Штамм lастовасillus асidорнilus 578-продуцент бактериоцина а-578

Штамм lастовасillus асidорнilus 578-продуцент бактериоцина а-578

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советскик

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ ЕТЕЛЬСТВУ

«»896071 (61) Дополмительмое к авт. сеид-ву(22) Заявлемо 24.0380 (21) 2899389/28-13 с присоединением заявки М— (23) Г1риоритет— (51)М. Кл

С 12 P 1/04 С 12 P 1/04

С 12 R 1/23

Государственный комитет

СССР по делам нз брений и открытий

Опубликовано 070182. Бюллетень М1

Дата опубликования описания 0701.82 (53) УДК 576.8.094 (088. 8) (72) Автор изобретения

В.A. Филиппов (71) Заявитель

Полтавский медицинский стоматоло институт (54) ШТАММ LACTOBACILLUS АСХ0ОРНПЛ$

578 — ПРОДУЦЕНТ БАКТЕРИОЦИНА A-578

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается нового штамма — продуцента бактериоцина.

Известен штамм LactobaciKCus aciЙорЫ.сиз 574 — продуцент бактериоцина A-574 fl).

Однако известный штамм, продуцирующий бактериоцин, не проявляет активность в отношении культур.

Цель изобретения — новый штамм

ЬассоЬас10сцз qcidophifus,lnpopyцирующий бактериоцин активный против культур LpCantarum.

Предложенный штамм LactobaciCCus

acidophiCus 578 выделен из слюны человека.

Штамм LactobaciLCus acidophifus

578 (хранится в Музее культур йромыаленных микроорганизмов института ВНИИгенетика под номером

ЦМПМВ-1910) — продуцент бактериоцина A-578.

Культурально-морфологические признаки. На среде MPC-1 (48-часовая культура) представляет собой полиморфные палочки 5-7 0,6-0,8 мкм, располагающиеся поодиночке и попарно последовательно с закругленными концами. Волютиновых вверен не образуют.

Грамположительны. Спор и капсул не имеют. Неподвижны.

Ацетатный агар. Через 72 ч роста при 37 С в атмосфере углекислого газа образуют до 2 мм в диаметре, круглые, сероватого цвета колонии, со слабовыпуклой ., морщинистой, тусклой, сухой поверхностью, полупрозрачные, с волнистым краем, волокнистой структурой, плотноватой консистенции.

Среда МРС-1 ° Через 24 ч выращивания при 37 С равномерное помутнение и небольшой аморфный осадок.

1,5% агаровая скошенная среда

>S -МРС-1. Через 48 ч роста при 37 С налет сероватого цвета с шероховатой, тусклой, сухой поверхностью, полупрозрачный, плотноватой консистенции, располагающийся на поверхности среды. лО Среда ИРС-5. Через 24 ч при культивировании при 37 С равномерное помутнение среды и небольшой аморфный осадок.

Среда MIIC-2. Не растет при 50 и

15 С. Среда MPC-2 с 0,4% типоля.

Рост отсутствует..Обезжиренное молоко с 5% дрожжевого автолизаита и 1% глюкозы. Створаживает на 2-3 сут.

Среда Дейвиса. Створаживание и

3() пожелтение среды на 2-3 сут.

896071

Молоко. Створаживает на 4-5 сут.

Физиолого-биохимические признаки. Факультативный анаэроб. Оптимальный рост при 32-37 С. Желатину не разжижает. Нитраты в нитриты не восстанавливает. Каталазу не образует.

На среде Гибсона и Абд-эль-Малека ферментирует глюкозу беэ образования газа. Ферментирует.целлобиозу, галактозу, мальтоэу, сахароэу, маннозу, лактозу и салицин с образованием кислоты. Не расщепляет рамнозу, крахмал, сорбит и маннит.

Молоко. Через 14 сут содержание кислот достигает 0,38%.

Антагонистические свойства. Обрадует бактериоцин A-578 на 1,5%агаровой и жидкой среде МРС-1.

Получение бактериоцина A-578 на

1,5В агаровой среде МРС-1.

Суточную культуру L.acidophifus

578 засевают уколом на чашку с 1,5Ъ агаровой средой MPC-1 и выращивают 3

3 сут при 37ОС в ваКуум-эксикаторах, в которых воздух заменен углекислым

40 газом. Выращенную макроколонию стерилизуют парами хлороформа, после чего поверхность среды заливают вторым слоем 4 мл 0,8 агаровой среды MPC-1, расплавленной и охлажденной до 46 С, смешанной с .0,5 мл 4-часовой индикаторной культуры L.Kactis ATCC 800.

