-100 С и упаривают в вакууме, остаток многократно упаривают с толуолом для удаления следов уксусной кислоты.

По данным ТСХ в смеси бензол-ацетон

5:5 остаток наряду с основным компонентом с Ry 0,34 содержит менее подвижную примесь с Rg 0,1. Смесь хроматографируют на колонке с 100 г силикагеля при элюировании градиентом ацетона в хлороформе (от О до

35%), выделяют 1,26 r (111), выход

95%, т.пл. 75-76,5 С (абс.эфирпетр. эфир) . Ц.l> -9,5 (с 2, хлороформ) . Спектр IIMP (в дейтерохлороформе), () м.д: 2,10 и 2,13 (2 синглета, 2 х ЗН, СН СО) 5,85 (мультиплет, 1Н, -ОСН СН-СН ) .

Найдено,В: С 51,09; Н 6,74;

С8 Н.„, Og „

Вычислено,Ъ: С 51,31; Н 6,63.

Пример 5. 2,4,6-Три-О-ацетил- -аллил-1)-галактопиранозид, 1,5 г 2,6-.ди-О-ацетил-р-аллил-у-галактопиранозида кипятят с 5 мл триэтилортоацетата в 7 мл нитрометана в присутствии 2-3 мл tl-- толуолсульфокислоты. Через 10 ч реакционную смесь охлаждают, добавляют

0,3 мл триэтиламина, разбавляют

30 мл хлороформа и выливают в воду со льдом, после чего экстрагируют хлороформом (2 70 мл). Объединенный экстракт упаривают к остатку, содержащему в основном 2,б-ди-О-ацетил-3 4-О-этилортоацетил-P""àëлил-3)-галактопиранозид с Ry 0,5 (TCX в системе бензол-ацетон, 8г2), добавляют 25 мл 80%-ной уксусной кислоты и выдерживают 40 мин при

879970

20 комнатной температуре. Реакционную смесь упаривают, остаток несколько раз упаривают с толуолом для удаления следов уксусной кислоты и затем хроиатографируют на колонке с 200 r силикагеля при злюировании градиентом ацетона в хлороформе (от О до 15%), выделяют 1, 35 г (IV), выход

79%, т.пл. 81-83 С, Я/g -12,5 (с 2, 1 9, хлороформ) . Сйек тр ПМР (в дейтерохлороформе), д м.д.: 2, 07, 2,12 и 2,17 (3 синглета, ЗхЗН, СйзСО).

Найдено, Ъ: C 51,79; Н 6,25.

Сдб Н 2 09

Вычислено,Ъ| С 52,02; Н 6,40.

Пример 6. 3-0 — (.4-0 — (5-Э-маннопиранозил) H-L-рамнопираноэилД

- -аллил-З-галактопиранозид (Уl б) . а) Раствор 950 мг (1,53 ммоль)

1, 2, 3-три-0-ацетил-4-0 — (2, 3, 4,6-тетра О-ацетил- -3-маннопиранозил)—

-(-L-рамнопиранозы (2) в 150 мл абсолютного дихлорметана охлаждают о до 0 С и смешивают с раствором

10,5 мл бромистого ацетила и 2,55 мл воды в 15 мл ледяной уксусной кислоты, содержащей 0,7 мл уксусного ангидрида. Смесь выдерживают 3 ч при 0 С затем выливают в воду со льдом, органический слой промывают холодным раствором бикарбоната натрия (2 ° 50 мл), холодной водой (24

50 мл), быстро сушат безводным сульфатом магния и упаривают, полученный остаток пер-О-ацетилбиозилбромида (У) 2 ч высушивают в вакууме над твердой натриевой щелочью и сразу используют для гликозилирования. б) 530 мг (1,53 ммоль) 2,4,6-три-0-ацетил-Р-аллил-I)-галактопиранозида перемешивают с описанным выше пер-0 в ацетилбиозилбромидом (V) в 10 мл абс.ацетонитрила в присутствии 385 мг (1,53 ммоль) цианида ртути, через 12 ч реакционную смесь упаривают, остаток зкстрагируют хлороформом. Экстракт промывают

