Питательная среда для культивирования l-форм микробактерий туберкулеза

Питательная среда для культивирования l-форм микробактерий туберкулеза

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советских

Социалистических

Респубпик

О П И С А Н И Е (iu908794

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6l ) Дополнительное и авт. свиг, ву (72) Авторы изобретения

Г. Г. Мордовской и E. А. Птнцина.У

Свердловский научно-исследовательский инст т ry (7l) Заявитель (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ

L — ФОРМ MHKOSAKTEPHA ТУБЕРКУЛЕЗА

0,001 — 0,15

0,0025 — 0,03

18,0 — 22,0

Гликокоп

Алании

Сахароза

Нативная сыворотка крови

Лкионнокислый натрии

Лимоннокислое железо

10,0-25,0

0,01 — 0,2

0,003 — 0,006 аммиачное

Фосфорнокислый калий однозамеще нный

Сернокислая магнезия

Глицерин

Бура

Малахитовая зелень

Бриллиантовая зелень

Этиловый спирт

Агар — агар

Вода

Пример, 11риготоннсние

0,01 — 0,2

0,02 — 0,62

0,1 0,3

0,0002 — 0,0005

0,005 0,015

0,01-0,05

0,01 — 0,05

0,25-0,4

Остальное

Изобретение относится к микробиологии и касается питательных сред для выращивания

1:форм различных видов микобактерий.

Известна питательная среда для культивирования 1=форм микобактерий туберкулеза, содержащая источник азота, сахарозу,. нативную сыворотку крови, лимоннокислый натрий, лимоннокислое железо аммиачное, минеральные соли, агар-агар и воду 111.

Однако известная среда не обеспечивает

10 быстрого роста L-форм микобактерий туберкулеза.

Цель изобретения — ускорение роста Ьформ микобактерий туберкулеза.

Поставленная цель достигается тем, что пита15 тельная среда для культивирования L-форм микобактерий туберкулеза, содержащая источник азота, сахароэу, нативную сыворотку крови, лимоннокислый натрий, лимоннокислое железо аммиачное, минеральные соли, агар-агар и воду, дополнительно содержит глицерин, буру, малахитовую зелень, бриллиантовую зелень, этиловый спирт 96, в качестве источника азота она содержит глнкокол и алании, в качестве мннеральных солей — фосфорнокислый калий однозамещенный н сернокнслую магнезию, при следующем количественном соотношении компонентов, вес.%:

3 908794

Для приготовления одного 1 л питательной среды берут слсцую|цие навески ингредиентов по рацеи у:

Калий ф<хфорнокислый однозамешенный, г 1,0 5

Сернокислая магнезия, г 3,0

Лимоннокислый нагрий, г 1,0

Лимоннокислое железо аммиачное, г 0,04

Глнкокол, г 0,7 to

Алании, г 0,2

Глицсрш, г 2,0

Бура, г 0,003

Малахиговая зелень, r 0,1

Бриллиантовая зелень, r 03 15

Э гнлоный спирт 96, г 0,3

Агар-агар, г 3,0

Сахароза, г 200,0

Натианая сыворотка, мл 175

Вода До 1л ?0

Навескн буры малахитовой и бриллиантовой зелени предварительно растворяют в 0,3 мл этилового спирта, добавляют 2,0 мл глицерина и тщательно смешивают. Полученный таким образом раствор бактерицидных веществ смешивают с раствором остальных ингредиентов, предварительно растворенных в 820 мл подогретой дистиллированной воды, и автоклавируют при 1,5 атм 1 мин.

Приготовление рабочей среды.

К 825 мл среды — заготовки стерильно добавляют 175 мл нативной сыворотки крупного рогатого скота или лошади, тщательно перемешивают и разливают по 5 мл в стерильные пробирки.

Хранение и транспортировку проводят в герметично закупоренных пробирках при температуре от 0 до +22 C до 3 — 4 мес.

Результаты испытаний различных питательных сред для 1:форм микобактерий представлены в таблице.

4О

Питательные среды состава

Показатель изве ного аемого и- максим аль, 45 ного ого

Приготовление Перед ис- Заблаговременно пользовакием

Сроки хранения, недель 3 —.4

Температура хранения, ьС 0-5

Сроки роста

L-колоний, сут штамм БЦЖ 20 штамм Натру 25

12 — 16

0 — 22

16 14 15

20 18 19

Продолжение таблицы

Питательные среды состава

Показатель извест предлагаемого ного максимини- олти маль мального ного мального

Высеваемость,%!

18 20 19

Количество проростов, %

13 12 1О

Использование предлагаемой питательной среды позволяет ускорить рост колоний L-форм на 4 — 7 дней, уменьшить количество проростов микрофлорой загрязнения в 3,8 раза и повысить высеваемость L-форм из патологического материала на 60%.

Формула изобретения

Питательная среда для культивирования форм микобактерий туберкулеза, содержащая источник азота, сахарозу, нативную сыворотку крови, лимоннокнслый натрий, лиь:оннокислое железо аммиачное, минеральные соли, агар-агар и воду, отличающаяся тем, что, с целью ускорения роста L-форм микобактерий, она дополнительно содержит глицерин, буру, малахитовую зелень, бриллиантовую зелень, этиловый спирт 96, в качестве источника азота она содержит гликокол и алании, в качестве минеральных солей — фосфорнокислый калий однозамешенный и сернокислую магнезию, при следующем количественном соотношении компонентов, несЯ:

Гликокол 0,001 — О,!5

Алании 0,0025 — 0,03

Сахароза 18,0 — 22,0

Нативная сыворотка крови 10,0 — 25,0

Лимоннокислый натрий 0,01 — 0,2

Лимоннокислое железо

0,003 — 0,006 аммиачное

Фосфорнокисчь:й калий однозамешенный

Сернокислая магнезия

Глицерин

Бура

Малахитовая зелень

Бриллиантовая зелень

Этиловый спирт

Агар — агар

Вода

0,01 — 0,2

0,02 — 0,62

0,1-0,3

0,0002 — 0,0005

0,005 — 0,015

0,01 — 0,05

0,01 — 0,05

0,25 — 0,4

Остальное

Источники информации; принятые во внимание при экспертизе

1. Дорожкова И. Р., Волк А. В. Частота индукции 1:форм мнкобактерий туберкулеза нод влиянием циклосерина и его сочетаний с другими препаратами.— "Антибиотики"., У 9, 1972.