После .застывания среды посевы выращивают при 37ОС в течение 2 сут. Вокруг макроколонии L.acidophifus 578 наблюдается .прозрачная с не совсем четким краем. зоны подавления роста индикаторного. штамма 16 мм в диаметpeв

L.brevis, L.bucheuri, а также L.pCantarum.

Получение бактериоцина A-578 на жидкой среде MPC-1.

Культуру L.acidophi

По одной петле каждого разведения наносят.на поверхность чашки с..1,5% .агаровой.средой МРС-1, засеянной 4часовой .индикаторной культурой L.6 actiq.ATCC 800. После выращивания при

37 С в течение .2 сут производят учет.

Титр бактериоцина A-578 на жидкой орое МРС-1 †. 1:4.

Спектор действия бактериоцина

A"578.

Подавляет рост ряда культур L.acidophi us, L.hefveficus, L.sa8ivarins, 1 Р

L. jugurti, 1., actis, L. Peichmannii, L.delbmeckii, L.casei, L.fermentum, Бактериоцин А-578 инактинируется трипсином, химотрипсином, пепсином и папаином, не разрушается дезоксирибонуклеазой, рибонуклеазой и лоэицимом. При автоклавнровании при 1,5 атм разрушается через 30 чин. Диффундирует через целлофан. Бактериоцин

A-578 реплицируется на индикаторном штамме Ь. Cactis ATCC 800.

Предлагаемый штамм L.acidophifus

578 по сравнению с известными продуцирует бактериоцин А-578, который может быть использован не только для бактериоцинотипирования и бактериоциногенотипирования культур L.acidopИця, L.he8veficus, L.sa8ivarins, L,jugurti, L. 8actis, L.bichmannii, L.defbmeckii, L.casei, L.fermentum, 1 цспцеГ1 Но и культур

L.pgantarum.

По чувствительности к бактериоцину A-578 (бактериоцинотипирование) культуры перечисленных выше видолактобацилл подразделяются на следующие бактериоцинотипа: первый — чувствительный к бактериоцину A-578 и второй — устойчивый к бактериоцину A-578.

При бактериоцинотипировании 586 культур лактобациил разных видов получены следующие результаты.

Из 187 культур L.acidophiCus 155 относятся к первому бактериоцинотипу и 32 культуры — ко второму..Иэ 65 культур L.safivarius 15 относятся к, первому бактериоцинотипу и 50 — ко второму. Из 16 культур Ь.jugurti 15 относится к первому бактериоцийотипу и 1 культура — ко второму. Иэ 84 культур L.fermentum 49 относятся к первому бактериоцинотипу и 35 культур — ко второму. Из 13 культур

L.burchueri 4 относятся к первому ьактериоцинотипу .и 9 культур †.ко второму. Из .144 культур L.casc1 82 относится к первому бактериоцинотипу и Ь2 культуры — ко второму, из 23 культур L.pfanterem 2 относятся к первому бактериоцинотипу и 21 культура — ко второму.

4 культуры L.hå våticus, 2 культуры L.Яас11я и ?.Ве1chmannii, 1 культура L.Qefdmeckii и 43 культуры

L.brevis принадлежат к первому бактериоцинотипу. 2 культуры L. се Моы.ояця устойчивы к действию бактериоцина

A-.578 . Использование предлагаемого штамма, продуцирующего бактериоцин A-578, дает возможность по генетическим меткам проводить дальнейшее, более глубокое и детальное внутривидовое,подразделение не только культур L.acidophi(us, 1 .пейче 1сия, L.sa61variця.. L.jugrti, L,Cactis, L,,«Âåichmànп11, L,defbmeckii, L.casei, Ь.fermentum, L.brevis u L.buchneri, но и культур L.p0anturum, обладающих одинаковыми биохимическими и физиологическимй свойствами, на бактериоцино896071

Составитель С. Малютина

Техред А.Ач Корректор A. Дзятко

Редактор М. Келемеш

Заказ 11ь31/10 Тираж 504 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-ЗЬ, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 типы и бактериоциногенотнпы (бактериоцинотипирование и .бактериоциногенотипирование), .а такие находит .приме-. нение.в исследованиях по генетике н физиологии бактериоциногении лакто. бацилл, при изучении химического строенйя и механизма действия.бактериоцина A-578.

Формула изобретения

Штамм LactobaciCCus acidophitus

578 (хранится в Музее культур промыаленных микроорганизмов института ВНИИ .генетика . под номером, .ЦМПМ В-1910) — продуцент бактериоцина А-578.

5 : . Источники информации, принятые во.внимание при экспертизе

1, Авторское свидетельство СССР по заявке В 2685277, кл. С 12 D 9/22, 9 1978.