Блок геля для электрофореза

Блок геля для электрофореза

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советския

Социалистическик

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОИ:КОМУ СВИ ИИЛЬСТВУ (61) Дополнительное к аят. сеид-ау (22) Заявлено 3(10480 (23) 2922378/18-25 с присоединением заявки Ho(23) ПриоритетОпубликовано 30.12.81. Бюялетеиь N9 48

Дата опубликования описания 3012.81 (u)894533 р )м. к.з

6 01 N 27/26

Государственный квинтет

СССР но делам изобретеннй н открытнй (53) УДК 543.545 (088.8) (72) Автор изобретения

Б.А ° Морозов (71) Заявитель

Онкологический научный центр ANH СССР (54) БЛОК ГЕЛЯ ДЛЯ ЭЛЕК1РОФОРЕЗА

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в различных областях биологии и медицины.

Более конкретно изобретение относится к гельэлектрэфорезу.

Известно выполнение гелевых носителей .цля элекрофореза в виде цилиндров fl).

Недостатком их является невозможность одновременного анализа нескольких образцов.

Наиболее близким к предлагаемому является блок геля для электрофореза. Блок представляет собой прямоугольный параллелепипед.

Указанные блоки позволяют анализировать одновременно несколько об" разцов в .идентичных условиях (2).

Однако указанная форма блока ге- 2О ля, как и цилиндрическая, позволяет получить невысокое разрешение составных компонентов пробы., Разрешающая способность носителя улучшается выполнением последнего с 25 градиентом. Однако и в данном случае достигаемое разрешение не превышает

1000 Д.

Цель изобретения — повышение разрешающей способности блока геля. Щ

Поставленная цель достигается тем, что блок геля для электрофореэа выполнен расширяющимся в направлении миграции разделяемых компонентов.

Блок геля может быть выполнен в

Форме пластины, противоположные широкие плоскости которой параллельны друг другу и имеют Форму равнобочной трапеции.

Блок геля может иметь также клинообразную форму.

На чертеже изображен блок геля дпя электрофореза.

Б указанной Форме блока геля напряженность электрического поля падает в направлении миграции разделяевжх компонентов, что приводит к формированию отдельных Фракций в виде узких полос.

Пример 1. Известным способом готовят градиент IIAAF (например, 5-2ОВ) с 0,1% SDS в блоке-параллелепипеде и в блоке трапециевидной Фор" мы (или в Форме клина) . Блоки OAAI при этом имеют одинаковую высоту.

Для сравнения разрешающей способности может быть взята любая смесь биополимеров. Цля простоты можно при«

894533

Формула изобретения

ВНИИПИ Заказ 11473/69 Тираж 910 Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 вести сравнительный электрофореэ смеси белков с известным молекулярным весом. Берут навески (по 1 мг) следующих образцов: Я -глобулин человека (мол.вес 160 КД), бычий сывороточный альбумин (мол.вес 68 КД), овальбумин (мол.вес) 43 КД), хемотрипсиноген А (мол.вес 25 КЦ), рибонуклеаэа (мол,вес) 12 КД) .

Белки растворяют в 1 мп электро" форетнческого буфера (ТРИС вЂ” глнциновый рН 8,3), ьякропипеткой наносят

10-15,1(L раствора на оба блока ПААГ.

Злектрофореэ ведут без префореза при постоянном токе 10-15,И A на блок

ПААГ. По окончании электрофореза гели извлекают и окрашивают 0,25а

Coomussie brill blue в смеси изопропанол-уксусная кислота вода (3:1:7) в течении 2-3 ч. Отмывку от несвязавшегося красителя производят

7% уксусной кислотой до исчезновения 39 фоновой окраски. Сравнение полученных электрофореграмм производят денситометрически (на денситометрах

ИФО-450, 7ип1ог, Kipp 8 Zonen, Densito-Lab 174 и т.п.) .

Пример 2. Полностью сохраняют условия и режим электрофореза, приведенные в примере 1, однако в блоке трапециевидной формы или в блоке-клине находится однородный

ПААГ (например, 10%). Сравнение 36 электрофореграмм в блоке параллелепипеде и в предлагаемых блоках проводят денситометрически.

Использование блоков трапециевид- ° ной формы или блоков в форме клина с градиентом IIAAT позволяет увеличить разрешающую способность электрофореэа до 400 Д, т.е. более, чем в два раза, а также сократить время электрофореза в 1,5-2 раза по сравнению с блоками .в форме прямоугольного параллелепипеда. Кроме того, применение предлагаемого типа пластин без градиента ПААГ позволяет получить приблизительно тот же уровень разрешения, что и в пластинах в форме прямоугольного параллелепипеда с градиентом ПААГ.

1. Блок геля для электрофореэа, отличающийся тем, что, с целью повиаения разрешающей способности, он выполнен расширяющимся в направлении миграции разделяемых компонентов.

2. Блок по п. 1, о т л и ч а ющ и и .с я тем, что, он выполнен в форме пластины, противоположные широкие плоскости которой параллельны друг другу и имеют форму равнобочной трапеции.

3. Блок по п. 1, о т л и ч а юшийся тем, что он выполнен клинообразной форьы.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент США Р 3047489, кл. 204/299 1962.

2. Филиппович Ю.Б., Егорова Т.A., Севастьянова Г.A. Практикум по об.щей биохимии. И., Просвещение, 1975, с. 85-94 (прототип).