1 н, раствором йодистого калия, содержащим 1Ъ бикарбоната натрия (2 50 мл), водой (2 50 мл), сушат безводным .сульфатом магния и упаривают. Из полученного остатка, имеюЩего сложную хроматографическую картйну (данные TCX в системе хлороФорм — ацетон 87:13), хроматографией на колонке с 100 r силикагеля в градиенте смеси ацетона в хлороФорме (от О до 11%) выделяют фракцию, обогащенную продуктом конденсации с Rg 0,42. При концентрации этой фракции и добавлении спирта осаждается 350 мг кристаллов 2,4,6-три-0-ацетил-3-0- j4-0-(2,3,4,6тетра-О-ацетил-)-Э-маннс лираноэил)—

-2.3-ди-О-ацетил-е)=Ь рамнопиранозил3-Р - длил-Э-галактопираноэида (VIa) выход 25,4Ъ, т.пл. 201-203 С (спирт),! е(, g -18, 4 (с 1, 47, хлороформ) . Спектр 1IMP (в дейтерохлороформе), О м. д.: 1, 31 (дублет с 5 Гц, С-СН остатка рамнозы), 2,03-2,20 (мультиплет, 27 Н, СИ СО), 5,82 (мультиплет, 1Н-, ОСН СН=СН ) .

Йайдено,й: С 52,03; H 6,38.

СЬ9Н640,, Вычислено,Ъ: С 51,65; Н 6,00.

330 мл соединения (VIa) растворяют в 300 мл ЗЪ-ного раствора триэтиламина в метаноле и выдерживают

16 ч при комнатной температуре, затем смесь упаривают, полученный остаток упаривают с абс.метанолом (7 20 мл),и высушивают в вакууме, после чего суспендируют в 50 мл абс. метанола и добавляют 3 мл

1 н. метилата натрия в метаноле.

Полученную смесь перемешивают 12 ч при 20 С, затем нейтрализуют катиоо нитом КУ-2 (Н ), упаривают и с коли+ честв енным выходбм выделяют (VI б ), кристаллизующийся при добавлении спирта, . т .пл. 2 32-235 С (водный о спирт) . t J / 51,5 (с 1,7, вода), вещество однородно по данным хроматографии на бумаге в системе бутанол-пиридин-вода, 6: 4 : 3, R галактоза =1.

Найдено,Ъ: С 48,27; Н 7,09.

С«Н980„

Вычислено,Ъ: С 47,72; Н 6,86.

Пример 7. Сополимер 3-0-4-Π†(P-Д-маннопиранозил) 1-ь-рамнопиранозил) — P-аллил-З-галактопиранозида с акриламидом. Раствор 70 мл трисахаридного мономера {ЧХб)и 35 мг акриламида в 0,7 мл дистиллированной воды деаэрируют в вакууме водоструйного насоса в течение 30 мин, затем в смесь добавляют 2 мл тетраметилэтилендиамина и 1 мг персульфата аммония. Смесь выдерживают 2 ч при комнатной температуре, затем разбавляют 0,2 N/0,1 м пиридин-аце" татным буфером (1 мл) и наносят на колонку (2 "35 см) с сефадексом

g 100 и элюируют пиридинацетатным буфером со скоростью 14 мл/ч, собирая фракции по 3,5 мл. Фракции

16-25, содержащие сополимеры,объединяют и упаривают, остаток упаривают с водой (10. 5 мл) и лиофили зуют из раствора в 1 мл воды. После высушивания в вакууме над фосфорным ангидридом получают 55,8 мг сополимера указанной выше формулы foL(16,5 (с 1, вода) . о З

B гидролизате сополимера (2 н о соляная кислота, 100 С, 4 ч) с помощью анализатора углеводов фирмы Техникон (CI1IA) обнаружены рамноэа, манноза и галактоэа в соотношении 1:1:l. Суммарное содержание

8 /9970

l0 углеводов в сонолимсре 33,6% (результаты анализа гидролизата на ана— лизаторе Техникон ) . По данным аналитического ультрацентрифугирования препарат сополимера имеет коэффициент седиментации S о одс, t

3,9 Ы, молекулярный вес оценивается в 160.000 дальтон. С приведенной выше общей формулой полностью согласуются данные спектра HMP- C, позволяющие установить соотношение обоих мономеров (трисахаридного мономера и акриламида) в сополимере, равное 1:13.

Обнаружено, что полученные препараты сополимера трисахаридного мономера с акриламидом указанной общей формулы имеют серологическую специфичность О-фактора 3 бактерий рода Сальмонелла и обладают существенно большей чувствительностью в двух иммунологических реакциях (двойная радиальная иммунодиффуэия по Ухтерлони; реакция ингибирования пассивной гемагглютинации) в срав— нении с липополисахаридами Сальмонелла, относящимися к серологической группе Е. Появление этих свойств (в частности, монофакторной серологической специфичности) связано с включением в сополимер не моносахаридного мономера, как это имеет место в случае аналогов по струк-. туре, а трисахаридного мономера, обладающего химическим строением

0-фактора 3 специфических полисахаридов бактерий рода Сальмонелла группы Е.

