Способ разделения рацематов аминокислот на оптические изомеры

Способ разделения рацематов аминокислот на оптические изомеры

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Соцмалмстмческих

Республик (li)891641 (61) Дополнительное к авт. свкд-ву (22) Заявлено 31.07.79 (2! ) 2804942/2304 с присоединением заявки № (5! )М. Кл.

С 07 С 99/12

1Ьсудврствацвй каиитет

СССР ав двлаи изо4ратеиий и открытий (23 }Приоритет

Опубликовано 23.12,81. Бюллетень № 47

Дата опубликования описания 23.12.81 (53) УДК 547.233. ...07 (088.8) (72) Авторы изобретения

А. С. Бочков, В. А. Даванков и А. А. Кургано (71) Заявитель

Ордена Ленина институт элементоорганических соединений АН СССР (54) СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ РАЦЕМАТОВ АМИНОКИСЛОТ

НА ОПТИЧЕСКИЕ ИЗОМЕРЫ

Изобретение относится к усовершенствованию способа разделения оптических иэомеров аминокислот.

Известен способ разделения рацематов аминокислот, включающий взаимодействие между полистирольной макросетчатой смолой с асимметрическими центрами комплексообразояания, где в качестве насадки используют полисхироль. ную макросетчатую смолу с фиксированными

L-оксипролиновыми лигандами, заряженной ионами двухвалентной меди, а в качестве элюеита — pacrsop гидроокиси. аммония 11) .

Недостатком известного. способа является зависимосп разделения от набухаемости носителя в элюенте, что обуславливают относительно низкую эффективность, лигандрообменного разделения и длительность анализа, равную подчас нескольким десяткам часов.

Цель изобретения — повышение. эффективности и ускорение разделения.

Указанная цель достигается тем, что в способе разделения рацематов в качестве насадки используют силикагель со связанной углеводородной неподвижной жидкой фазой, а в качестве,,,элюента — раствор следующего состава: ацетат, (сульфат) меди 10 — 10 4М; 1 — бензилпролин 0,01 — 0,04 вес.%; ацетат аммония (натрия}

0,5 — 2 aec.%; ацетонитрил — вода (80:70 +

+40:60) ч.

Углеводородную часть насадки насыщают

1=бензилпролином, который образует комплекс с медью, находящейся в элюенте, Разделение рацематов в этих условиях основано- на различной прочности комплексов -оптических изомеров аминокислот с описанной насадкой, содержащей асимметрический е-углеродный . атом в молекуле 1 -бензилнролина. Градиентное изменение состава элюента, величины рН и ионной силы раствора позволяют разделить.не только оптические изомеры одной и той же аминокислоты, но и сложные смеси рацематов различных аминокислот.

Пример 1. На колонне дчиной 250, мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненной

Zorbax ODS. фракции 10 мкм проводят разделение оптических изомеров пролила..Состав элюента: ацетат меди — 10 4М; 1=бенэилпролин

0,01%; ацетат аммония 0,5%; ацетонитрил—

89164 вода 30:70. Скорость элюента — 0,25 мл/мин.

Ввод пробы осуществляют шприцом МЫ вЂ” 10.

Объем пробы — 2 мкл концентрация. пролина (раствор в элюенте) 2 вес.%. Достигнута эффективность 7200 теоретических .тарелок на колонну, при селективности.1,4. Каждый из пиков идентифицируют введением в колонну отдельно каждого из оптических изомеров пролина в элюенте. Анализ проводят на хроматографе;

Цвет — 300.

Пример 2. В условиях, аналогичных примеру 1, проводят разделение при следующем

-Э составе элюента: сульфат меди — 10 М, 1-бензилпролин. 0,04%; ацетат натрия 2%; ацетонитtO

Селектив. ность

Температура, OC

Соотношение

СНЭС:НэО

Углеводородная часть насадки

Аминокислоты

С1 вНЭ7

СвН1з

3: 7

1,6

20 — 50

1,7

4:6

Аргинин

Аспарагиновая кислота

1,85

3,5 : 6,5

25 — 60

20 — 80

СН

1,62

3: 7

Цистеин

СНч(Глутаминовая кислота

С14 НЭ1

1,59

4:6

4:6

20 — 60

145

С1вНз 7

20 — 60

1,39

С1ЭНЭЭ

20 — 60

Гистидин

1,41

С1б НЭ1

20 — 60

20 — 70

20 — 70

20 — 70

Иэолейцин

С16Нэ 1

1,52

1„38

С,Н, 1,42

20 — 70

20 — 70

1,39

20 — 80 .

1.57

20 - 75

1,41

20 — 75

1,36

20 — 60

20 — 60

141

Лейцин . Лизин

Метионин

Фенилаланин

Пр олин

Серии

Треонин

Триптофан

Тирозин

Ci вНз1

С1вНзт

С1вНзт

С1вНЭ7

C1вНз7

С, вНзз

С1вНЭ7

С1вНз7

1 4 рил — вода 40:60, Достигнута эффективность

6700 тарелок прн той же селективности.

Пример 3. В условиях примера 1 проводят разделение оптических изомеров пролина при составе элюента: ацетат меди

5 ° 10 4 М, . 1=бензнлпролии. 0,03%; ацетат. аммония .1,5%; ацетоннтрил — вода 35:65.

Достигнута эффективносп 7100 тарелок при той же селективности.

Пример 4. Аналогично примеру 1 проводят разделения ряда аминокислот с изменением углеводородной части-насадки и соотношения — ацетонитрил:вода.

Данные опытов приведены в таблице.

3,5 : 6,5

3,5 : 6,5

3,5 : 6,5

40: 60

40: 60

40 : 60

40 : 60

40 : 60

35 : 65

35 : 65

35 : 65

35 : 65

Способ разделения рацемвтов. аминокислот. на оптические изомеры, включающий перемещение элюента, содержащего оптические нзомЕр, 5 через слой насадки с асимметрическими центрами комплексообразования, о т л и ч а ющ н и с я тем, что, с целью повышения эффективности и ускорения .разделения, .в качестве насадки используют силикагель с.хими- 4 чески связанной .углеводородной неподвижной жидкой фазой, а в качестве элюента — раствор следующего. состава: ацетат (сульфат) меди

Составитель И Андрианова

Техред Ж. Кастелевич Корректор B. Синицкая

Редактор P. Пицика

Подписное

Заказ 11140/32 Тирах< 446

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4g

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул; Проектная, 4

Формула изобретения

891641 4

10 — 10 М; 1 — бензилпролнн 0,01

0,04 вес.%; ацетат аммония,(натрия) 0,5—

2 вес.%;. ацетонитрил,— .вода 30:70+40:60 ч..

Источники ннформапии, принятые so внимание прн экспертизе

1. Даванков.В. А., Золотарев Ю. A- 1евлин А. Б..Лигандообменная хроматография рацематов УШ.. Количественное расщепление аминокислот на полистирольной матрице с группировками L-окси ролина с цепью анализа энантиомерного. состава аминокислот.— "Биоорганическая химия", 4, 1978, Р 9, 1164 (прототип).