Способ получения слизи из васillus мuсilаginоsus
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Союз Сттветсиих
Социалистических
Республик
ОП ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ (ii)908797
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт, свид-ву (22) ЗаЯвлено 14.02.79 (21) 2724244/28 — 13 с присоединением заявки лй (23) П риоритет (53)M. Кл.
С 12 P 1/04 йкударствениый квинтет
СССР ав лелем нвабретеннй н юткрытнй
Опубликовано 28.02.82. Бюллетень М 8
Дата опубликования описания 28.07.82 (53) УД К 576.8. .093.33 (088.8) (72) Авторы изобретения
Е. Я. Виноградов, В. С. Злобин, В. П. и Г. В. Матвеева (73) Заявитель
Ленинградский ордена Трудового Красного 3 исследовательский институт эпидемиологии и м (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЛИЗИ ИЗ BAC)LLUS
МОС11.А61ИОЗОЗ
Изобретение относится к медицине, а именно к способам получения биологически активных веществ микробного происхождения.
Известен способ получения слизи нэ Baci—
11оа muci 1 aginosus путем культивирования проS дуцента на плотной питательной среде с последующим выделением целевого продукта 111.
Однако известный сж,соб позволяет лолучить только 30 — 40 мл препарата иэ 1 л среды, т. е. имеет низкий выход целевого продукта.
Цель изобретения — повышение выхода целевого продукта.
Поставленная цель достигается тем, что цри осуществлении способа получения слизи из
8aci11us muci1aginosus путем культивирования продуцента на плотной питательной среде с последующим выделением целевого продукта, продуцент предварительно культивируют на среде, содержащей 100 — 200 мл мясопептонного бульона и 100-200 мл сенного отвара в течение
1-2 суток, а затем в течение 18-24 ч на плотной питательной среде, содержащей мясопептонный агар 100 †2 мл; хлористый натрий 0,5—
1,0 г; сахар 1,5 — 3,0 г; 5 -ный раствор фенола 0,2 — 0,4 мл.
При этом в качестве сахара используют глюкозу, сахарозу, мальтоэу или левулсзу.
Способ осуществляют следующим образом.
В течение 1 — 2 суток культивируют Ва
ci11us muci1aginosus на питательной среде, содержащей 100 мл мясопептонного бульона со 100 мл сенного отвара. Полученную культуру можно использовать не сразу, а хранить при комнатных условиях (6 мес. — срок наблюдения) во флаконах. При необходимости берут 1 — 2 капли полученной бульонной культуры и засевают шпателем на питательную среду, разлитую по чашкам Петри, компоненты которой взяты в следующих. количествах:
100 мл мясопептонного агара, содержащего
0,5 r хлористого натрия; 1,5 — 3,0 r сахара;
0,1 — 0,2 мл 5%-ного фенола.
Особенностью посева является то, что засеянные чашки не переворачивают на крышку, чтобы избежать потери большого количества слизи. Посевы культивируют в термостате прн 37 С. Через 18 — 24 ч инкубации вся по908797
Составитель Ю. Алмазов
Техред З.фечо
Редактор Е. Днчинская
Корректор Г. Отар
Заказ 749/27 Тираж 505
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Подписное
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4
3 верхность питательной среды в чашке Пе1ри покрывается тонкой пленкой. под которой содержится большое количество слизи. Если наклонить чашку Петри под углом 60 — 70, заметно как слизь под пленкой медленно
5 перемещается по наклонной плоскости.
Этот тест является критерием оценки результата образования слизи. Если посевы находятсл длительное время в термостате, то слизь подсыхает и перемещение жицкости под плен- 10 кой не наблюдается. Аналогичная картина отмечается и прн недостаточной экспозиции культивирования илн же при лосеве на плохо приготовленную питательную среду. Для сбора слизи с поверхности питательной среды, торцом 1ч узкой стороны предметного стекла (стекло должно быть со шлифованными краями) всю слизь осторожно собирать на край чашки Петри. чтобы не снять поверхность агара, и cmaaют во флакон или колбу. Полученную слизь центрифугируют нри 6000 об/мин в течение
1 ч. Надосадочную густую жидкость из центрифужных стаканчиков собирают во флакон, осадок выбрасывают. Полученный препарат хранят в холодильнике или при отсутствии холодильника, флакон со слиэыв. стерилизуют в автоклаве (1 атм — 20 see) и" хранят при комнатной температуре. Из 1 л среды получают 100-150 мл слизи.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить выход целевого продукта в 3-4 раза, т. е. до 100 — 150 мл слизи из
1лсреды,,в то время как при применении известного способа 30 — 40 мл слизи. формула изобрет ния
1. Способ получения слизи из 8sci11us muci—
1aginosus путем культивирования продуцента на плотной питательной среде с последующим выделением целевого продукта, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повыщрния выхода целевого продукта, продуцент предварительно культивируют на среде, содержащей 100 — 200 мл мясопептонного бульона и 100 — 200 мл сенного отвара, в течение 1-42 суток, а затем в течение 18 — 24 ч на плотной питательной среде, содержащей мясопептонный агар 100 — 200 мл; хлористый натрий 0,5 — 1,0 г; сахар 1,5 — 3,0 r;
5%-ный раствор фенола 0,2 — 0,4 мл.
2. Способ по н. !, î z л и ч а ю шийся тем, что; в качестве сахара используют глюкозу, сахарозу, мальтозу или левулеэу.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1, Справочник до микробиологическим и вирусологическим методам исследования. Под ред. М. О. Биргера. М,, "Медицина", 1967, с. 158.