Приспособление для метки клеток
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Оп ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6} ) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 180578 (2} ) 2617453/18-10
Союз Советские
Социалистические
Республик (i >>901973 (5l )M. Кл.
G 02 В 21/32 с присоединением заявки РЙ
9еударетееневй квинтет
СССР во делен изобретений и открытей (23) Приоритет (53) УДК 535.823 (088.8) Опубликовано 300 1.82. Бюллетень М 4
Дата опубликования описания 300 182 (72) Автор изобретения
В, Н, Рейнгольд
i
Институт полиомиелита и вирусных энцеф литов АИН СССР (7}) Заявитель (54) ПРИСПОСОБЛЕНИЕ ДЛЯ МЕТКИ КЛЕТОК
Изобретение относится к оптикомеханическому приборостроению, в частности к технике биологических и медицинских исследований. для приготовления электронномикроскопических препаратов путем изготовления тонких срезов и может быть использовано для механизированной отметки гравированием под контролем светового микроскопа прямоугольных рамок-меток вокруз связанных с задачей исследования участков, например единичных клеток, по поверхности пластиковых препаратовзаготовок, выполненных в форме стандартных препаратов для световой микроскопии.
В технике световой микроскопии биологических объектов, в частности в гистологии и цитологии, известны устройства для отметки областей пре20 парата, к которым исследователь желает повторно вернуться. Эти устройства представляют собой имитирующий объектив микроскопа штырь, который ввинчивается как объектив в револьверную головку микроскопа и вокруг которого вращается надетая на него и подпружиненная рубашка с алмазным резцом на торце, расположенным несколько в стороне от центра ее вращения, Обнаружив нужный участок под микроскопом, оператор замещает, объектив путем поворота револьвера на устройство для отметки, приводит это устройство в соприкосновение с препаратом и, повернув рубашку упомяну- . того устройства на 360, гравирует обводную метку, которая благодаря люфту рубашки получается в виде несомкнутой круговой петли, охватывающей слишком большой участок препарата, чтобы быть пригодной для целей электронномикроскопической техники }.13.
Недостатками известных устройств являются отсутствие визуального контроля в процессе нанесения метки, ohaсность нанести механическое повреж3 90197 дение на объект исследования во время вдавливания матрицы, высокая стоимость изготовления набора сменных матриц по форме (квадрат, прямоугольник, трапеция) и по величине охвата маркируемой площади объекта.
Известно маркирующее устройство, действующее способом вдавливания печатающей матрицы в поверхность препарата, Печатающую матрицу выполняют щ как на торцах устройств, имитирующих объектив, так и на фронтальной поверхности линзы объектива в виде алмазной пирамидки 21 ° ! е
Данное устройство позволяет выполнить отметку при визуальном контроле через микроскоп, однако отметка строится путем четырехкратного вдавливания отпечатков вокруг объектива таким образом, чтобы мыслимые линии, соединяющие противостоящие пары отпечатков, пересекались в центре объекта, т-,е, отметка в этом случае является недостаточно точной.
ЭЗ
Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности является микроманипуляционное приспособлениеприставка к объективу светового ми кроскопа, которое имеет стяжной хомутик, укрепленный на корпусе объектива 20-кратного увеличения с рабочим расстоянием в 1, 4 - 1,8 мм, несущую стойку, закрепленную винтом в теле хомутика и опускающуюся вниз вдоль тела объектива, обойму-суппорт на ниж нем конце несущей стойки с двумя направляющими, между которыми перемещается под действием винта возвратнопоступательно в сторону оптической оси объектива выносная подпружиненная стальная пластинка с иглой-резцом на заостренном конце, впаянным под углом, превышающим апертурный угол объектива, и вводимым в рабочее пространство между фронтальной линзой объ- ектива и препаратом. Данное приспособление дает возможность изучать препарат и выбирать нужные клетки при относительно высоком увеличении (от 100 до 300 крат) в режиме фазового контраста с тонкой цитологической характеристикой клеток, позволяет гравировать вокруг отмечаемого объекта прямоугольную обводную рамку, величина которой переменна и определяется величиной M объекта и выполнять любые дополнительные отметки, например знаки, индивидуализирующие тип объекта, номер от3 ф метки и линии для коррекции последующей заточки пирамид (3l.
Недостатком известного приспособпения является наличие жесткой связи по высоте между объективом и резцом, обусловленной неподвижностью несущей стойки в вертикальном направлении.
Такое положение приводит к тому, что во время гравирования отметки, когда резец приводят в соприкосновение с поверхностью препарата путем вращения рукоятки тонкой наводки микроскопа на резкость, изображение отмечаемого объекта дефокусируется и размывается, что затрудняет точное выполнение метки.
Цель изобретения — обеспечение резкого изображения отмечаемого объекта и повышение точности выполнения отметки, Поставленная цель достигается тем, что в приспособлении для отметки клеток стяжной хомутик, установленный на корпусе объектива микроскопа, выполнен с дополнительным посадочным местом, s котором установлен цилиндр гидравлического приводного устройства, подпружиненном на поршне которого снизу укреплена верхним концом несущая вертикальная стойка, На фиг. 1 изображено схематически боковое сечение приспособления для отметки клеток; на фиг, 2 - разрез
А-А на фиг. 1; на фиг ° 3 - разрез
Б-5 на фиг, 1; на фиг, 4 - боковое сечение гидравлического приводного устройства, Приспособление для метки .клеток содержит стяжной хомутик 1, зафиксированный на микроскопном объективе
2 винтом 3, стягивающим посадочное место объектива, несущую стойку 4, укрепленную в теле упомянутого хомутика и опускающуюся вдоль корпуса объектива, суппорт 5 на нижнем конце несущей стойки, оснащенный двумя направляющими 6, между которыми перемещается под действием винта 7 возвратно-поступательно в горизонтальной плоскости в сторону оптической оси 8 объективная выносная подпружиненная пружиной 9 металлическая пластинка
1О с резцом 11 на заостренном конце; установленным под углом, превращающим апертурный угол объектива, и вводимым в рабочее пространство между фронтальной линзой объектива и препаратом.