Полученный препарат изучен в двух иммунологических реакциях, используемых в практике научных исследований: двойная радиальная иммунодиффузия по Ухтерлони (в микровари= анте) - реакция 1; реакция ингибирования пассивной гемагглютинации (в микроварианте) — реакция 2.

В реакции 1 при взаимодействии с монофакторной сывороткой анти-4 сополимер не давал полос преципитации, в то время, как при взаимодействии с иммунными сыворотками анти-3,10 и анти-3,15 были зафиксированы четкие и гомогенные дуги преципитации, что подтверждает наличие монофакторной специфичности

3 в сополимере. В контрольной реакции проверяли липополисахариды группы Š— липополисахарид Сальмонелла ньюингтон (Π— факторы 3 и

15) и липополисахарид Сальмонелла анатум (О-факторы 3 и 10), исходные концентрации препаратов составляли

1,8 мг/мл. При взаимодействии с сыворотками анти-3,10 и анти-3,15 сополимер давал дуги преципитации до разведения 1:1024 (т.е. до концентрации 0,035 мкг/0,02 мл), в

Формула изобретения

Сополимер 3-0- L4-О-(p-3-маннопиранозил) -с . †(.-рамнопиранозил1-р-ал45 лил-D-галактопиранозида с акрилами-, дом формулы С(@Н2 COMli

1. (СН1 СН Х СК1 СН (СН СН)Ц

C5gOH) 50

СН ОН

ИО ОН

ЫЕ Х+Ц=15, 11=110-1бО обладающий серолсгической специфичностью 0-фак" ора 3 бактерий рода

Сальмонелл, относящихся к серологической группе Е.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Horej si Ч., SmoIek P,, Koceu65 rek Х., Studies on Lectins.ÕÕÕ×. то время как для липополисахаридов

Сальмонелла анатум и Сальмонелла ньюингтон видимые дуги преципитации обнаруживались до разведения 1:16 и 1:8 соответственно (конечные кон5 центрации 2,25 мкг/0,02 мл и

4,5 мкг/0,02 мл), причем наблюдалась некоторая гетерогенность полос преципитации, что свидетельствует о меньшей специфичности препаратов

10 липополнсахаридов. Таким образом, в реакции 1 синтетический сополимер оказался .примерно на 2 порядка более чувствительным,чем липополисахариды

Сальмонелла группы Е, являющиеся аналогами по свойствам к предлагаемому соединению.

B реакции 2 липополисахарид

Сальмонелла анатум ингибировал 1 гемагглютинирующую единицу сыворотки анти-3,10 при концентрации

0,005 мкг/0,05 мл, а сополимер при концентрации 0,0006 мкг/0,05 мл.

При использовании сыворотки анти3,15 в случае липополисахарида Саль. монелла анатум для ингибирования

1 гемагглютинирующей единицы необходима концентрация 0,0025 мкг/

0Ä05 мл, а в случае препарата сополимера — 0,00015 мкг/0,05 мл.

Таким образом, использование изобретения позволяет. повысить чувствительность препаратов, используемых в иммунологических исследованиях при изучении антигенной структуры бактерий рода Сальмонелла, а

З5 также иметь контрольный препарат, обладающий только серологической специфичностью фактора 3 (групповая специфичность Е).

879970

Составитель О. Рокачевская

Редактор 11. Горькова Техред Т.Маточка Коррек т ор -". 1Ие кмар

Тираж 514 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, ° -Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 61 42/30

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Woter-soIubIe o-gIycosyI poIyacryIamide derivatives for specific

precipitation of Iectins, B3ochimica et Biophysira Acta, v. 538, Р 2, 1978, р. 293-298.

2. Koehetkov N.Ê., Dmitriev В.А,, MyXysheva N.И., Chernyak A. J,à, K I imov Е,M., Bayramova N . Å . l, Tor—

gov V I Яуп hesis of 0 — ф — 1)— mannopyranosyI-4-0 — I -rhamnopyra—

nosy -3-D-ga1actopyranose, the

trisaccharide repeating unit of the о-spec ific poIysaccharide from

Salmonella anatum, СагЬойуйгate

Reseach, Р 45, 1975, р. 283 290.