901973 6
В стлжном хомутике 1 во втором стяжном посадочном месте винтом 12 зафиксирован цилиндр l3 гидравлического привода рабочей камерой кверху, на подпружиненном пружиной 14 пора- 5 не 15 которого снизу укреплена верхним концом несущая стойка 4, а гидравлическое приводное устройство с микрометрическим контролем подачи рабочей жидкости, соединенное с помощью гиб- 16 кой пластиковой трубки 16 со штуцером
17 в верхнем торце цилиндра 13 гидравлического привода, помещено на. столе рядом с микроскопом.
Гидравлическое приводное у строиство содержит инъекционный медицин ский шприц 18, прикрепленный сверху к массивйой подставке l9, пружину 20 вокруг штока 21 шприца с упором ее 20 в тыльный торец 22 цилиндра 23 и пуговку 2Ч под палец на штоке, а также микрометрическую винтовую головку 25 с остаточной и нониусной шкалами, укрепленную на подставке 19 таким обра- > зом, что при повороте рукоятки 26 микрометрической головки 25 по движению часовой. стрелки подвижный стержень 2/ микрометрической головки толкает шток 21 и поршень 28 шприца 18 0 вглубь цилиндра 23, и, наоборот, при вращении рукоятки 26 против движения часовой стрелки под действием пружины
20 шток 21 и поршень 28 шприца выдвигаются из глубины цилиндра 23, Приспособление для меток клеток работает следующим образом.
Устанавливают под контролем свето-4р вого микроскопа режущий кончик резца
11 в центре поля зрения, манипулируя винтом 7 на суппорте 5 и поворотом в посадочном месте после ослабления стяжки винтом 12 цилиндра 13 гидравли- ческого привода, Поднимают суппорт 5 с помощью приводной рукоят ки 26 гидра влического приводного устройства в верхнее положение, при котором видно . резкое изс бражение объекта, а резец
11 не касается поверхности препарата, Производят изучение препарата и поиск структуры, связанных с задачей исследования. Обнаружив нужную структуру, опускают с помощью упомянутой рукоятки 26 гидравлического приводного устройства суппорт 5 до прикосновения режущего кончика резца 11 с поверх-. ностью препарата в том месте, где должна быть сделена гравировкой первая линия обводной отметки, производят, манипулируя рукоятками для пере. мещения препаратовддителя и подвижного стола предметного столика микроскопа, гравирование обводных линий метки вокруг объекта, По окончании первой метки рукояткой 26 гидравлического приводного устройства поднимают режущий кончик резца 11 над поверхностью препарата и выполняют описанным выше способом все последующие метки.
Предлагаемое приспособление для метки клеток обеспечивает выполнение гравирования отметки вокруг выбран" ного объекта исследования при резком (сфокусированном) его изображении.
Благодаря этому оператор может уверенно и быстро гравировать обводные линии отметки на расстоянии .0,5-1,0 мкм от границ объекта, в то время как известное устройство в условиях размытого (дефокусированного) изображения из-за опасности задеть режущим инструментом объект отметки позволяет производить ее на расстоянии 5 - 10 мкм, т.е. на порядок дальше, Поскольку приспособление для меток клеток конструктивно сопряжено со световым микроскопом, как правило имеющимся в лабораториях электронной микроскопии биологического и медицинского профилей, и может быть изготовлено в виде приставки к нему, то ,отйадает необходимость в разработке и выпуске промышленным путем специального автономного прибора для этой цели °
Формула изобретения
Приспособление для метки клеток, выполненное в виде установленного на корпусе объектива светового микроскопа стяжного хомутика с укрепленным в посадочном месте последнего объективом микроскопа и несущей вертикальной стойкой, снабженной суппортом с двумя направляющими, между которыми установлена с возможностью во звратно-поступательного движения в горизонтальной плоскости выносная подпружиненная металлическая пластинка с резцом на заостренном конце, установленным под углом, превышающим
? 901973 8 апертурный угол объектива, и вводимым 1. Аппельт Г. Введение и методы в рабочее пространство между фронталь.. микроскопического исследования. М., ной линзой объектива и препаратом, Медгиз, 1959, с. 303, о т л и ч а ю щ е е с я тем; что, с целью получения резкого изображения s 2. Авторское свидетельство СССР отмечаемого объекта и повышения точ- Г 429481, кл, G 0 2 В 21/32, 1974 . ности выполнения отметки, стяжной хомутик выполнен с дополнительным поса- 3. Рейнгольд В.Н. Простое присподочным местом, в котором установлен собление для метки клеток культур цилиндр гидравлического привода, на 1В тканей и клеток "толстых" срезов ткаподпружиненном поршне которого, снизу ней животного организма, залитых в укреплена верхним своим концом несу- полиметакрилате в форме плоскопаралщая вертикальная стойка. лельных пластинок". !Ч Всесоюзное
Источники информации, совещание по электронной микроскопии. принятые во внимание при экспертизе 1Ф Суммы, 1963, с. 107-108 {прототип).
901973
1В
Составитель .В. Вангорин
Редактор Л, Горбунова Техред И. Гайду Корректор О. Макаренко
Ъ»
Заказ 12379/57 Тираж 515 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
1 13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5
В
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4